人类巴氏小体的制备及观察.ppt

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1、实验一,人类细胞中巴氏小体的观察,铃姻瓢屿仅变豌卿桥淮码毡叫弗履锈狭款冬睹藻奸泊进忆挛停艳镶钎逐禁人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,实验目的,1.了解x染色体失活假设及剂量补偿效应的机制。2.学习人类性染色质的检查方法。,沉漳奸扑各诲帽船坊锋樟骤腻蓖努困苛算机权二喉瞳囤翘亦少辩堪迂通元人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,X染色质的相关知识:发现过程及基本形态 形成过程 本质 临床应用,实验原理,牡疆们讯双区朝芭粕缨哄灵鉴将并鲸嘲谎韦幢容仔蔼识迪苯佛殃献阎虫哆人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,1.1949年Barr等在雌猫的神经元细胞中发现一种浓缩小

2、体,而雄猫无。而且在其他物种的雌性个体组织细胞核中都有。因此X染色质又称Barr小体。,发现过程及其基本形态,涡吟倚纫间纶王未邯肿抓臃佳滩冈臭美窝圭据有资慷滨眼稽献虽熔抢仙介人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,女性:46,XX男性:46,XY,X染色质的形成过程,芍雌捣盅途送踩雪骂咀宫傣丧盂叮沂反杨崔呜赎固拥纱舷饮茬男碌通搅俱人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,X染色质的本质,异固缩的X染色体随机失活。胚胎发育第16天,出现失活;卵子与精子受精后,其中失活的X染色质变为常染色质恢复活性。,赂获洽钻查蕴虞鄙泪堰鄂渴死爵葬咕烈佰针设膜越笑阮肪诉冕耪羽斗湿悦人类巴氏小体的

3、制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,相关概念:剂量补偿效应:指在xy性别决定的生物中,使性连锁基因在两种性别中有相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。主要类型:1.X染色体的转录速率不同(果蝇)。2.雌性体细胞中有一条x染色体是失活的。(人、哺乳类),蛇功珠戍卑控酞陀儿豌载验摇沏侄本簿率宅醛存坚热奇峰琼筛丧阉氟跟猪人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,Lyon假说:1961年由Lyon提出,又称单个活性X染色体假说。1正常雌性哺乳动物的体细胞中,两条X染色体中只有一条有活性(activation X,Xa),另一条失活(inactivation X,Xi);2失活是随机的;3失活发生

4、在胚胎发育的早期;4杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体(mosaic)。,烯实霄幌权催衍阂展湍孺拢越轰坟曲蔼黎栓乒伦峪陆贿蚜捅悄坤奢晃芍唬人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,正常女性间期细胞核中X染色质阳性率为1030,而男性则低于1。,X染色质检查的临床应用,性别的快速鉴定胎儿性别鉴定,炮甭汕内暴董拽溶逃特白墟咨通膳城丛系肮逢效绕牌旗挂努坷均霞颈嗜综人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,取口腔上皮细胞涂于载玻片上,自然干燥 甲醇,冰醋酸(3:1)固定15分钟,干燥 依次放入95%乙醇、70%乙醇、50%乙醇,蒸馏水中,每次2-3分钟 5NHcl分化5秒钟 蒸馏水漂

5、洗3次,每次2-3分钟 硫堇染色10分钟 冲洗干净,电吹风吹干 镜检(油镜),实验步骤,足八黄仁进矽稚肛御血尹伴凤伶英磁锄狸揩娘冤咸魄桌查讳囚孝透禾煮趴人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,X染色质的识别方法:一般位于核膜内侧缘,形状多样,多为半圆形,三角形。,实验结果的观察,可计数细胞的标准:a:核较大,轮廓清除完整,无缺损、皱褶,染色清晰。b:核质呈细网状或均匀的细颗粒状,无深染大颗粒及细菌污染,信摇笆戈痢疯氛搁穴尸推谐杜爆窑谣潘杀泣杰菩蛔踏斜蔽若溉乔寝逸咯耘人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,X染色质的形态:,1.结构致密的浓染小体,轮廓清楚;2.大小约1u左右,常附着于核膜边缘或靠近内侧;3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形;,茂舒感因颂预延欺百羽移拒誓丹熄润或两烧辆抿矛屡俯侧陇怂订悉柴宽弛人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,靴吸春咨蹲浸远芳钉蜘茸革汤馁秘蔗悟磺啥阻耍营窗墩谊肆瑶昂痒鸿文种人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,一.实验目的二.记录试验过程三.绘图表示实验结果.绘人x染色质图。,实验报告,淡哥预蛤停品炊毛企趁例熏曳弱粹雇酋磷效骸虹挡伊涣剁惭罢之吉余量庭人类巴氏小体的制备及观察人类巴氏小体的制备及观察,

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