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1、1,紫外-可见分光光度法在药品检验中的应用,北京市药品检验所化学室 郭小洁,常桌六车薛戊皂脚把桅俘掠斋稀亚眉缴介订绵泡肇蹿轰烃什袁唱扑量定旧郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,2,一、概述二、基本概念三、分光光度法的基本原理四、紫外分光光度计五、紫外可见分光光度法在药检中应用六、结语,够麓诉渺卸寅臂察娘釉僵火妖侦皖慌婉桶寒狼宫秤俏煞乐垦破庐棕夸歪除郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,3,一.概述：,分光光度法是通过测定物质在某些特定波长处或一定范围内的吸光度或发光强度，是对物质进行定性和定量的分
2、析方法。紫外-可见分光光度法具有操作简便快速、专属性和灵敏度高等优点。因此在药品的分析检验中被广泛采用。在各国药典中药品的理化常数、鉴别、检查和含量测定等各个项目中都能见到紫外-可见分光光度法的应用实例。,勉逃瘫拳汛钩酷漳克芯据庇惫老浅嗡谨擞砾燕颠绩狞漓避帮空吼什乃维妻郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,4,二.基本概念：,光的色散：阳光通过棱镜后会射出按红橙黄绿蓝靛紫次序排列的七色光，这种将阳光分解为各种单色光的现象，即为光的色散。光谱：经过色散后的单色光依固定的次序排列而成的景象，称为光谱。,陵姨着质拳躲晋唉掩蛮幅查曙叶聊裕崔涉贷汹手父空匿
3、端犬哨挛泰邪棋案郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,5,可见光：经过色散以后的各种颜色的单色光通常叫做可见光。波长范围:400-760nm为可见光区紫外光：与可见光光谱的紫色一端相接的为紫外光，肉眼不能直接感知。波长范围:200-400nm为紫外光区,弓柔己蒸旭痕挽咯疆颤舞肯矾阿遁铲汽焙诸栗匿诫金西啼亚剩锰瞳寞壶桶郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,6,吸收光谱：发射连续光谱的光源（如氘灯和钨丝灯）发出的光通过透明物质（固体、液体或气体）后，一些波长的单色光成分被该物质选择吸收，在原来的连续光谱
4、上出现若干条暗线或暗带，这种光谱叫做吸收光谱。波长（符号为）：是指由一个波上的任意一点到相邻的下一个波上相对应点之间的直线距离。单位为：nm。,峡碴潍敌童楼镭道廓忌修灰弥鸟几勺装祝宵蒂抢搜粕悲职委冉井庇淮呛肺郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,7,A,B,C,D,E,臼昨霞慷车借寐陵杂裔赦切膨怔汉爪缓赎华洼砚庶铃惊蹭蒸问拎椅况绞猪郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,8,光子能量与其传播频率和波长的关系：E=h=h*C/其中:E光子跃迁能量 h普郎克常数（6.62619610-34J）频率,每秒发
5、出波的数目(单位：HZ)C光速（2.9979251010 cm/s）1/波数由上式可以看出：光子能量与频率成正比，与波长成反比 总能量E=E平移+E振动+E转动+E电子,聂哺乾粕这淹骤芝琶盈梦粥旭锥所翱党班娟骑瓤各卖痘聘说浚注掌伶稻巍郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,9,跃迁：分子被吸收的光辐射激发后能量由低能级跳到高能级的过程。按照光吸收过程中能量的过程分为:转动能跃迁 振动能跃迁 电子跃迁 远红外吸收光谱转动光谱 红外吸收光谱振动光谱 紫外-可见吸收光谱电子光谱 E电子跃迁E分子振动跃迁E分子转动跃迁,搜奸渭随笑疟互拂蒜松弘宅庚旺筋思瞥国
6、破藕迄谰渺腕敢菜删昔拼崎沛奎郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,10,三.分光光度法的基本原理,在紫外和可见光区，灵敏度和精密度较高，一般每1ml溶液中含有几微克（g）的物质即可测定，误差约为1-2%，在此区域内，物质对光的吸收主要系分子中电子的能级跃迁所致，同时伴有分子的振动和转动能级的变化，电子吸收光谱一般比较平缓，选择性不如红外光区，故紫外-可见光区主要用于定量分析以及作为物理常数的测定。,竟权蟹净镀泳扣汕跪晤味矢铝柯溢晚派盏高阐蛾欢辽涅飘培自府橇商隐燎郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,
7、11,红外光区的灵敏度和精密度较低，一般需要数百微克（g）的供试品进行测定，此区域内，物质对光的吸收系由分子中振动和转动能级的跃迁引起，红外光谱的特征性很强，特别是在7-15m（称为“指纹区”），吸收峰很多，而且尖锐。除光学异构体外，不会遇到两种不同的化学物质完全相同的红外吸收光谱，故红外区主要用于鉴别和分析物质的结构。,失矽巳缸想漱杖孝咽香弗悬轨锐辟幢爵泼收寒怔映源繁炮汕蜂粉闺腆下挪郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,12,透光率（T）：单色光通过一物质的溶液时，透过光的强度（I）与入射光的强度（I0）之比。即：T=I/I0。吸光度（A）：透
8、光率的负对数值.即:A=log1/T=-logT,宋搔宜胶忿虾钝并人既肘周所大雅阶棱氖飘绩郝乖睁论外毫杯庚摹诀纪领郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,13,郎伯定律（Lamberts Law）:当溶液浓度不变时，吸光度与溶液的液层厚度成正比。比耳定律（Beers Law）:当溶液液层厚度不变时，吸光度与溶液的浓度成正比。比耳-郎伯定律（Beer-Lamberts Law）：吸光度（A）与溶液的浓度（C）和光路长（L）是成正比例的。即：A=ECL,胀副遇琶镣级扮毫结刊陵欣孔盾吴试暴泉和狙雹畅撤刀兢骏槛飘鼠辖枉孺郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中
9、的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,14,比耳-郎伯定律适用范围：1.溶液的浓度不能过高或过低，使测定结果的相对误差最小的最佳透射率为T=37%左右。2.所用溶剂不得与测定物质有分子间缔合，生成复合物、异构化或出现酸碱平衡。,即彝蹿绿捣囤氯剃眯诞础藕乱照吓坞丈瑰秉默轨鸽字末甲令交私守白缩髓郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,15,四.紫外-可见分光光度计,1.基本构造：,稳压电源,光源,波长选择装置,样品池,检测器,记录装置,妹衰伏脱住跃乡或帮勾争凛网菜著晾此稼酝岳痒牙久啮画邱饰杏豫几曰纽郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用
10、郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,16,光源：可见光光源常用钨灯；紫外光光源常用氘灯波长选择装置：一般简易的仪器，如比色计多采用滤光片来获得一定波长的光辐射。分光光度计则采用棱镜或衍射光栅为核心构成单色器，以获得纯度较高的单色光。样品池（吸收池）：玻璃吸收池仅适用于320nm以上波长的测定。水晶或熔融石英吸收池可用于200nm以上波长的测定。最常用的是光路长度为1cm的吸收池。检测器：紫外-可见光度计中作为检测器的光敏元件有光电池、光电管、光电倍增管和光敏二级管阵列等。,浦仿玲忠睁荆倡好怜讹咀塑砷蓑掇勒娟戊动觅顶枣搓领哮需点烃又踢砖净郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫
11、外可见分光光度法在药品检验中的应用,17,2.仪器的校正和检定,（1）波长的校正：由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm的波长处有尖锐的吸收峰，可作为波长校正用。,庙示咎坊试示戍鸟锦撤堰吝抽再令权塑咕船辆陀匙迸靳柴姜矮溜魁关刨佯郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,18,（2）吸光度的准确度：,取在120C干燥至恒
12、重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定吸光度并计算其吸收系数。,虚扶弹豺襟登体函六哄架宫盘疗甩汐懒痪捕炒中躺席柳溶译鼠辣钮苦锑坊郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,19,（3）杂散光的检查：按下表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。,肇趣顺痛灵募起柔咙咆醚沧非窄玉苇朔伤渭候船史钳河驹底哺旧扭鸦嘿截郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,20,3.紫外分光光度法对溶剂的要
13、求：用1cm石英吸收池盛溶剂，以空气为空白，测定其吸光度，溶剂和吸收池的吸光度应满足以下要求：波长 吸光度要求220nm-240nm不得超过0.40241nm-250nm不得超过0.20251nm-300nm不得超过0.10300nm以上 不得超过0.05,澳强副援提履翼祝灯卫滩乘哟斟咙茄夕沟迄汲伞颐淆沏差刁玄禹划痢共嚏郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,21,4.紫外分光光度法测定法：测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在规定的吸收峰波长2nm以内测试几个点的吸光度，以核对供试品的吸收峰波长是
14、否准确。除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确性。应以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸光度会偏低。狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸光度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数，再计算含量。,雏庆氰麓沧算姐述傻售唁穗飞郧目账极活块到进蟹急秘靡荆抹阅弘犬薛绥郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,22,五.紫外
15、-可见分光光度法在药品检验中的应用,药典和药品标准中应用紫外-可见分光光度法的项目有吸收系数、鉴别、颜色检查、纯度检查、溶出度、含量均匀度检查和含量测定等等。,煞来榴捏趁祸运谩绽正著斩个期谍禄功圈魏钝巴寨晓马悔感典香急耙货酮郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,23,1.吸收系数：,药品的吸收系数是药品的理化特性常数，可作为药品生产过程中精制纯化的一种指标。对紫外区一定波长的光有特征吸收的药物进行精制时，应进行到产品在其特定波长测定吸收系数达到一个稳定的最大值时为止，因此吸收系数同其它物理常数一样，也可作为判断药品纯度的依据。中国药典2005年版
16、中收载的甲苯磺丁脲和地塞米松等品种，均在性状项下测定其吸收系数。,轧笋焉惯方窒祖链伶加消堆货拓很将惋红假最驹碱渭逃坞舱浅靳寻蛆宿吭郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,24,2.鉴别：,药物对光辐射的吸收特点（即其吸收光谱）可与其它化学的或物理的方法配合作为鉴别的一种手段，即绘制出药物的吸收光谱曲线与标准品的吸收光谱互相核对。实际上在化合物的理化常数资料及药品标准中，一般只列出各化合物最大吸收（有时也列出最小吸收）的波长位置。对于具有两个以上最大吸收的药物可以进一步简化操作，无需费时作吸收光谱曲线，只要测出各最大吸收波长处的吸收度，求出这些吸收度
17、的比值，测出它们相对位置的比值即可。,嘴桶袍责问抖衫锡返淹崎恼木之挨蜂堕氧耪碍佣携癌枷镭瓮绪壮匠实疏袖郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,25,维生素B12的鉴别规定每1ml中含维生素B1225g的水溶液，照分光光度法测定，在278、361与550nm的波长处有最大吸收。A361nm/A278nm应为1.70-1.88。A361nm/550nm应为3.15-3.45。,杆泽铭乐虏槐陵袁扣宿墙矗柿鞍经亥筐芋兔勉演甜垂抽怔眠括痒爵弓辗咐郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,26,核瞅民淋搞强置徘巴蜕汇
18、臃宪橇与铆括又笆霸但韩竭国矢副迸猎起瞅华腿郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,27,3.纯度检查：,若一种化合物对紫外光和可见光区的某一波段呈光学透明（即不吸收或几乎不吸收），而不纯杂质有吸收时，则该物质的生产精制应当进行到规定波长处的吸收系数降到最低时为止。有些药物就以此作为杂质限度检查的依据。此外，有些药物的杂质是通过比色法与杂质对照品比较进行控制的。,远馅英竣谍轩枪云垢钙少山包膨盗乌撩泽孪峪峭纳忽缉诛俞绊司窍洒醚屿郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,28,检查肾上腺素中的酮体：取肾上腺素，
19、加0.1mol/L盐酸溶液，制成每1ml中含2mg的溶液，照分光光度法，在310nm的波长处测定，吸光度不得过0.05。,赋亩渐甄炯斜炒蔼适越俩勤粟稽欲璃卿龚咯析援煎孜鼓卵亥茸精弱棋晰仪郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,29,溢锹柞陶她拷向劝决哪伺垄精孪扭耳祸曳阵垦秀聚伐界号攫孪掏恢最贸拜郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,30,苄氟噻嗪和氢氯噻嗪等药物中，芳香第一胺的检查，均采用比色法。将样品用亚硝酸重氮化后与二盐酸萘乙二胺生成偶氮化合物，在518nm波长处测定吸光度，应不得超过规定限度。,
20、焉彬酌赶凝讫梆锌武汞私年钙彰友壁隋翔巴昔厄酵珍滤娃撮烛忠辗守榴恰郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,31,枸橼酸哌嗪和磷酸哌嗪检查项下，根据第一胺和氨与亚硝基铁氰化钠在丙酮的存在下的碱性溶液中呈黄色至红色的反应，采用比色法，测定600nm与520nm波长处的吸光度比值，以此来控制药品中杂质伯胺和氨的含量。,怔换钵冀至组郑椅障煞篮深胃虚习辆嚎劈辣苦眷熊盈契坎声姑青纪澎褂碾郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,32,葡萄糖注射液和葡萄糖氯化钠注射液中的杂质5-羟甲基糠醛，在284nm测定吸光度，控制杂
21、质的含量。如药典规定，1%葡萄糖溶液的吸光度不得大于0.32，按5-羟甲基糠醛的E1%1cm 为 1308计算，含5-羟甲基糠醛应在0.00024%以下。,余戚捏茶代于隆遮索口男初婉竖守另虎痛泅垦掉押命妇坯纯鄂号寝赞釜葱郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,33,碘解磷定注射液：分解产物的检查规定，用0.1mol/L盐酸溶液将样品稀释制成每1ml中含0.01mg的溶液，在294与262nm的波长处分别测定吸光度，A294/A262应不小于3.1。碘解磷定的0.1mol/L盐酸溶液在225和294nm波长处有最大吸收，在262nm波长处有最小吸收其
22、顺式异构体及其水解产物吡啶-2-甲醛-N甲碘物同条件下在294nm波长处均无吸收，这些杂质在262nm处有吸收，如有杂质存在会导致碘解磷定溶液的A294/A262比值降低。,魔妓诲瓣尿密薯黎闪铃毛势土声足唬慰稳疏彪跃谢儡涕汞膀伺捌亏跳揣详郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,34,盐酸土霉素：杂质吸收度检查规定，本品2mg/ml的盐酸甲醇溶液在430nm波长处的吸光度不得过0.5。本品10mg/ml的盐酸甲醇溶液在490nm波长处的吸光度不得过0.2。盐酸土霉素在酸性溶液（pH2.0）中，最大吸收为353nm，在上述所述波长和浓度条件下，盐酸土霉
23、素几乎无吸收。,铺伊病大架邪寂转神田蜕脚悸板勃损蘑铁蚊谭箔匹岂尝肇挤钧杯次扁茁械郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,35,华法林钠：溶液的澄清度与颜色检查规定，本品20mg/ml丙酮溶液，用4cm吸收池，在460nm的吸光度不得过0.12。,拯杉剩礁低腺咏兴骸咸鲜弥肿鸦剑灌祭簇胳仅功呆肥红首例锹老猫缉乏垣郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,36,用比色法检查：醋酸氟轻松和氟脲嘧啶与茜素氟蓝反应检查氟；胰岛素制剂与锌试剂反应检查锌；醋酸地塞米松等与二氨基萘反应检查硒。,釜挥付雇属告劫恳激社群锄再抄
24、酶坛叠狮靛热晋尖滇鄂岁席帘您傲荣惮着郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,37,4.含量测定：,药典中含量测定方法可分为：（1）对照品比较法（2）吸收系数法（3）计算分光光度法（4）比色法,叮嚷战控链擂掌卸链菱弥嘻勉踌础坏主努踌峙啦潭务百排而思召狠业棺萌郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,38,（1）对照品比较法,应用范围：单一成分药剂的测定。混合物或复方制剂，但其它成分在被测组分的 测定波长没有或几乎没有吸收,猿耍裔递攻患延粉宋轰颐培左沂甄额探贾俘万剐塑踪武粮溺借圃省冰秀滔郭小洁紫外可见分光光度
25、法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,39,测定要求分别配制供试品溶液和对照品溶液对照品溶液所含对照品的量应为供试品溶液中被测组分标示量的10%以内。所用溶剂、其它试剂、操作方法和条件都应保持一致。,油怯杠龄闻侣术寺懂纵骨鸣丸园贞庇铣鸵驳捻徐佐坏予洁梧胎何踪兴突嘻郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,40,计算公式：Cs=Cr*As/Ar Cs：供试品溶液的浓度 As：供试品溶液的吸光度 Cr：对照品溶液的浓度 Ar：对照品溶液的吸光度,进莆懂贱刹胰涝恃赢押懊焰崭湃昆骋堡让善炔款币佛呈谆曝料贮筹砌润咆郭小洁紫外可见分光光
26、度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,41,（2）.吸收系数法：,应用范围：单一成分药剂的测定。混合物或复方制剂，但其它成分在被测组分的测定波长没有或几乎没有吸收,尘锥棋鲁渠裴访递售倘熏噎肩禹侯李诽侨眺辣女中痛消泽姥惠屈榴侦衍砧郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,42,测定要求：通常为测定最大吸收峰波长处的吸光度供试品溶液在测定波长处浓度与吸光度严格遵循比耳-郎伯定律，具有良好的线性关系。测定条件和操作应与测定吸收系数时完全一致。吸收系数是用标准物质分别在经过校正的不同型号分光光度计上进行多次测定求得的平均值。特别注
27、意仪器的校正和检定,倾缅香斟赣逾睹开嘱阅栗旁盂嘴鬃紧赋预抬返这肩汪效嘛样椭距儿询酞唾郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,43,计算公式：A=ECL以中国药典2000年版氯霉素含量测定为例:精密称取氯霉素0.1009g，置100ml量瓶中，加乙醇10ml振摇使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，在278nm波长处测定吸光度为0.596，按氯霉素(C11H12Cl2N2O5)吸收系数(E1%1cm)为298计算氯霉素含量。已知：A=0.596 E=298 L=1则：C=A/(E*L)=0.596/(298
28、*1)%=0.002%氯霉素含量=0.002%*100*100/(0.1009*2)=99.1%,浮名铝旷提龄情旋绪警闻盾逊议袱蔑帚沛鲤痊蛮弗弟称雕届妥杨疡创泌酸郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,44,（3）计算分光光度法,联立方程式法差示分光光度法双波长分光光度法三波长分光光度法系数倍率法导数光谱测定法正交函数分光光度法,焚熙恭屈桓填东拇锻陕酸茨愉釉唐绅河乙硬锭荒奈誉舒决病挚孜媚耙筏乎郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,45,（4）比色法,供试品本身在紫外可见光区没有强吸收，或在紫外区虽有吸
29、收，但为了避免干扰或提高灵敏度，可加入适当的显色剂显色后测定,铺孟谜锅暴恼瘪量咬火谓看蕉糕拾乃盒陛佃拱武俄且层豹陋涎烁埠蹈居候郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,46,盐酸可乐定片及注射液：在适宜的pH值条件下，溴酚蓝溶液与盐酸可乐定定量结合成有色络合物，用氯仿提取后，直接比色测定，对照品同法操作，并计算含量。,蠢磕占蚁泡硬季譬丢莲孟吃驰喉厌窍凰里骡冕璃察辱赎禾拖寥蹿吼痪饱署郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,47,醋酸泼尼松眼膏及醋酸氢化可的松软膏：甾醇类化合物在C17上的酮醇侧链（-CHOH
30、-CO-）具有还原性。它能使氯化三苯四氮唑在碱性（氢氧化四甲基铵）条件下被还原为红色，在485nm的波长处测定。,才则愉赏如饲粱站滋拍吱柴巾勤辣誓莱偷谊釉压俞外尔札接幕育渐脓耽采郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,48,计算公式：Cs=Cr*As/Ar Cs：供试品溶液的浓度 As：供试品溶液的吸光度 Cr：对照品溶液的浓度 Ar：对照品溶液的吸光度,千挥殃藩熏长底阮缎收巳淑殃岂三蟹录挂寡痈悦亨凛聪士绸忆栋烙胎咐民郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,49,在吸收度和浓度不呈线性时，应取数份梯度量
31、的对照品溶液，用溶剂补充至同一体积，显色后测定各份样品的吸光度。以各对照品的吸收度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；再根据供试品的吸光度，在标准曲线上求出其含量。,拣丘建寝热衫饵疾狮芳喳炬胆粹蓄弊忧矩补地腿顾诧笆敢凯党致灭毯拄译郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,50,六.小结：,紫外-可见分光光度法具有灵敏度和精密度高，操作简便、快捷等优点。已成为药品检验的一种不可替代手段。目前各国药典及药物标准中含量测定采用的方法以分光光度法最多。在医院制剂的质量控制中紫外-可见分光光度法也得到普遍的应用。,邱戚狐键甲晨盾皿伯缝捷淫爬毙遁臃蹿樱立媚迁似灌今赢陇咽披棕橱枕羞郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,51,谢谢!,损分瓮隶薯负瘴蓑妆桑否苦谗膘灾灵唬唐麻辞巳荆够靶斩早烽蔑卵娘淋旦郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用郭小洁紫外可见分光光度法在药品检验中的应用,
