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1、医学微生物学,分枝杆菌属,结核分枝杆菌 形态、染色、培养特性和抵抗力 结核分枝杆菌感染的免疫特点 结核菌素实验的原理、结果判断和应用 微生物学检查和防治原则麻风分枝杆菌 形态、染色和致病性,结核分枝杆菌感染的免疫特点,重点,重点与难点,难点,*胞壁中含有大量脂质抗酸杆菌*大多生长缓慢*致病物质为菌体成分，无内外毒素，无芽孢、无鞭毛*致病多为慢性,分枝杆菌属特点,分枝杆菌分类,*结核分枝杆菌*牛分枝杆菌*麻风分枝杆菌*非结核分枝杆菌 部分为条件致病菌,致病菌,第一节 结核分枝杆菌,（Mycobacterium tuberculosis）,全球 感染 约20亿 现患 2000万 死亡 300万/年
2、 我国 活动性肺结核患者 500万 死亡 13万/年,一、生物学性状,*细长略弯（14）m 0.4m，有时呈分枝状*有微荚膜、无芽胞、无鞭毛*齐-尼抗酸染色阳性,形态与染色,菌膜,2.培养特性专性需氧*营养要求高改良罗氏培养基*生长缓慢34周形成可见菌落*兼性胞内菌巨噬细胞,不活泼,生化反应,较强，与脂质有关,四怕 怕湿热 怕酒精 怕紫外线 怕抗痨药物,四抗 抗干燥 抗酸碱 抗碱性染料 抗青霉素等,抵抗力,*形态结构*耐药性*毒力卡介苗,变异性,巴斯德研究所的Calmette和Guerin,强毒的、致病性的牛分枝杆菌,（BCG，Bacille Calmette-Guerin),弱毒的、失去致病
3、性的牛分枝杆菌减毒株,卡介苗的研制,二、致病性,致病物质多，主要为菌体成分,*荚膜：有助于黏附、入侵、抗吞噬等。*脂质：占60%，磷脂、脂肪酸、蜡质D、硫酸脑苷脂。*蛋白质：与蜡质D结合后能引起迟发型超敏反应，参与结核结节的形成。*多糖：使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。*核酸,致病物质,*磷脂：刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶活性，使病灶组织不分解，并使病灶中的巨噬细胞转变为类上皮细胞，从而形成结核结节和干酪样坏死。,*脂肪酸（分枝菌酸）：与抗酸性有关,索状因子：破坏线粒体膜及酶类，抑制白细胞游走，引起慢性肉芽肿。,*蜡质D：有佐剂作用，可激发机体产生迟发型超敏反应，引起慢性肉芽肿。,*硫
4、酸脑苷脂：抑制巨噬细胞内吞噬体与溶酶体融合，使该菌成为兼性胞内寄生菌。,结核病,*传播途径：呼吸道、消化道、皮肤损伤部位等,*多组织器 官结核病,肺外感染,肺部感染,原发感染,原发后感染,*基本病变：结核结节,所致疾病,原发综合征：原发病灶一淋巴管炎一淋巴结炎哑铃状双极现象,原发感染,（结核结节）局部炎症,结核性脑膜炎,内源性感染,巨噬细胞吞噬,呼吸道,肺,细菌繁殖菌体成分代谢产物,渗出性炎症增生性炎症变质性炎症,好转,吸收钙化,扩散,粟粒性结核,继发感染,原发感染与原发后感染特点比较,三、免疫性与超敏反应,*有菌免疫：或称传染性免疫（infection immunity）*细胞免疫：致敏T淋
5、巴细胞、激活的巨噬细胞,*郭霍现象（Kochs phenomemon）*结核菌素试验：型迟发型超敏反应,免疫性,细胞免疫与超敏反应同时存在,结核分枝杆菌注入健康豚鼠皮下,1014天,注射部位缓慢发生溃烂，病灶深而不易愈合，附近淋巴结肿大，细菌扩散至全身,同量结核杆菌注入康复结核的豚鼠皮下,12天,注射局部迅速出现溃烂，浅而易愈合，附近淋巴结不肿大，细菌也很少扩散,大量结核杆菌注入康复的豚鼠皮下,局部及全身严重的超敏反应甚至死亡,第二次,初次,第三次,郭霍现象,*原理：皮肤迟发型超敏反应*结核菌素试剂：旧结核菌素（OT）、纯蛋白衍生物（PPD）两种PPD：PPD-C；BCG-PPD*方法：取PP
6、D-C和BCG-PPD各5单位分别注入两前臂皮内，4872 h后观察结果,结核菌素试验,5 mm，阳性PPD-C BCG-PPD，感染PPD-C BCG-PPD，卡介苗接种15 mm，强阳性 活动性结核 5 mm，阴性未感染感染的初期老年人患严重传染病的患者,*结果分析,红肿硬结,*应用 1）卡介苗接种对象及免疫效果的测定 2）婴幼儿结核病诊断 3）测定细胞免疫功能状况 4）流行病学调查,四、微生物学检查法,*标本采集：痰、尿、粪、脑脊液及胸、腹水、血等*直接镜检：抗酸染色法或荧光抗体染色法*分离培养：罗氏培养基培养34周*实验动物：豚鼠*快速诊断：PCR、ELISA,五、防治原则,*发现和治
7、疗痰菌阳性者*新生儿接种卡介苗,预 防,直接面视下的督导化疗（Directly Observed Treatment Strategy，DOTS）,*标准化短程化疗方案：联合使用一组特效抗结核药物*六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导,治 疗,第二节 麻风分枝杆菌,（Mycobacteriu leprae）,形态染色：与结核分枝杆菌相似培养特性：典型胞内菌，不能人工培养动物模型：犰狳（qiuyu）抵 抗 力：较强，耐干燥、耐低温,一、生物学性状,二、致病性与免疫性,易感人群：人传播途径：直接接触、体液或由飞沫潜 伏 期：一般是6个月至5年所致疾病：麻风、麻风结节 瘤型麻风：多组织、脏器
8、，严重，传染强结核样型麻风：皮肤,三、微生物学检查法,标本：患者鼻黏膜或皮损处取材检查：抗酸性染色、显微镜检查抗酸染色结果：瘤型麻风患者一般阳性 结核样型麻风患者一般阴性,预防：无有效疫苗 BCG有一定效果 早发现、早隔离、早治疗治疗：砜类，如氨苯砜等 利福平 多种药物联合治疗,四、防治原则,复习思考题,1.结核分枝杆菌的生物学特性？2.结核分枝杆菌致病物质及感染特点？3.结核菌素试验原理、结果判定与用途？,中英文关键词,结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis 卡介苗 BCG有菌免疫 Infection immunity麻风分枝杆菌 Mycobacteriu leprae,课外阅读资料目录,1.马屿,朱莉贞,潘毓萱.结核病，人民卫生出版社，20062.唐神结,高文.临床结核病学.人民卫生出版社,2011,专著,文献,1 Stephen D Lawn,Alimuddin I Zumla.Tuberculosis.2011.Lancet 378:5772.2 Pawlowski A,Jansson M,Skld M,Rottenberg ME,Kllenius G.Tuberculosis and HIV Co-Infection.2012.PLoS Pathog 8(2):e1002464.,
