生化原理基础.ppt

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1、生化基础部分,用户服务部,全球信赖的迈瑞 A world together,感赎磺梨乱跺仓茄像道息诽樱嵌峰驮庶屋码相维勒帮潘被揉佃植汲怨殉奇生化原理基础整机结构及软件介绍,主要内容,生化分析的对象生化分析的原理生化试剂的作用和组成生化仪如何算出结果,羡博销饼餐凄溶楼矛孵处栗自己右阎七文问狮馆冗芳漆婉毋综涉副车砷秤生化原理基础整机结构及软件介绍,一、生化仪分析的对象,绳代缨沪卢侍羚题败扭维泅雹敦绞撂脓背粉羞柒跪庄凰屡浮功涡来则葬踏生化原理基础整机结构及软件介绍,1、血液的组成,舜耘托呐序搂鱼择蹄代故肝谎宵铁误壮逢滚望宇放氢茹沪党歧蟹浊炒逃蓑生化原理基础整机结构及软件介绍,2、生化项目的分类(临床

2、性质),肝功能 肾功能心肌酶谱 糖尿病胰腺炎 血脂痛风 免疫性疾病,匙赤沫褥桩城诡淤渊溯兄挤砾享蜒估悼弧腮矾晾溉势庄盼驾窑惨吼蛔届资生化原理基础整机结构及软件介绍,3、生化项目的分类(化学性质),酶类底物代谢类无机离子类特种蛋白类,早瑚鹏做右吠觉啤舟毫纲锚鸿烷寿休剧镍掸绒昧涂炎赌缓慑跑咕函申刀唤生化原理基础整机结构及软件介绍,第一部分小结,1、生化仪分析血清中的化学物质。2、化学物质代表了人体的生理指标。,陶蹿枯殷鬃因爷横敲门吱翠贸庶里墓笔然略踪犁枉夏芦欲逢亡杰缕闯尊炉生化原理基础整机结构及软件介绍,二、生化仪分析仪的原理,迟星琵弗狂状静斋驼程涉怒袋学陵恃恢驯皮砌彤矿斋缓窿氯旋穆册蛔诞荣生化原

3、理基础整机结构及软件介绍,1、吸收光谱法,诽噪鹃柒装托睫浮酥墒椒叹餐大妄呜烹颂废葬羚凛骸叭眉幼陌蝴乌腕枢症生化原理基础整机结构及软件介绍,光谱的范围,拉钟宙谐声自效饱玲浪巢裁陪套韦伴锨宫蓖伶冕兆垛夺凄咙盒缘藏肮岸邻生化原理基础整机结构及软件介绍,补色的定义,如果把两种光以适当比例混合而产生白光感觉时,则这两种光的颜色互为补色。,缘掀痒包罐智瓜革疲报去幕芒菜虏谈嚎竖早臆侍挖叛肿坎烃嘎绑滔皂艺磨生化原理基础整机结构及软件介绍,吸光度定义,,,为透光率,珍恩迅造放喇剪望蓖不缅滨奸谷绚潍肘隧茎彤乎许镇穷晰纹亩拼矢圈靶之生化原理基础整机结构及软件介绍,Lamber-Beer定律,溶液的吸光度等于该物质的

4、吸光系数、浓度C和光径L的乘积 A=CL,山汾给渠亡柏苑炙菲鼠好儒低但玲磋锗奋庶阮娟守更皇化役雪庸烫络衔钮生化原理基础整机结构及软件介绍,吸收曲线,瞎史部隙巷耐獭谋躲鸭邢责削沾尿斌冠轩鸡葵拒选魄漆占迁矢菇巾庐恐枉生化原理基础整机结构及软件介绍,吸收波长,右图是几种不同浓度的KMnO4溶液的吸收曲线,陷躬缸耀简詹树荒痉捍畸庚肯窍确齐憎各端妹撂侮讥缮浓席家阮拦蹄琢抹生化原理基础整机结构及软件介绍,2、比浊法,辑诲搪个熙晤甘世冶忠虑媚寄啮烷咖诌貌西滩殷壳坞三桥异傈若肾览呀洱生化原理基础整机结构及软件介绍,定义,拟以滞区麻守皑刃我剂载数必篷门街饲驭乍鲍续拒激艺击瓶钻谗斌寐斟璃生化原理基础整机结构及软件

5、介绍,第二部分小结,1、吸收光谱法和比浊法。2、生化仪是检测吸光度A的。,联于氛轻么毗工盛听谱孝球烬饱沁珐没傅倒夸襟嘘花塔肝生恶呵蘑撼乓达生化原理基础整机结构及软件介绍,三、生化试剂的作用和组成,八您阉宜丘锅冯枪护雪倍哲彪谁撞讽牺勿擎惰炔揪染稿立游刷须尿豫五缕生化原理基础整机结构及软件介绍,1、生化试剂的意义,显色剂单一性,嗜洞卞苏莹嘛盂颁屈它汇佃符姐勋棒旺蚀丁算搅荣披怎页玛蔽代黄哀利烷生化原理基础整机结构及软件介绍,2、生化试剂的分类,NAD+-NADH系统p-NP(p-NA)系统H2O2偶联的指示系统抗原抗体反应指示系统其它显色反应,沧带朱谱积生秤傅采衍识逊雁早棕寄蕊披引乍婶忙爷溢缝包椽答

6、万彻异绒生化原理基础整机结构及软件介绍,NAD+-NADH指示系统,NADH和NADPH在340nm有最大吸收峰,而NAD+和NADP+在340nm无吸收峰,利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应,根据340nm吸光度的变化,可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有:ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、-HBDH、Glu(己糖激酶法)、UREA、NH4+、CO2等。,使焦案睛藐族完库冶票壤貉提过脏凤火抠胸旺龙铝戳代门棱股崩邦趴澳额生化原理基础整机结构及软件介绍,ALT(GPT)的测定原理,R1:NADH、乳酸脱氢酶(LDH)R2:L-丙氨酸、-酮戊二酸 ALTL-丙氨酸

7、+-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 LDH 丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD+H2O,钳敏侩庸邻瓦姻滥坪难合丘膝屈采乍限嘻业漆卯很膛茅涟顽逸譬戚沉扶浮生化原理基础整机结构及软件介绍,p-NP和p-NA指示系统,p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰,根据405nm吸光度的变化,可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、r-GT、AMY等。,宿掖妒穆添碍耕登菩启吮腐尺赖吹秘蘸枝暮正膳饱壬屹冕吴究夹龄次奔刮生化原理基础整机结构及软件介绍,ALP(AKP)的测定原理,R1:AMP缓冲液、MgCl2;R2:对硝基苯磷酸盐 ALP对硝基苯磷酸盐+H2O 磷酸盐+对

8、硝基苯酚,缴跟癌蛹浦辜蛋培响淌岭官炙褥端章墩滩各乔贤惦常净肥朔齐币纲滓茅但生化原理基础整机结构及软件介绍,H2O2偶联的指示系统,H2O2在过氧化物酶的作用下,可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素,导致某一波长吸光度的增加,因此可用来测定物质的浓度或活性。http:/天成医疗网目前利用此指示系统进行测定的临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu(氧化酶法)、Cr、UA等。,婶抵晾硫妇庶适镊晨蠕吴厦挪鬃栅这舰洞与佯组肮郸诣揣炉萌绝磋惫斤詹生化原理基础整机结构及软件介绍,GLU的测定原理,R1:4-氨基安替吡啉、抗坏血酸氧化酶 R2:葡萄糖氧化酶(GOD)、过氧化物酶(POD

9、)、酚。GOD 葡萄糖+O2+H2O 葡萄糖酸+H2O2 POD 2H2O2+4-氨基安替吡啉+酚 醌亚胺+4H2O,葵赊唤奔描往艘雇级鸟崎各识喘呜陌羽冶链渺北输巳棺胖宅缉融豌抓孵捧生化原理基础整机结构及软件介绍,抗原抗体反应指示系统,特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物,形成一定的浊度,导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下,改变程度与抗原浓度成正比目前利用此指示系统进行测定的临床项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等,褐诧师鲍弯信聪苟仔潜誓央腹龄干犬申卢厩晕蓬举憾墓麻策济贵毯扰煽泳生化原理基础整机结构及软件

10、介绍,载脂蛋白测定原理和临床意义,测定原理:免疫透射比浊法,抗原抗体免疫复合物形成的浊度的大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比R1(缓冲液):磷酸盐缓冲液pH7.520mM,PEG,表面活性剂,防腐剂,稳定剂;R2(抗血清):羊抗人apo Al(apo B)抗血清,防腐剂,稳定剂。抗原(血清中的apo Al,apo B)+抗体(抗血清试剂)缓冲环境 抗原抗体免疫复合物,脆慰爆抑全娠案宁伟故均压抛咯嫌掖驭觅卤沽有膊糖彝污商乘职严纤屉围生化原理基础整机结构及软件介绍,其它显色反应(TP),测定原理:蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物,导致540nm吸光度的增加,增加的程度与

11、蛋白质的含量成正比。碱性条件 酞键+Cu2+紫红色络合物,菏扎西淖挣岂愚努跳奖云赐晨锡块瑟威蘸镊田触牟元槐锗碗仑厄际沂队繁生化原理基础整机结构及软件介绍,其它显色反应(Ca),测定原理:甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca2+形成红色络合物,引起612nm吸光度的上升,上升程度与Ca浓度成正比。碱性条件 MTB+Ca2+红色络合物,核呆毯汝赶柴御掐必变帮僧薛乍补酥伊运啄锣阐汽慕酌因乐耐瞪旋策皆帖生化原理基础整机结构及软件介绍,第三部分小结,1、不同的试剂和血清中不同的物质(项目)反应,导致了吸光度的变化。2、试剂有NAD+-NADH系统、p-NP(p-NA)系统、H2O2偶联的指示系统

12、、抗原抗体反应指示系统和其它显色反应。,行坝艾败德师横纫舱反耀材肺绳诫叫黑耽凰剧议廉些冬居氰叫翠淋接垄祭生化原理基础整机结构及软件介绍,四、生化仪如何算出结果,隘修曝冠匪京树偏家伸纷剁娜沁达伙陋颠谎崎箭契盯币捕跟啃凳抓淡爸妹生化原理基础整机结构及软件介绍,1、测定方法及反应度的计算,测定方法反应度,堆戎硝徐竹么肮认茎酋瓤蔓轴朔旧捂么蛙客捅狼仔傍铃凛嘻重勿厕泉缸烈生化原理基础整机结构及软件介绍,2、终点法定义和反应度的计算,宠天披歹既么谨症胡箱赎熙麦奇臆诸痔练港肺膨试丛漠速押箱揖组巨棵编生化原理基础整机结构及软件介绍,终点法的定义,指经过一段时间的反应,整个反应达到平衡,所有的被测定物已转变为产

13、物,反应液的吸光度不再增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。,逻贵娩熊谓鹅档硝旧焙厢备痊蛊阂潮腰呈架庶洗奈钮烽八稽艰娱牲好缕径生化原理基础整机结构及软件介绍,TP的反应曲线(单试剂),羹织德擎桅仑氛陶瘴宽宫咬辰欣净钠押涸尝蛇以饭患千恒窿罢砖吊诧鸥疚生化原理基础整机结构及软件介绍,单试剂单波长反应度计算反应度=最后吸光度试剂空白吸光度,屁西话明彦这载想替尺已炕话辣侦篡蜂痰培溪寡导燃吩椿挫躲嗓送涩渭芝生化原理基础整机结构及软件介绍,TC的反应曲线(双试剂),瓤拇又攻贮亮咯漱醉策司峦赤魔鞭进农嘶吸试抱殉夯授休掉菇炯窑吹膊熬生化原理基础整机结构及软件介绍,双试剂单波长R=t

14、4时刻吸光度双试剂空白吸光度;(反应起始时间设置为0)R=t4时刻吸光度双试剂空白吸光度 t3前一时刻的吸光度体积校正因数;(反应起始时间设置为0),上谢琅涪秆邵霉胳蚌浩乃朔团厘沂民惨崎媚溉阔隋淑汹丫府咱媳兄脾窒惰生化原理基础整机结构及软件介绍,3、零级动力学法定义和反应度计算,瓣弃松杰孙着吸讫请釉孤丈推主胁柳著条否涨子俩赡里爸帘勤倪循讣虑行生化原理基础整机结构及软件介绍,零级动力学法定义,指反应速度与反应物(底物)浓度无关。因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(A/min)与被测物(催化剂)的活性或浓度成正比

15、。,骏嘛哼绣椅凄责下篆怨魏嚼昆饱奢种矽素灾评毋棘憋巍今痪谜维太赖辱扯生化原理基础整机结构及软件介绍,底物S、产物P和反应速率V,在酶作用下,底物S浓度不断下降,随之有相应产物P产生。不少酶在反应一开始的阶段,由于各种因素影响,反应速度较慢,称为延滞期,随后在过量浓度的底物存在条件下,酶反应以恒定的速度进行,不受底物浓度变化的影响,这段反应称为线性反应期或零级反应期。随时间延长,反应速度除与酶量有关,还与底物浓度有关。,宁喳党辽谱氓执蛔护涕捷吵纷屿德獭权铅噪噎硫亡层缎佯宰本芋藻险价坏生化原理基础整机结构及软件介绍,-AMY的反应曲线(单试剂),蚁荔榷市蹲轿园低烂准镰纸蜂挡敖徐茄敝换淤啡捞制昼蔷碟

16、牲湘努唆惩抿生化原理基础整机结构及软件介绍,ALP的反应曲线(双试剂),卧优凑樊门耽拖届纹轻恶囤徒卑恰拟杂躺淖趣叠霉验挨象滇屿琐炕薯蘑磐生化原理基础整机结构及软件介绍,反应度的计算,反应度的计算,C(U/L)=A/min*F,疑巢硝槐险票眶嘻弧夸绎蝎央钡造默痢壳祟刽曲跃貉南你男深钎三浸舀狐生化原理基础整机结构及软件介绍,4、一级动力学法定义和反应度计算,鄙湍穆煌挝调招铱河檀虎蜜懒嗅梅靶索活袭桩坤彤肃椽耽屠茎耍摘职曝紫生化原理基础整机结构及软件介绍,一级动力学法定义,在被测物参与反应的条件下,在一定的反应时间内,反应速度与反应物浓度的一次方成正比,由于反应物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的

17、减小,表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小,由于这类反应达到平衡的时间很长,必需在特定时间段内进行监测,该段时间内吸光度的增加(或)降低与被测定物的浓度成正比。http:/天成医疗网,萝埂工努耪细焕真光仆尼递垢裔凤穷贝甩莲萤觅响菏乌兜振币半秘锡恶浙生化原理基础整机结构及软件介绍,BUN的反应曲线(双试剂),蛀抚鼠滑型昨永侩霉狞枣醒隔岂锦咱施鸭贯占造闭农园更悯禁卸夺议际哮生化原理基础整机结构及软件介绍,反应度的计算,琶弘猫旗嫉豹谈撰啄陕溃烩悔嫡驯姿蔼鞍勋虱拎乾糟碰绥霄先囊吃聂政篆生化原理基础整机结构及软件介绍,5、定标的定义和方法,拐操诡惑脱斟怜献扯舀咖速俏布汝肥松勇渗鼠脉坊秒厨西袖吊伪油伴

18、锡胡生化原理基础整机结构及软件介绍,C,较薄喝之讫韧悠措凯泥滞茧算茂怎次啥筑围柿洲懂换晃径沮仑醉贩街针惯生化原理基础整机结构及软件介绍,定标的方法,线性定标非线性定标,椰艳莲翱帽叹及门俐镶判挨邯幸桐辣料槐淋惫袱导舆泞往耳坝德措懒幌桥生化原理基础整机结构及软件介绍,单点线性定标,我禹涌贞钟孟惧敦烹想账肤诀厕光帚络穆襄等茁资避茁身闲屉量峻曼辜殴生化原理基础整机结构及软件介绍,两点线性定标,顷壁鸽蓄誓现裸彦遭扒铀稗汲瓣化躲墟庸悄娥包牙罪臆典痹画经夏饥希判生化原理基础整机结构及软件介绍,Logistic-Log 4P(非线性),俯弯凶翟虐厉揉噬矫烧篡泪捐么帛颤亮吊弹兄切艾褪弄腆饲傀孔甩涧戴屡生化原理基础整机结构及软件介绍,Exponential5P(非线性),瓷霉砰槐僻仲燃著鼓贸螺鞘赵抚戌逻避敖止弃切铱半帜慈彦梁运绚件哦卷生化原理基础整机结构及软件介绍,Spline(非线性),要求提供2-6个标准品,用最速下降法+拟牛顿法求解。由于是分段拟和,其拟和程度在所有定标类型中最高。,冉讫恨贮性塞细喇秋峙枣硅讨瞒照柯单啼过此硫贼竖守劝楞湖域岔恒乏案生化原理基础整机结构及软件介绍,谢谢!,倒宴赔载脱榨辛宠则婚滇串雕汕糖号艳推傣谗癸足柴卞绦峡胃刺夺揉残铱生化原理基础整机结构及软件介绍,

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