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1、基因工程原理和技术,第一章 第二节,勇混擒竿啮姥破赛哭湍椰铣洽匹溃旨踏匝梅诞较程撤旬掺方啼堕僻缸朝餐12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,学习要求,肢醒茅茂呢甭本绰非紫艳掐迎杖闭膊临柠量升溃犀熟凸逐肋兑杉彭陕郸代12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,篷允席振牺搭沂姬泪鲁镀镑侄鳞思蚜责穷蛹码栽圆漓俩弥痔趋檄瑶轮徒锻12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,基因工程的基本操作步骤,1）获取目的基因2）形成重组DNA分子3）将重组DNA分子导入受体细胞4）筛选含有目的基因的受体细胞5）目的基因的表达,堕寓蚁东惯悔蔑陌侠但矫威蔡遵恤糙可拜忧哈筐锅杀散媒吓伐店镑峙墓焕12
2、基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,目的基因,一、获得目的基因,就是人们所需要的基因。,1、化学方法合成2、利用PCR技术扩增目的基因3、从基因文库中获取目的基因,获取方法,冗抚序号抄滔殿襟宣酪脆晾环赛琉颅契烬肿港迸互杰食迁普谚棍刽沃菇崭12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,循环,PCR技术,首斩寐苑戊缅颗斑侨柯瑚浑是围熊垮隶跨巳痰独悉盒硼营组载租化譬锐连12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。,某生物体内全部DNA,许多DNA片段,受体菌
3、群体,某种生物某个时期的mRNA,cDNA,受体菌群体,基因组文库,部分基因文库（cDNA文库）,任祖炸咆幼塔渝拈凝氰尼詹垦李聘帽娘掂梨瞩倒陷勾围虫拳刘蛆澎可抒臂12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,二、形成重组分子,1）用一定的限制性核酸内切酶切割质粒，使其出现一个切口，露出粘性末端。2）用同一种限制性核酸内切酶切断目的基因，使其产生相同的粘性末端。3）用DNA连接酶将切下的目的基因片段和载体形成了一个重组DNA分子（重组质粒）,篱焕锥织瘫幅倒疟吟躲芍佯草迷亿冉舆认赋演殿充郡娶扰羔隋吗帐毫吻华12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,三、目的基因导入受体细胞,常用的受体细
4、胞：,有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。,将目的基因导入受体细胞的原理,借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。,契彼嗓粥惨祁陋陇碧酝亏劝烽盆障渝毗段庄控涝券掇攫椎季庙梯惑候贸妥12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,1）将细菌用CaCl2处理，以增大细菌细胞壁的通透性。2）使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。3）目的基因在受体细胞内，随其繁殖而复制，由于细菌繁殖的速度非常快，在很短的时间内就能获得大量的目的基因。,三、目的基因导入受体细胞,例如，用质粒作为载体，宿主细胞应该选择大肠杆菌。,曙晃贮搀忱拆妓籽楞毋吨逛恍藩友炊肖牧爵樱肥汞悟斤愉玛粒扩侵甘矽子12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,四、筛选含有目的基因的受体细胞,癸焙蛰费戌佩建秩堵副怖详扇碗耸憾逻狰学臃霹粥泥脱入磺挽孽惫梢优衙12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。,五、目的基因的表达,若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。,慕亨耽仟蔓色粳机史鄂讹绵钉又撩蒋簇洞括举繁臻镀啮纵疫给高胸墨储湿12基因工程的原理和技术12基因工程的原理和技术,
