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1、第八章 肠杆菌科细菌,一、分类,第一节 概述,肠杆菌科的共同特性,1.形态染色相似 革兰阴性杆菌 2.培养特性相同 普通培养基上生长良好 3.生化反应活泼 发酵葡萄糖，氧化酶阴性，触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F试验为发酵型。4.抗原构造复杂5.抵抗力弱 6.易变异,O-F试验,氧化酶试验阳性：紫红色 阴性：无色,硝酸盐还原试验阳性：红色 阴性：淡黄色,肠杆菌科细菌抗原模式图,致病物质菌毛或菌毛样结构荚膜或微荚膜外膜蛋白内毒素外毒素,二、临床意义,所致疾病,肠道感染 腹泻、食物中毒、肠热症肠道外感染 鼠疫（烈性传染病）、泌尿道感染、肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血症,三、鉴定原则,1.科间鉴
2、别 2.将肠杆菌科分为三大类3.属、种、群、型的区分 4.肠杆菌科细菌综合鉴定流程,肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,苯丙氨酸脱氨酶试验阳性：绿色 阴性：黄色,葡萄糖酸盐试验阳性：黄绿色 阴性：蓝色,第二节 埃希菌属,一、分类二、临床意义,致病物质,侵袭力 菌毛、K抗原内毒素肠毒素 耐热肠毒素（ST）不耐热肠毒素（LT）,所致疾病,肠道外感染 泌尿道感染（最常见）胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎肠道感染 ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EaggEC,三、细菌特性,大肠埃希菌革兰染色,大肠埃希菌电镜图,大肠埃希菌菌落特征（血平板）,大肠埃希菌菌落特征（MAC）,大肠埃希菌KIA
3、（AA）MIU（）,大肠埃希菌IMViC试验（）右侧为对照（）,大肠埃希菌抗原结构,四、种属鉴定,大肠埃希菌检验程序,检验方法,1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 ETECEPECEIECEHECEaggEC,ST检测（乳鼠灌胃试验）,LT 检测（CHO细胞培养）,O157:H7菌落特征（MAC）,O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）,第三节 志贺菌属,一、分类志贺菌属分为4群：A群为痢疾志贺菌（S.dysenteriae）B群为福氏志贺菌（S.flexneri）C群为鲍氏志贺菌（S.boydii）D群为宋内志贺菌（S.sonnei）,致病物质侵袭力 菌毛内毒素外毒素 志贺毒素,
4、二、临床意义,所致疾病,急性细菌性痢疾慢性菌痢带菌者,三、细菌特性,形态特征,志贺菌革兰染色,志贺菌菌落特征(MAC),志贺菌KIA（K A）MIU（）,志贺菌IMViC试验（）,志贺菌检验程序,四、种属鉴定,在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分，床边接种或立即送检，不能及时接种者可用卡-布运送培养基送检，昏迷不能排便病人可用肛拭取样。,第四节 沙门菌属,一、分类,致病物质侵袭力 Vi-Ag 内毒素 肠毒素,二、临床意义,所致疾病,伤寒和副伤寒急性胃肠炎或食物中毒 菌血症（或败血症）,三、细菌特性,形态特征,伤寒沙门菌革兰染色,伤寒沙门菌菌落特征（MAC）,伤寒沙门菌菌落特征（SS）,
5、伤寒沙门菌菌落特征（血平板）,伤寒沙门菌KIA（K A）MIU（）,沙门菌IMViC试验（）,四、种属鉴定,沙门菌检验程序,检验方法,1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定4.血清学诊断,沙门菌血清学鉴定,肥达反应(Widal test),O凝集（1:201:1280，效价1:80）,H凝集（1:201:1280，效价1:320）,第五节 耶尔森菌属,一、分类鼠疫耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌其他耶尔森菌：假结核耶尔森菌等,（二）临床意义,鼠疫耶尔森菌致病物质侵袭力 FI抗原（封套抗原）V/W抗原（毒力抗原）内毒素鼠毒素,所致疾病,甲类烈性传染病鼠疫常见临床类型：腺鼠疫 败血型鼠疫肺鼠疫,致病物质
6、 侵袭力 肠毒素所致疾病 小肠炎、结肠炎、胆囊炎 腹膜炎、菌血症,小肠结肠炎耶尔森菌,三、细菌特性,鼠疫耶尔森菌形态特征,鼠疫耶尔森菌镜下形态（Wayson染色）,鼠疫耶尔森菌菌落特征（MAC）,小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色,小肠结肠炎耶尔森菌,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（MAC）,小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（CIN琼脂平板),一旦疑为鼠疫耶尔森菌，应立即向本地区疾病控制中心等部门报告，并将菌种送检验中心或专业实验室作进一步鉴定。诊断确立后除对患者进行隔离治疗外，对疫区及有关人员须采取有效的预防隔离措施，防止疫情扩散,四、种属鉴定,标本采集,1.临床标本 淋巴结穿刺液、血液或痰标本2.非临床标本
7、 尸检取病变组织，鼠标本应严格消毒体表，再进行采集,鼠疫耶尔森菌检验程序,小肠结肠炎耶尔森菌检验程序,KIA：AA-或KA-枸橼酸盐（-）脲酶（+）吲哚（-/+）鸟氨酸脱羧酶（+）动力、V-P反应结果与孵育温度有关（2225阳性，3537阴性）根据菌落特征，菌体形态染色特点、嗜冷性及典型生化结果即可初步诊断本菌。,第六节 枸橼酸杆菌属,分类弗劳地枸橼酸杆菌（C.freundii）异型枸橼酸杆菌（C.diversus）无丙二酸盐枸橼酸杆菌（C.amalonaticus）,弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征（MAC）,细菌特性,枸橼酸杆菌IMViC(),第七节 克雷伯菌属和柔特勒菌属,一、分类克雷伯菌属肺炎
8、克雷伯菌（K.pneumoniae）产酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca）肺炎克雷伯菌臭鼻亚种肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种,柔特勒菌属 解鸟氨酸柔特勒菌 植生柔特勒菌 土生柔特勒菌,克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群，是医院感染中最重要的条件致病菌。所致疾病：肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、败血症,二、临床意义,肺炎克雷伯菌革兰染色,三、细菌特性,肺炎克雷伯菌电镜图,肺炎克雷伯菌荚膜染色,肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）,肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）,肺炎克雷伯菌粘丝试验,肺炎克雷伯菌KIA（A A）、MIU（）,肺炎克雷伯菌IMViC试验（）,肺炎克雷伯菌易产生超广谱-内酰胺酶
9、（ESBL），近年来文献报道我国产酶率已达30%左右，产酶株对青霉素类、第1、2、3代头孢菌素及单环-内酰胺类抗生素均产生耐药，而仅对头霉素类、碳青霉烯类及酶抑制剂敏感。ESBL检测现已作为医院细菌室常规检测项目。,四、种属鉴定,肺炎克雷伯菌检验程序,检验方法,1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定,肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验,第八节 肠杆菌属,一、分类产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、杰高维肠杆菌、阪崎肠杆菌、中间型肠杆菌、泰洛肠杆菌等,肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环境菌群，医院感染的重要病原菌。在临床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌和产气肠杆菌，可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染以及败血症。,二、
10、临床意义,阴沟肠杆菌革兰染色,三、细菌特性,阴沟肠杆菌菌落特征(MAC),产气肠杆菌IMViC试验（）,四、种属鉴定IMViC试验大肠埃希菌为+-肠杆菌属细菌大多为-+动力和鸟氨酸脱羧酶试验肺炎克雷伯菌为阴性肠杆菌属多数为阳性,肠杆菌科细菌常产生AmpC酶，尤以阴沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性菌尤其是阴沟肠杆菌对13代头孢菌素、单环-内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的复合制剂耐药的重要原因。产AmpC酶细菌的治疗，首选4代头孢（头孢吡肟）和碳青霉烯类抗生素。近年来已有质粒介导的AmpC酶出现。,第九节 多源菌属,分类聚团多源菌等,聚团泛菌菌落特征（普通琼脂）,第十节 哈夫尼亚菌属,蜂房哈夫尼
11、亚菌菌落特征（MAC）,第十一节 沙雷菌属,一、分类 粘质沙雷菌（S.marcescens）液化沙雷菌 芳香沙雷菌 普氏沙雷菌 深红沙雷菌 无花果沙雷菌等,粘质沙雷菌菌落特征（普通琼脂平板）,二、临床意义粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都是已证实的条件致病菌，其中粘质沙雷菌是医院感染的重要条件致病菌之一，是引起肠道外感染的主要病原菌，可导致肺部感染、脑膜炎、心内膜炎、泌尿道感染、败血症、输血和外科手术后感染等。,第十二节 变形杆菌属,分类普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌,变形杆菌革兰染色,细菌特性,变形杆菌鞭毛染色,变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板）,变形杆菌菌落特征（MA
12、C）,变形杆菌KIA（K A+）MIU（+/-+）,变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验（）,根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为KA+，IMViC为-/+-，可鉴定为变形杆菌。,返回,第十三节 普罗威登斯菌属,雷氏普罗威登斯菌菌落特征（MAC）,摩根摩根菌菌落特征（MAC）,第十四节 摩根菌属,第十五节 邻单胞菌属,邻单胞菌属只有一个菌种类志贺邻单胞菌（P.shigelloides）导致肠胃炎，好发于夏季，通常为散发流行，临 床症状是短时间的水样泻或痢疾样腹泻，患者有进食生水或海产品史。肠道外感染:机体抵抗力下降人群引起菌血症、脑膜炎。偶尔也可在伤口分泌液、胆汁、关节液等标本中分离到,类志贺邻单胞菌,革兰阴性直杆菌，成双或短链状排列，25根端极鞭毛，有动力，生长温度845血琼脂平板中生长良好，灰色平滑、不透明、大小为1.5mm菌落。无溶血，氨苄西林抑制其生长。在MacConky平板上生长，呈乳糖不发酵或迟缓发酵 乳糖菌落,类志贺邻单胞菌,氧化酶、触酶试验、吲哚试验、硝酸盐还原阳性，发酵葡萄糖和其他碳水化合物产酸不产气，O/129敏感，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验均为阳性及肌醇阳性TCBS平板和6%NaCl胨水不生长，在不含盐胨水中生长本菌与肠杆菌科的宋内志贺菌和痢疾志贺菌有交叉血清学反应。志贺菌属氧化酶阴性，动力阴性可以鉴别。,
