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1、原种和栽培种的制作,德化鹏祥中学,原种和栽培种的制作,原种和栽培种的制作,原种和栽培种的制作,原种是将母种在无菌的条件下转接到装有粪草、木屑、棉籽壳或谷粒等培养料的菌种瓶进行扩大栽培的菌种，又称二级菌种或瓶装菌种。栽培种是将原种转接到装有相同或相似培养料的菌种瓶或聚丙烯塑料袋中进行扩大培育、用于生产的菌种，又称三级菌种、生产种或袋装菌种。,母种,原种,栽培种,原种和栽培种常用培养料,1、木屑麸f皮(小麦最外层的表皮，小麦被磨面机加工后，变成面粉和麸皮两部分，麸f皮就是小麦的外皮，多数当作饲料使用)培养料木屑78%、麸f皮20%、蔗糖1%、石膏1%，料水比1：（1.21.5）。制法：先将蔗糖溶于
2、水中，再将木屑、麸f皮、石膏充分混匀，然后用已溶化的糖水搅拌均匀。含水量掌握在以手捏紧，指缝有水渗出但不滴下为准。装瓶，灭菌。,原种和栽培种常用培养料,2、棉籽壳（棉皮，是棉籽经过剥壳机分离后剩下的外壳。）培养料棉籽壳78%、蔗糖1%、石膏1%、石灰1%，料水比1：（1.51.6）。制法：棉籽壳用水拌湿，加入适量石灰拌匀，调节pH至7.58，然后加石膏及糖水拌匀。含水量掌握在以手捏紧，指缝有水渗出但不滴下为准。装瓶，灭菌。,原种和栽培种常用培养料,3、稻草粉培养料稻草粉70%、麸f皮24%、豆饼粉3%、碳酸钙1%、石膏1%、蔗糖1%。制法：先把麸f皮、豆饼粉、碳酸钙、石膏拌成混合料，再把糖溶于
3、水中，用已溶化的糖水与混合料、稻草粉再水拌匀。含水量掌握在以手捏紧，指缝有水渗出但不滴下为准，pH调到8。装瓶，灭菌。,原种和栽培种常用培养料,4、麦粒培养料麦粒97%、碳酸钙1.5%、石膏1.5%。制法：先把小麦洗干净，浸泡24小时后捞起，加适量水于锅中煮熟，不要煮破种皮。捞起沥干多余的水分，拌入碳酸钙和石膏。装瓶，灭菌。,培养基的制作,一、原种或栽培种培养料配方：麦粒97%、碳酸钙1.5%、石膏1.5%。二、实验用具：天平1台、铝锅1个、电炉1个、750mL的料瓶2个、菌种袋（28cm14cm）2个、小铲1把、拌料盆1个、棉花塞2粒、牛皮纸1张、橡皮筋2个、高压灭菌锅（共用）。,750mL
4、的料瓶,菌种袋,拌料盆,培养基的制作,三、实验材料：麦粒、碳酸钙、石膏。四、方法步骤：1、称取麦粒970g、碳酸钙15g、石膏15g。2、将麦粒洗干净，浸泡24小时。麦粒捞起后，加适量水于锅中煮熟，以不煮破种皮为宜。捞起麦粒，沥干，拌入碳酸钙和石膏。,石膏,麦粒,培养基的制作,3、配好的培养料要及时装瓶（袋），菌种瓶通常用750mL的专用瓶，菌种袋通常用长宽为30cm 14cm（或26cm 13cm）、厚0.5mm的聚丙烯袋。通常原种培养用菌种瓶，栽培种培养用菌种袋。装料时，适当压实，在料中间扎直径约2cm、深约10cm的孔（这样有利于菌丝生长）。每个750mL的菌种瓶装干重约200g的培养料
5、，料面须在瓶肩以下，然后塞上棉花塞（棉花塞比瓶口略粗，以稍用力即可旋入瓶口为宜，塞入瓶口的长度约为棉塞长度的2/3），棉花塞外再用牛皮纸包扎好，以防棉塞在灭菌时受潮。每菌种袋装干重约300g的培养料，袋口套上塑料环，然后用棉塞或塑料盖封口。,培养基的制作,4、将装好培养料的菌种瓶（袋）用湿布擦干净，即可放入高压锅内灭菌。在压力达1.5千克/平方厘米、温度126下维持22.5小时（也可在常压下灭菌1012小时）。,原种的制作,一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种钩1把、酒精棉球（装在广口瓶中）。,原种的制作,二、实验材料：母种斜面试管1支、原种培养料。,原种的制作,三、方法步骤：1、将灭菌后
6、的原种培养料搬到无菌室，待温度下降至27左右时，置于接种箱用紫外灯灭菌（40分钟）。2、用75%的酒精球消毒手和母种试管外壁。3、点燃酒精灯，在酒精灯火焰上灼烧接种钩，冷却。4、接种者手持母种试管，在火焰上方拔掉母种试管和菌种瓶的棉塞，试管口对准酒精灯火焰上方，用火焰烧一下试管口。,原种的制作,5、将冷却的接种钩，伸入试管，取一块带菌丝的2cm3培养基，放入菌种瓶内，稍加压实，使菌种与培养料津贴。6、培养瓶口、棉塞过火焰后，塞好培养瓶，并贴上标签（注明菌种名称和接种时间）。7、接种后移入培养箱，一般在温度2628、湿度55%65%的条件下培养。一般培养3540天左右，菌丝可长满瓶。8、培养期间
7、，每隔23天要检查一次，若发现感染菌应及时处理。,栽培种接种,一、实验用具：酒精灯1个、火柴1盒、接种匙1把、酒精棉球10粒、木架1个。,栽培种接种,二、实验材料：原种瓶、栽培种培养料。,栽培种接种,三、实验步骤：1、将灭菌后的栽培种培养料搬到无菌室，待温度下降至27左右时，置于接种箱灭菌（40分钟）。2、用75%的酒精球消毒手和母种试管外壁。3、点燃酒精灯，在酒精灯火焰上灼烧接种匙，冷却。4、将原种瓶固定在木架上，在火焰上方拔掉原种瓶棉塞和栽培种培养料上的棉塞（或塑料盖）。,栽培种接种,5、将原种瓶培养料表面的老菌种块和菌皮挖掉，用接种匙取满勺菌种至栽培种培养料，稍加压实。6、在火焰上方塞好棉塞（或塑料盖）。接种后，贴上标签（注明菌种名称和接种时间）。7、接种后移入培养室或培养箱，一般在温度2628、湿度55%65%的条件下培养。8、培养期间，若发现感染杂菌要及时处理。待菌丝长满全瓶，即为栽培种。,德化鹏祥中学,Thank You!,
