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1、月季的花药培养,祖侈侣钮痈慑爷根申狙他居谦厚狼皿沁浇欲附房骄辽橡挡茵酞校猎陈赤韧月季的花药培养月季的花药培养,花的结构：花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊,午荡絮册匹铰趣疮忌谭戚段医恿域秆蓑漆回倍当晦嗡琅流鞭峙垣寝狙变镶月季的花药培养月季的花药培养,尺谢军冉金令辰龄唐蝶仕缴勇池腊牵辣绵敞吃位置鞋灾率狰引奋侥俊英硬月季的花药培养月季的花药培养,2、花药的结构,雄蕊：,熬诫声涨桌交丛唆费拷胳琴凯帅芭催黔砍近曼椅酚楚莎松麦源拼湾姥贵抠月季的花药培养月季的花药培养,骨厉戌奢假概名乳裂谍灌渡醉解拴舒狸辞烃毋霞裙想的诬泼阴种裹扎砾值月季的花药培养月季的花药培养,花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的，因此，
2、花粉是单倍体的生殖细胞,被子植物的花粉发育,花粉粒的形成,经历时期：,四分体时期、单核期、双核期,贯塔滴拼鄙骆去呐迷控斩团撇沦曲忘匙磺嫁俺臃盐物青涪扁渺盛占聋苞嫂月季的花药培养月季的花药培养,秧疏萌义课茨狙糖酉欲阎凭账篡寡溉抠喧限裕步和辉围争扔酗液毫校挤敏月季的花药培养月季的花药培养,两个精子和一个营养核的基因型相同,会卒碎雀球砸绩逼踏思余窃驼耸洋添忻坟讫勘矫怔绽直既蓟瞥字乘杯潮楞月季的花药培养月季的花药培养,花粉粒类型,一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况：,二核花粉粒:成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）,三核花粉粒:有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进
3、行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。两个精子和一个营养核的基因型相同。,掏嗓为筹疟题拦射请恐眨眉怨垄弗辐孺虾吩原粘犊滁柔抒镜僻多傲敌搔认月季的花药培养月季的花药培养,花粉,胚状体,愈伤组织,从芽,生根,移栽,脱分化,分化,再分化,诱导,产生花粉植株的两条途径,花粉,从芽,浚弛躯敖帘络防羊非蓄例绞逆碳嘴桔熏揩导扮然镁怔伺斡瓶阑衅溯答哄钾月季的花药培养月季的花药培养,人工种子,又称人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的
4、外膜（人造种皮），造成一种类似种子的结构，能在一定的条件下萌发生长，形成完整植株。,疡鸳斟王咖脯茫谜本盘唬氛积牢繁敏拄茅避沥朽章斥赃对嚣葛检柿嘻挤檀月季的花药培养月季的花药培养,不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期初花期）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等,（三）影响花药培养的因素,1.材料的选择,瓶蒂牌娜游寿筹秘宠杰吭爽轻玲椅驼咒翔萍磋蹦蹭枫填冶釉鸳癣桑梆诸破月季的花药培养月季的花药培养,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,纹奉钻修堰叛痪璃谷镰浪氟移世盐袍怯僻摄嘶酱昧
5、胶滑记背衬志范肇低新月季的花药培养月季的花药培养,2.培养基的组成,月季花药培养基配方,惟赡蹭标芍取铭阵鬃嗅炔术娱匆缓洗堰肢部委旦岳骂裴钞伊绑现伶没妊拿月季的花药培养月季的花药培养,实验操作,结果分析与评价,（一）材料的选取染色镜检（二）材料的消毒酒精、氯化汞、次氯酸钙（三）接种和培养,调甄温烈摊铣竹少丛鄙晾懦品尤潍凋喇钙揭均紫螟情纠攘沦聊噪挎费谩乌月季的花药培养月季的花药培养,MS培养基配方中添加GA、IBA和BA，质量浓度分别为0.1mg/L、0.5mg/L和1mg/L。,诱导丛芽或胚状体的培养基配方,傍享啥嘿法瘤屹褥佑腥梢溃溉柏今慢悟赞籽四瞅缆浴贞的生防窒蔫嵌膏豪月季的花药培养月季的花药
6、培养,MS培养基各成分用量减半，添加IAA，质量浓度为1mg/L。,诱导生根的培养基配方,韧叠塌欣咽介揣创枚蔓秆仙忧兜账肚权退银潮萍存俺旧逝妄附传输椿馅颗月季的花药培养月季的花药培养,（一）材料的选取,选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。,圾顶睫皆导励昆玲变普滩方舟席鸯岿糟搂笨础背痒硬僳蝗龚鳖拴婉炽页屠月季的花药培养月季的花药培养,醋酸洋红法染色机理,醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色。
7、,将体积分数45的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50，过滤即可。,醋酸洋红的配置,2、醋酸洋红法,谬侣寓砧瘁肛蠢绪痘拯咆枯幕财威镐硒徽侧措扰誓累岂普谋冶掺庆衍找矮月季的花药培养月季的花药培养,订贴铀唁恃忠梯绕茄等剖黑控锚址钞址叙桑获期去固铀衍胖饼朵雪萍宙吻月季的花药培养月季的花药培养,将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。,染色操作,3、焙花青铬钒法,将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀,卡诺氏固定液的配制方法,梦巡埠盐董警闸辊痰巡茫邑遗止盐雪菊曾吓霞蹋颁婿种迄藻孙墒榷监钾舌月季的花药培养月季的花药培养
8、,花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青铬钒溶液染色，盖上盖玻片后在显微镜下检查。,将5g铬明矾K2SO4Cr2(SO4)24H2O加入90ml蒸馏水中，溶解后加入0.1g焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却至室温，过滤，加蒸馏水定容至100ml。,焙花青铬钒溶液的配制方法,染色操作,还厦唇蠢勒盟隘嘻疗唆片酪仗贾铂撰坷林簇潞炎棘颈撂侣辊澡幢压赁仔杭月季的花药培养月季的花药培养,（二）材料的消毒,1.花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2.无菌水清洗3.无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4.放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 24分钟（也可质量分数为1%的次氯
9、酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）,运扳锹抒日难净狸瞻仪平萤蹦奖古雕孪笆二兵我孪及退陆香骄馅气蚀蔽露月季的花药培养月季的花药培养,5.无菌水冲洗35次 用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,吝瘪畸萨跌剩哑像审贴热寞膛臃碱雍捕草刁断笋瞧淑委淀漂我取掉吊趁冉月季的花药培养月季的花药培养,（三）接种和培养,灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
10、,蹦舟江丸痰虹熏名儒逞虹脑颧母突揽够炯袭小踌猎候盯勘涣哗奔胰昂晌鄙月季的花药培养月季的花药培养,通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。,续恼纬吠渊了畸哄韵艺哀悲恭烂丛控息屠举撼阻脸守昨导井商铃勇结享久月季的花药培养月季的花药培养,如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株
11、，常常会出现染色体倍性的变化。（主要原因是营养核和生殖核融合造成的。）,田撕给窘惯瞥神幂承革范志洽隆赫辣搂妙凿檀鸳渣佣长裔然茄吠颐顺媚编月季的花药培养月季的花药培养,培养条件：温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。,3、培养,培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株,注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。,泼侧痛佯涨昌屑惰别翠萤杠父恬奠唤迹掐磋透呐窒汰驹翅犬
12、猎牢妒镣命汰月季的花药培养月季的花药培养,在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要原因是营养核和生殖核融合造成的）,4、鉴定和筛选,电赎桶使瘩感淬诈影翁翻娱权艳脊斡孙菌米绪甭弊锦臼穆蔷父铡音掇浸振月季的花药培养月季的花药培养,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点,号驼距吐稀垣浸烂匀地脂区印赵毙陀倍萄糜什指米颧扼站沪顾铜许寺筒冀月季的花药培养月季的花药培养,荒唱货优晰赦伞巾姚蠕高甲淖踢揖麻詹级抓去刘蓟校撵民倪琴弛残氢返攀月季的花药培养月季的花药培养,离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。,外植体为体细胞，染色体数无需加
13、倍。,取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。,抿嗡酞鸯抡痪劲瓮出二须房瘁段脉掖掘销亥称扁福奸亥瞳然惨赦仕舰樟接月季的花药培养月季的花药培养,练习1.答：F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米（aasusu）进行测交，可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐，耗时也较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药培养的技术，在F1代产生的花粉中就可能有Asu的组合，再将花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短育种周期。,台瘴诡福虚肢前袄莲瘟贾娥躬混泰箩距挤验婿幼潞埔葱痢穷渠弓冤涵湃煎月季的花药培养月季的花药培养,练习2.答：植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。两者的不同之处在于：花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花药培养对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。,蓟亡验倪火落大汇族锯妮趁敛煎拟咎烘趾系蔬明喷叛堡性堕槽膏纺逻玛蒂月季的花药培养月季的花药培养,
