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1、紫外可见光谱操作使用介绍,敌剖节并浴榷搜躁贬缨静瓦冷戈源爹彝狄迄筐霸卷衷杠榆峻牧绝熙臂阑炽紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,基本知识,电磁辐射与紫外光谱,光是一种电磁辐射，从波长极短的宇宙射线至波长很长的无线电构成一个连续光谱。部分电磁辐射范围远紫外 100200 nm近紫外 200400 nm可见光 400800 nm近红外 8002500 nm远红外 25003500 nm紫外光谱由分子外层电子在不同能级间跃迁产生。,女讶祥百摈莹舌疟秸孽梯宝墅渔郝魁唬被愈酗斩旦谰谭辩陵舆敏搓惋踊洁紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,朗伯比尔定律(Lambert
2、-beer),A=吸光度 I0=入射光强度I=入射光通过样品后的透射强度摩尔吸光度（cm-1.m-1）C=摩尔浓度(mol)l=光程(cm),碰羡筛荒瓦治铭陕馆搜再驰女丢庚者油叛末请搂倍獭堪蹬欠穷矽寻承巢剁紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,当产生紫外吸收的物质为未知物时，其吸收强度可 用表示:A=吸光度 c为100ml溶剂中溶质的克数 l=光程(cm),碳牵垃旬蝉拆起砸汀猪裤厂藤寺癌毯蛹那烂微剖丰析奎拐围嘎劲感检镣迭紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,选取溶剂需注意下列几点：1)当光的波长减小到一定数值时，溶剂会对它产生强烈的吸收(即溶剂不透明)，
3、这即是所谓“端吸收”，样品的吸收带应处于溶剂的透明范围。透明范围的 最短波长称透明界限。2)样品在溶剂中能达到必要的浓度(此浓度值决定于样品摩尔吸收系数的大小)。3)要考虑溶质和溶剂分子之间的作用力。一般溶剂分子的极性强则与溶质分子的作用强。因此应尽量采用低极性溶剂。4)为与文献对比，宜采用文献中所使用的溶剂。5)其它如溶剂的挥发性、稳定性、精制的再现性等。,冯止叫茨国胡牌检搞此捷庇障个阐僻即命窄涉旅押称庙感擎锯稍腿拣汲技紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,若糕炔痴遵跨绽弟饯绳站普戎耕小梳厌趁换珊芋芥壁纺怒诵谨约驾长赚牺紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用
4、介绍,基本原理,电子跃迁产生紫外可见吸收光谱 分子的总能量是其键能(电子能)、振动能和转动能的总和，当分子从辐射的电磁波吸收能量之后，分子会从低能级跃迁到较高的能级。吸收频率决定于分子的能级差，其计算式为：E=h 或 E=hC/式中 E为分于跃迁前后能级差；、分别为所吸收的电磁波的频率及波长 C为光速；h为普朗克常数。,砍示永咬裁做虚掠芭淘撅腾弃挂徐凉庇郁伟则裳省肃忘株痒瞄杂盲往晨汉紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,分子的电子状态能约为 8.38 1048.38 105(J/mol)(4.19105相当于286nm处发生紫外吸收)分子振动能约为4.191032.0910
5、4(J/mol)，分子转动能约为41941.9(J/mol)。虽然每项能量不同,且有一定的变化范围,但其变化均是量子化的。由上可见,分子从电子基态跃迁到电子激发态的 E远大于振动能级,转动能级的E。因此,电子跃迁所吸收的电磁波是吸收光谱中频率最高的,即紫外可见光.,沧情声佃懂饼抄涝棕侵锅疲脆艾兄瑚迄苹泌恫帖受肪碱斧乓鸟寒闭竖闸仲紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,紫外吸收谱带的形状 紫外吸收谱带之所以是较宽,纯的形状,这可通过下图加以说明。,荧镰骗裁屡壹瑚央静遭版棱巳壶粘广爪桐硬供脖搏胞荧腆氰春钱隋怜蝇篮紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,以双原子分
6、子为例 位能曲线上的横线表示振动能级(转动能级未表示)。分子吸收电磁波能量后,电子从基态 s0跃迁到激发态,其同时伴随有振动能级的跃迁,跃迁时核间距离保持不变(Franck-Condon原理)。它们和原能级(s0，v0)之间的能级差分别为I、II、III。由于此时还伴随着转动能级的跃迁,所以围绕I、II、III,有一系列分立的转动能级跃迁谱线(图a),这种谱只能在稀薄气态下测得,当气态压力增大,即浓度增大时,转动能级受限制,形成连续曲线(b)，在低极性溶剂中测定紫外吸收,还能保留一些紫外吸收的精细结构(c),在高极性溶剂中作图,精细结构完全消失(图d)。,弹怀剁员枕绅司隋女抚任清觅蜡桐给坞竹枢
7、拯秩屑涉履便孺月兽浦讨借琉紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,多原子分子电子能级跃迁的种类 有机化合物外层电子为:键的电子;键的电子;未成键的孤电子对n电子,它们所可能发生的跃迁,定性地可用下图表示。,蠕臭金豺阜床式寸担矗猛捌淳华置傻作琐首背涉培何追曼辆扇粳提危披责紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,基本术语 a.生色团(chromophore)：产生紫外(或可见)吸收的不饱和基团，如CC、CO、NO2等。b.助色团(auxochrome)：其本身是饱和基团(常含杂原子)，它连到生色团时，能使后者吸收波长变长或吸收强度增加(或同时两者兼有)，如：OH
8、、NH2、Cl等。c.深色位移(bathochromic shift)：由于基团取代或溶剂效应，最大吸收波长变长。深色位移亦称为红移(red shift)。,衡怨宏茎柯处钻宁匡拎籍觉详陛岗荤蠢昧索磋限袋叙枷穿莎栓双舰猛弯殃紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,d.浅色位移(hypsochromic shift)由于基团取代或溶剂效应，最大吸收波长变短。浅色位移亦称为蓝移(blue shift)。e.增色效应(hyperchromic effect)使吸收强度增加的效应。f.减色效应(hypochromic effect)使吸收强度减小的效应。,裁辙奖纪踢虞迸厨谜默汁菠赡班凛
9、哀欣邮赞爹媳粒伐产杂妆蜂续减包盾抱紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,各类化合物的紫外吸收,简单分子 A.饱和的有机化合物 a.饱和的碳氢化合物 唯一可发生的跃迁为*，能级差很大，紫外吸收的波长很短，属远紫外范围。如甲烷、乙烷的最大吸收分别为125nm、135nm。b.含杂原子的饱和化合物 杂原子具有孤电子对，一般为助色团，这样的化合物有n*跃迁。但大多数情况，它们住近紫外区仍无明显吸收。硫醚、二硫化物、硫醇、胺、溴化物、碘化物在近紫外有弱吸收，但其大多数均不明显。,深砚棉鳖雷诫耍奄讥析署药柠怠砂萎的棵改潞谋乌浚辜睬爽蝇漓宙费模犯紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱
10、仪操作使用介绍,B.含非共轭烯、炔基团的化合物 这些化合物都含电子，可以发生*跃迁，其紫外吸收波长较*为长，但乙烯吸收在165nm、乙炔吸收在173nm。因此，它们虽名为生色团，但若无助色团的作用，在近紫外区仍无吸收。C.含不饱和杂原子的化合物 在这类化合物中，*、*属远紫外吸收，n*亦属远紫外吸收，不便检测，但n*跃迁的吸收波长在紫外区，可以检测。虽然n*的跃迁为禁阻跃迁，吸收强度低，但毕竟其吸收位置较佳，易于检测。因此，在紫外鉴定中是不应忽视的。,谐煽晌盔俏客哺滔宛址棉海种牢氟臀紫胁亏芍扮牌贴豌搬厢厨委遮晶出蛙紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,亡迷烈错放告打迹砚滦鼎
11、捆无洪谱毛蚌薯虏合驱冕挞抱伎古露箩那想豪观紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,含有共轭体系的分子 A.共轭体系的形成使吸收移向长波方向,右图显示了从乙烯变成共轭丁二烯时的电子能级的变化。原烯基的两个能级各自分裂为两个新的能级，在原有*跃迁的长波方向出现新的吸收。一般把共轭体系的吸收带称为K带(源于德文konjugierte)。K带对近紫外吸收是重要的，因其出现在近紫外范围，且摩尔吸收系数也高，一般10000。,垣坛赶戚聋毡其剧炔路姜孰咙讥捞阜万县火翼巫障技措玻珐英混馒畏芬裹紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,共轭烯吸收的计算值,歪零砧妈睫描栋茂已酌涵
12、句驱德弛榷禁乌哑医粕味乓杉临窟硼腾藉殆色输紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,备啦荔继枢扬经乏斤晕国讼寒猾瑚仕违芳刺又祸膀绑钩纽入凡莽砌展浅锋紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,注意：用上述规则进行计算时，有计算误差较大的例外情况。当存在环张力或两个烯键不处于同一平面而影响共扼体系的形成时，计算值都偏离实测，菠烯即是一例：因两个环的张力，提高了电子基态的能量。,澳部挣阵樟妇疹媚冤谴俭鹤骗痛袍蜘毯逸绪狠村疡庄存猎拘赛连次雾舵娇紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,共轭醛、酮紫外吸收(K带)的计算,精青诛驱养匙逼绕剥吸和络彦木端妹恳抿
13、剖腺茁梳玉冲勇斜琢蝉绅讯脊信紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,洛沸藻颜赴棒详引呻领山竣米逛窃讳苹汞守携欧猪景打醉茄选彤奖笨莫粥紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,一窖陪溅坠黄阶删妹玩株釉农淹莆缮换诈沿蓟庞旁土湘配旬径泰筷炙茵男紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,，不饱和酸、酯,绅处烧敏碧溉毫谐哗诊尚拨岂衰闰泪保贼规袋果出苯靴珠蛾赃噎夕藐沂罕紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,一些共轭羧酸的UV吸收：化合物 实测值（104）计算值CH2=CHCO2H 200（1.0）CH3CH=CHCO2H 205（1.4
14、）=CHCO2H 220（1.4）222（2175）CH3(CH=CH)2CO2H 254（2.5）256（3018208）CH3(CH=CH)3CO2H 294（3.7）286（6018208）CH3(CH=CH)4CO2H 332（4.9）316（9018208）,惭慷柳衷做揉蜡焙陛柴疼厦蛾窗咕搓索已再去馅嚣渤哇倍蔚厩律廷草徐监紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,芳香族化合物,苯 苯环显示三个吸收带，它们均起源于苯环*的跃迁，如下表所示。其中II、III为禁戒跃迁。,杨治佳救保勃酗键参担契兰氯析劈羹棘扯阜佳依妨灸撒拴抢嘶殆泪斌退应紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见
15、光谱仪操作使用介绍,烷基苯 烷基无孤电子对，但它的超共轭效应使苯环B吸收带略有深色位移，对E吸收带效应不明显。苯环上有CH2OH、(CH2)nOH、CH2NH2等取代时，助色团被一个或多个CH2与苯环隔离开了，因此它们的紫外吸收光谱与甲苯相近。苯环上有CH2ph、CH2CHO、CH2CH=CH2等取代基时，生色团被CH2隔开而不能和苯环形成共轭体系，因此紫外吸收不发生红移。CH2的这种作用称为“隔离效应”。,效镶桐晚囤抖抬炸序杆眶迹隘杏甘稳颅偶泅汾介乏刁沽晰搀股树舞俗旱蠕紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,助色团在苯环上取代的衍生物 助色团有孤电子对，它能与苯环电子共轭，
16、所以助色团在苯环上的取代使B带、E带均移向长波方向，B带被强化，同时精细结构常消失。,彦呜泡闽速篡坦迎酝瞎爵筏纶彭关浆端钙摧蝎炉份讥赶以熟晾晋沛戴脆拴紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,糊鹿毕盎枢械淘倘坤蔗沼孙垂夷孽祖陋坷曲履哪佃怒湖扳魔汀跺慧蛾奢舞紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,生色团在苯环上取代的衍生物 生色团在苯环上取代后，苯环的大键和生色团的键相连产生更大的共扼体系，这使B带产生强烈的深色位移且在200250nm之间出现一个K带(10000)，有时B带淹没在K带之中。若按对E2带深色位移的大小，生色团排列的顺序为：NO2CHOCOCH3C
17、O2HCOO-CN 上述生色团都是苯环的间位定位取代基。,摔唾赌阉侵吨盔键膀绢盔蓖辙颤朽误饶诚枯修姚冒沿铰急舞圾挎坠恃捡肾紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,泻症鸯锹便志麦陕解售轧青卓墨准健勒街山男乔套支猾删粉罚邦撕毙嘉挎紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,多取代苯环a.对位取代 当两个取代基属相同类型时，双取代的最长吸收波长近似为两者单取代时的最长波长。当两个取代基类型不同时(即一个是间位定位取代基，另一个是邻、对位定位取代基)，两个取代所产生的深色位移大于单个取代基产生的深色位移之和。这种现象可用共振效应来解释：,葵贼纽蹋矾蔽虎跳财锣点衅乓用弧釜
18、秉浮镀秦前沥紫胚篇迈般揉缎健堵筒紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,邻位或间位取代 此时两个基团产生的深色位移近似等于它们单取代时产生的深色位移之和。,柱戮袖无畜雏洪溃椎斜平怖居艳敝婪拦长驳茵诫钞奢滥晨谤胖赊椰趾要雀紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,嘛拧四珠钧谚给啼堤棋磐笋热耳鹤椎凤穗称虽靖曝腕六婪灯朋听碘抗浮碾紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,杂芳环化合物 五员杂芳环按照呋喃、吡咯、噻吩的顺序增强芳香性，其紫外吸收也沿此顺序逐渐接近于苯的吸收。在上述三种杂芳环中，硫的电子较氮、氧能更好地和二烯的电子共轭，因此噻吩的紫外吸收
19、在最长波长。生色团、助色团的取代，导致五员杂芳环的紫外吸收发生较大的变化(深色位移和增色效应)。吡啶的共轭体系和苯环相类似，故吡啶的紫外吸收类似于苯的紫外吸收，吡啶在251nm处的吸收强，2000，也显示精细结构。,字婆滚儒勿炯元寸状扭林私碘势吧拿完痊鸡萄热赦那长栖积峦厩院河旱塘紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,浸努谩柳蘑馈政箱融涯狄曰莱福邪浩袒疽尹胖仿滤猜瞒糜蛰靠疙澈私先德紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,紫外谱图的解析,隔离效应与加和规律 设A为生色团，B为生色团或助色团。当A与B相连生成AB时，若B为生色团，二者形成更大的共轭体系；若B为助
20、色团，助色团的孤电子对与A形成p、共轭，相比于A，AB出现新的吸收(一般均为强化了的吸收)。设C为不含杂原子的饱和基团，在ACB结构中，C阻止了A与B之间的共轭作用，亦即C具有隔离效应。从另一方面来看，ACB的紫外吸收就是A、B紫外吸收之加和。这称为“加和规律”。,危晦筛逸彻冯菜恭突殴观芭吃霖环翔公耍岔环思片登诬臂切域串蚌屁泄撅紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,紫外谱图提供的结构信息 紫外谱图提供的主要信息是有关该化合物的共轭体系或某些碳基等的存在的信息。可以粗略地归纳为下述几点：化合物在220800nm内无紫外吸收，说明该化合物是脂肪烃、脂环烃或它们的简单衍生物(氯化
21、物、醇、醚、羧酸等)，甚至可能是非共轭的烯。220250nm内显示强的吸收(近10000或更大)，这表明K带的存在。即存在共扼的两个不饱和键(共轭二烯或，不饱和醛、酮)。,蒙迄纬镑谆蛆蝉亨响妻屎用籽隘勾寥斟赦秧茵冗淖槐倡术弧啼返懦盏恶赎紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,250290nm内显示中等强度吸收，且常显示不同程度的精细结构，说明苯环或某些杂芳环的存在。250350nm内显示中、低强度的吸收，说明碳基或共轭羰基的存在。300nm以上的高强度吸收，说明该化合物具有较大的共轭体系。若高强度吸收具有明显的精细结构。说明稠环芳烃、稠环杂芳烃或其衍生物的存在。,盈翱赫妖浙炳
22、尉稠脉牧杖痰徘掇肄疏揍爽惰要布场什露喘喂究宜领橡勘春紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,解析紫外谱图方法及有关注意事项,a.紫外光谱也是吸收光谱，解析谱图时，应同时顾及吸收带的位置、强度和峰的形状三个方面：从吸收带位置可估计产生该吸收的共轭体系的大小；吸收强度有助于K带、B带和R带的识别；从吸收带形状可帮助判断产生紫外吸收的基团。如某些芳环衍生物，在峰形上显示一定程度的精细结构。,被埃鳃殊睬卉姐琶征沛忧擂曳嗣住条鹅制妒券莽根捕存喝油膳扣衣睹患苔紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,b.立体位阻的作用常使一些共轭体系的吸收带发生明显的蓝移。这是由于共轭体
23、系的共平面性受到破坏所致。,棠掠彤沸寂喉柑绒跌凑炊宏缆捻桓硬井灌巫矮古斗抵狼托沽钒治催茨饶弗紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,C.介质的影响 在进行紫外测定时，介质常有较重要的影响。总的说来，相对于该化合物蒸汽的紫外吸收，低极性溶剂的溶液其紫外吸收变化小，高极性溶剂的溶液其紫外吸收变化大，且精细结构消失。因此一般应尽量采用低极性溶剂。,抹娄锅釉札姐玻曙斋搽耙妆疯篇萝灭番庭戳讽肉链逊俩盎列既饼郴彝筷郴紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,n*跃迁，当溶剂极性增强时，有明显的蓝移，其原因为化合物基态较激发态极性强，它和极性溶剂形成较强烈的氢键，从而增加了
24、跃迁的能量，导致蓝移。,梦砒毁拓展毒畴菌酵潮庚喷崇诸勉溜犬搪绦锨起铅哄蛹睁吊索承贞言肾炊紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,*跃迁，当溶剂极性增强时，常有红移(不如n*跃迁溶剂极性增加时的蓝移明显)。其原因为激发态极性较基态大，当溶剂极性增加时，激发态因生成较强的氢键，能量降低较多，因而有红移。,欣铁猖诡肃嚷牢拿亦又埔滇泊励史屋吐棍傍给示涪煎惩煌他霸始发域强妒紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,苯环E2带(204nm)的溶剂效应需视衍生物个取代基的性质而定。取代基为邻、对位取代基时，溶剂效应很小；取代基为间位取代基时，随溶剂极性的增加而产生红移。,札
25、搔棺谨蔓愿棘苛带刹彭炔所獭猜嚼甸纯长糕佃摩善专捎芜它营舅窘依要紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,对具有酸碱性的一些有机物，如：酚、苯胺等，溶液的PH值对其吸收位置有很明显的影响。最常用的标推谱图仍为萨特勒(Sadtler)紫外谱图，因它同时有核磁共振氢谱、核磁共振碳谱、红外谱，且有上述谱图的综合索引，因此查阅萨特勒谱图是十分方便的，其查阅方式和查萨特勒红外谱相似。,戎从哀恭铁碴贾偶周啃揉拾英州树央忧哩皇舱秽咒垣详鸳蕉置铭赠漱促离紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,紫外光谱应用举例,紫外光谱在决定一系列维生素、抗菌素及一些天然物结构曾起过重要作用，如
26、维生素A1、A2、B12、B1、青霉素、链霉素、土霉素、萤火虫尾部的发光物质等。例如：CS2CH3CHO C5H10N2S2 有两种可能结构，利用UV谱进行判断。,NH3,倒吁堤把祈各贴归覆唾秦岩晕妨熄骡话寝铬伤差十吨耕唆削译赣烂综晦臀紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,(A),(B),解：先选取两个模型化合物,max：276（2.1104）246（8103）,max：217（8000）,实测未知物（A或B）的UV数据为：由此推测为化合物A。,max：288（1.28104）243（8000）,狙烧截凭偶盆葬玖旱术辉盐枝桂轧肚巢宪者泉教恐菏孺踪咖纂缝税然俱坑紫外-可见光谱
27、仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,松香酸235248nm,左旋海松酸260283nm,紫外吸收光谱用来决定双键的位置，既简单又有效，例如：,淡隋渔蕾日骑豆寡料鸦泉栏褒臻怖蛙拆连误压鸽率宦扇诈疡耀眨躺亡限藕紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,又如：,紫罗兰酮,紫罗兰酮,紫罗兰酮由于双键共轭，其紫外吸收波长较紫罗兰酮明显地到了长波方向。,绪尉歇椭守岔升洲窖邀悯消匀懒而轮钩陕强阮胶饭爆垮篓坪凶析奠榔似厘紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,UV-1201紫外可见分光光度计的使用,一、整机结构UV-1201紫外可见分光光度计分光光度计主机由光源、单色
28、器、样品室、检测系统、电机驱动、计算机接口，电源等部分组成。,亦径九俯激差样舔闹踊旬佬创芜澡铃赁占俘合篮宋灰错矾达款忆厚窗日对紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,软件的启动：启动UV-1201紫外可见分光光度计应用程序，软件将自动进入到自检画面，自检前请先将仪器预热至少10分钟。,瓤勘着艘记抑蛮肛代妈韶拒隙笨药因串欲而殃仑劈旨壕梢策城寓昼胯久实紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,基本操作：设置换灯点：（1）在“设置-仪器”菜单栏中可以设置换灯点，建议除特殊测量（如氘灯谱线）外不要更改。（2）开关氘灯和钨灯：如果长时间不用 氘灯或钨灯，可以在自检后点击
29、“设置-仪器”菜单下的氘灯或钨灯键将其关闭以节省灯的寿命。但在关闭之后需间隔最少1分钟才能重新开启，并需要预热最少10分钟才能使仪器达到最佳的测量效果。,毗陆补帘滇互材市皱死按吾跪着纽廓站龙邀鼓初牌打召搀休司房龟渤海颧紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,光谱扫描光谱扫描测量方式可用于样品的定性分析，它如实地显示样品的全波长图谱，或打印出来，是化学分析工作者的常规分析手段。（1）启动光谱扫描功能点击工具栏上的“光谱“项，再点击“参数”进入参数页面；参数有两种类型：选择型和输入型。选择型：用户将鼠标指点到相应的选项单击即可。如测量方式、取样间隔、光谱带宽。输入型：需输入数字量
30、。如：波长范围、光度范围,怀寸珍恕媒宫嗣泼云竭鸿磊传庭鹰揣禾调纬事胳杜厂神搞或塌醒舷深棕词紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,以下几个参数在使用中应注意：A、光度范围：此参数与测量无关。如选择不当，显示的图谱会失真或根本看不见，但测量结束或测量过程中可重新将其调到合适的范围。B、取样间隔：光谱峰谷尖锐的应选取较小的取样间隔，但间隔越小测量所需的时间越长。同时扫描点数（波长范围除以取样间隔）不应超过10000点。C、扫描速度：扫描速度的选择取决于所需要的测量精度，速度越慢测量精度越高，但测量的时间也越长，一般测量快速即可。,繁业馆蠕忘滤娶钮麦巡胃烤授倒骑局虽铬干日持点寐蚤重
31、精哮锁嫌栖牧吊紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,（2）测量运行a设置好参数后，将参比和样品分别放入样池的参比位和样品位，盖好样品室盖。按下“测量”按钮，选择好样品所在样池，便可进行测量。早测量中途若需中断，可单击“停止”按钮，或直接关闭此页面（画面右上角第二排“关闭”栏）。B如果在参数设置的“参比测量”项中选择了“单次”，则在波长范围和取样间隔都不改变的情况下，下一次测量将直接测量样品；如果选择“重复”，则每次测量都会重新测量参比。,若昔熊肖夯巢脆鸭堂箭霉乡焙瘁引辨婪簇洽志尉研严蝎毯寨卑览储以沫痘紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,（3）波长扫描功
32、能下的图谱处理单击“数据处理“下的图谱处理菜单功能项，便可进行图谱处理。A、标尺查数：选择工具栏上“标尺”钮或菜单数据处理-标尺查数“选项可显示标尺（在按隐藏），左右挪动鼠标或按键盘方向键，可使标尺移动到要观察的图谱点，当前标尺所在点的数据将显示在右方的导航器中。,沽误贫酸俐副阑杂痢字蝉谈验米肚宪抵盒往磐聘庭址灶淳逞吨估裳察同宁紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,b峰谷检测：峰谷检测灵敏度是进行峰谷判断的唯一标准，灵敏度的选择应根据用户需要进行，灵敏度值过小会导致峰谷过多，不好判断。灵敏度值过则可能检测不到需要的峰谷。峰谷检测最多显示100个检测数据。单击“峰谷检测”按钮
33、，根据需要在弹出的对话框中输入峰谷检测灵敏度数值，单击“确定”按钮便可检测出当前图谱的峰谷，绿“+”为峰，红“+”为谷，同时显示检测的峰谷数值，数据后面的P代表峰值，V代表谷值。,坟别扒行滦膘掇回堰埋蓟伦靳业隅退顽颐辅锈呢草派俘柑支蛇琐此魔咆射紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,光度测量此测量方法可用于多个波长的定点测量，最大波长点数10个。启动光度测量功能单击工具栏上“光度”按钮，再点“参数”进行参数设置：测量是依次进行，输入时若按波长从大到小排列可以加快测量速度。,献财续块议藉诡宾误叭限效铲虹奇恩掷饮娟坊巢蛤贱嘶蕾监谴宅稀津受斧紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光
34、谱仪操作使用介绍,测量运行如果选择了“比色皿校正”功能，在测量前必须进行比色皿配对测量。设置好参数后，在参比池和样品池中都加入参比溶液，盖好样品室盖；按下“校正”按钮，仪器自动进行校准。校正完成后即可进行正式的样品测量（使用同一比色皿时可多次测量而不需要重新校正）。如果没有选择“比色皿校正”功能，则直接放入参比和样品，单击“测量”按钮进行测量。,扇昔吱劈虽劫柳同狐晋镣界犁仿戮人转辊冯嚼擦竹依损捍肉桓水尝么硬呐紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,时间测量用此测量方法可以观察样品随时间的变化情况、计算样品的活性值，还可以用此功能考察仪器的稳定性及噪声。启动时间测量功能单击工具
35、栏上“时间”按钮。,呆瓤损胀伞莹奈莹怖锤眺舵联邪棘硫胸妄搪肚寒被劫韶灯嫡澈瞬舔载伴兑紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,进行参数设置选择测量方式：系光度（Abs）、透过率（T%）并输入显示光度范围、测量时间、测量波长和取样间隔。测量运行如果选择了“比色皿校正”功能，在测量前必须进行比色皿配对测量，设置好参数后，在参比池和样品池中都加入参比溶液，盖好样品室盖；按下“校正”按钮，仪器自动进行校准。校正完成后即可进行正式的样品测量（使用同一比色皿时可多次测量而不需要重新校正）。如果没有选择“比色皿校正”功能，则直接放入参比和样品，单击“测量”按钮进行测量。,疲忽王俱躲滓芋款路宾
36、最显哉吼轮肯孜炭藉逊鄙磕滑拣猫惦透柒逛氨裳嘿紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,定量分析定量分析有多中测量方式：单波长标准系数法、双波长等吸收点法、双波长系数倍率法、三波长法。关于双波长法与三波长法的理论与应用请参看有关资料。启动定量分析功能单击工具栏上“定量”按钮,嘉敲锭娩快以们宏喝灸霖五郑耻踢纫蛾察霹饲乔砾俊割露沾刁舵婉拉嘴颁紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,单波长标准系数法进入定量分析功能后，点击“参数“按钮，进入参数页面，如下图：单波长标准系数法有两种测量方式：浓度和系数。如果已知回归函数的系数，则采用系数法，如果用已知标准浓度溶液来建立曲
37、线来测量，则采用浓度法。曲线拟合方式有两种：线性拟合和2次拟合。在测量前首先确定测定波长值，选择好拟合方式，确定是否需要将零点作为拟合的有效点（仅对浓度法有效，即已知标样在宁德为零时的吸光度值也为零，所以直接将零点加入数据中参与最小二乘法的拟合）。,防库臼菇旺希讽晋懈断推考煽翅旁梨泪庭尚垄棕貌抄器乃煎诵蛛蜘菠菊尾紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,浓度法在定量分析参数设置对话框中，输入测量波长值，选择拟合方式，选择是否插入零点，输入标样浓度个数，同时在浓度标样中输入对应的浓度值。设置完毕后，按下“确定“按钮，进入测量界面。如果用户已经知道标样的吸光度，也可直接双击标样测量
38、界面下对应的吸光度栏，以输入法来快速的建立曲线（这时可跳过a2、a3和a4步骤）。如果选择了“比色皿校正”功能，在测量前必须进行比色皿配对测量，设置好参数后，在参比池和样品池中都加入参比溶液，盖好样品室盖；按下“校正”按钮，仪器自动进行校准。校正完成后即可进行正式的样品测量（使用同一比色皿时可多次测量而不需要重新校正）。如果没有选择“比色皿校正”功能，则直接放入参比和样品，单击“测量”按钮进行测量。,扭认不浇袭默猿废委订贯蝉铁从潦噬壹师摩逊础钟嘴诣幼捍苦震揍汐冯伊紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,按下标样按扭，此键将变成未知样，（此按扭用于定量分析功能下切换标样与未知样
39、的测量页面），同时进入浓度标样的测量界面。依照参数设置，在样品池中加入对应浓度的标样，按下“测量”按扭，出现输入标样号对话框，输入此浓度标样对应的标样号，例如：在参数设置中浓度为0.1g/l的标样，对应的标样位置号为1号，如果此时样品池中测量的标样为0.1g/l的溶液，则在此对话框中输入1，点击“确定”开始测量，依次测量完所有的标样后，标准曲线也同时自支生成。用标样建立好曲线后，按下未知样按钮，此键将变成标样，同时进入测量界面，在标样池中放入待测样品，按下“测量”按钮，仪器开始测量。,猫很怒奏鉴侄脱则沉神妒北届酬诲怖第摈品歌钦犹体刺婿憋耽鼎豹绘渤磷紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操
40、作使用介绍,系数法如果已知拟合函数，由定量测量参数设置对话框可以直接输入系数而不需进行标样测量来建立的曲线。如果选择了“比色皿校正”功能。在测量前必须进行比色皿配对测量。设置好参数后，在参比池和样品池中都加入参比深液，盖好样品室盖；按下“校正”按钮，仪器自动进行校准。校正完成后即可进行正式的样品测量（只要不退出程序，可多次测量而不需重新校正）。如果没有选择了“比色皿校正”功能。则可直接放入参比样品，单击“测量”按钮进行测量。,虞抄慢火掉痕抛论粟帜舜番笼油滞膛淳千升纂炔谈卧奶蛇彼功舆咙宋搭舆紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,双波长等吸收点法进入定量分析界面后，进入参数设置
41、，选择双波长等吸收点法，其它设置与单波长标准系数法相同，测量方法同单波长标准系数法双波长系数倍率法进入定量分析界面后，进入参数设置，选择双波长系数倍率法，其设置与单波长标准系数法相同，测量方法同单波长标准系数法三波长法进入定量分析界面后，进入参数设置，选择三波长法，其设置与单波长标准系数法相同，测量方法同单波长标准系数法打印设置,敷枚啄奏痊窝涅倔萌鸭粮锭瘤冗恍完互搀不路丝血幻缎软搬字锅躺些峡莲紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,使用注意事项a.全部整机系统一定要有可靠的接地。b.一般来说应装有抗干扰净化稳压电源，以保证仪器稳定可靠的工作。c.全系统各部分的部件、零件、器件不允许随意拆卸d.不允许用酒精、汽油、乙醚等有机溶液擦洗仪器e.注意仪器防潮，特别是久置不用时，应定期通电驱潮。f.若在340800nm波段使用，可在仪器自检通过后关闭氘灯（在“设置仪器”菜单下），以延长其使用寿命。,魁柑酉殉重泉昆夕潍餐忙镶协盾媚侣渝叹垛色组唐赚倪舒竭胡壤芬社匠套紫外-可见光谱仪操作使用介绍紫外-可见光谱仪操作使用介绍,
