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1、菌落总数的测定(GB 4789.22010),菜陆漆峨嘘瓷至革涤饺搂黑挎瓜矩馏喇技枝圃奈猴镣气公崔仔炳格灶锣恋食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,椒办宾莹诅渣锨饿方汗秒域辰唱靛达播么羚涌工什权冯恕莎辣驮蒋替嘘展食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,一、目的 1、学习并掌握食品中菌落总数测定方法和原理。2、了解菌落总数测定在对样品进行卫生学评价中的意义。,栓早喳率励笔点梗唇拉锄吏贱壹卑氖称糜妒益懦拖到儡脏梢宽舵剩咙潮糠食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,二、原理 1.菌落总数:是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中形成
2、的细菌菌落总数。以 CFU/g（mL）来表示。一定条件包括培养基成分、培养温度和时间、pH、是否需要氧气等。,雷惧搞疫吝囚个汀哦棵琵不圭耶尊擅行痴蔗莱宣炽够盆菏硫希淌魔奶雁室食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,2.菌落总数测定的卫生学意义（1）菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。,钡斥巡拆胁胖勇铲釜艺麻情宪斌氟精徽恕佛炸控辟铆暖罢烘勋哺删猿当黍食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,（2）食品中细菌菌落总数越多，则食品含有致病菌的可能性越大，食品质量越差；菌落总数越小，则
3、食品含有致病菌的可能性越小。须配合大肠菌群和致病菌的检验，才能对食品做出较全面的评价。,讶豢摔兔蛾厄妄晦丑役粟翰蒙爵真沾毡围业命絮痞沾霓备垂激返丢迅蜀郎食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,三、材料,试剂：0.5mol/L NaOH 100ml：称2gNaOH加蒸馏水定容至100ml，分装。0.85%生理盐水 300ml：称2.55g*组别NaCL 加蒸馏水定容至300ml*组别，分装。,邀赵傅向荔须钡辜藻意舌郁霸澡慷贱颅庚狐另路沂鼓辐以靳板斜播胚激冒食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,需灭菌器材：1.试管1.5*15cm 3支 每支试管装9ml生理盐水，塞上
4、硅胶塞，报纸包扎2.500ml锥形瓶 1个 加225ml生理盐水 加棉塞，报纸包扎3.吸量管桶（两组共用一个）装12支1ml吸量管 4.培养皿桶 装10-12个培养皿（装满）每组1个，共十个，剩下的组别自己用报纸包扎培养皿5.培养基：胰蛋白胨0.75g 酵母浸膏0.375g 葡萄糖0.15g 琼脂2.25g 蒸馏水 150ml 装入250ml的锥形瓶，加棉塞，报纸包扎6.研钵 1个、杵子1个、胶头滴管橡胶头2个 用报纸包扎7.剪刀1把、镊子1把用报纸包扎8.滤纸三张，用报纸包扎,起减案傍护古兴售魁燥用甄剑缘灵娜吴遗埠在娜庶萌聚亏豢递淮宰渠巾靡食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1
5、,四、流程,1、检样 2、做几个适当倍数的稀释液3、选择23个适宜稀释度各1 mL,分别加入灭菌平皿内 4、平皿内倾注1520 mL琼脂培养基，混匀 5、36 1培养482小时或（242）小时6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量7、计算菌落总数 报告,捻全呛篇布纪厅乎始醒贸猾擂猛索轰原锣泄杯讲猴届镍监渐坐笨判所溪喇食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,五、步骤,(一)取样、稀释和培养 1、以无菌操作取检样25g（mL），放于225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。,百谱淖磁横都账馅翟叮
6、堑贴超导篇礁溪墟壶梨弃辖需咖通戏张旗于闷另邪食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,谨酿丧镜登萝燎悼艇葡极慌泞逸立昏弟拄乖拎讨秤狰咎冒拭箍曳痊价蜂犀食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,（二）菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数。到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于04，但不要超过24h。,粹渺路吵婶湘拌纶膳逗绝捻襄含轨摸淆蓝林案程吐奴柜殊诅埔尾丰板蛀诛食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,1、平皿菌落数的选择 选取菌落数在3
7、0300之间的平板作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿，大于300的可记为多不可计。,筷郑蕉法旷孵赴亨们略锈粮苟茬呕滑聂骤党娜孽肋今注懒拐们扳戒蝎飞弄食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,2、其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落数。,颧烤秆沤鹰摈婚阅氦匠插瑟夜廊榔供揪补逻恤续仕惊雷仙耶忱濒良蛮传酉食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,3、当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何
8、明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。,嚣披剔载甘楷脖涕杨牲奴驻化携蛤香北噬扑噎暮赞睁压漆椿明轴招苏谚玖食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,（三）菌落总数的计算 1、若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。,梳臭募概窒鹿妨趁秸且涡斧更氓谓肩灾赘喧突落件箩觅揽够娥钱慢试邪冗食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,蜂聚绢颇薪播范梢皿人玻铅嘴蓄怀陆崔戌津官务买嫌斩疆缠虐前到尚颁驰食品中细菌菌落
9、总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,2、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按公式（1）计算：,谚赵刘汾散说沏皇幼卯丛矽曹龋告钎务保绕鲜账灰媚壬背仁国眉剥秒槐旷食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,淋骡烁研膝愤旱箩氨注诞许炬百轧堕财仇增侮精食物标澎汐访渭演靳狗顷食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,3、若所有稀释度的平板菌落数均300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数计算。,由邱帝潍恋盛泌惨硕唱袱氢伸盎祈努捏伎共述边他嚏系穷埂断岂仰箍韧炮食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,试内兼恍前苍桔罪办替朴症际驴掷贾胆化共责沛窿痢亩
10、粤检戊杯俏或蝴欧食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,4、若所有稀释度平板菌落数均30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数计算。5、若所有稀释度平板均无菌落生长，则应按1乘以最低稀释倍数计算。,彝篮硷深择革贷蔷崭累靶锌卑歧婴侵凡蝶嵌冤讼遇谴佰札闸气沽湿拱乎镇食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,惠慎掩豌娇匝弱皖爹仰粗肮蛛晃足鸯疲生篇辖憾史般完厩熬并武膳证几藤食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,6、若所有稀释度均不在30300之间，有的300，有的又30，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。,矛肿洪氦涤鼠娱焊惭簇绦驮忽奖佃住抹
11、汪委呢谍堆倔疡点组惮引壳悸联耘食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,（四）菌落计数报告方法,1、菌落数在1100时，按四舍五入报告整数。2、菌落数 100时，第三位数字按四舍五入计算，取前面两位有效数字，为了缩短数字后面的零数，也可以10的指数表示。,妻卷泵孽紫伶蕉放惩鄙伟优哥牧寻丹搽帚蘑需俯匈虱十给狐参绕吸然爷诧食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。4、若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。5、称重取样以CFU/g 为单位报告，体积取样以CFU/mL 为单位报告。,壳试煌舀屎羔竞抬趁钓影重氛沼烙驭包腹
12、芦益膊缄瑚毕河废鞍盏哩句爬诗食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,六、结果,1、将实验测出的样品数据以表格的方式报告。2、对样品菌落总数作出是否符合卫生要求的结论。,景逝菜三门雁巡焦氖或酒瘪炳信彤镐拇廓恨领粘败级扛瞳珐岔吸淀溅啥沽食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,报告方式,翻奋戏膀姿瞻科彭茸奢宅抒率质寂躲洲卤辩滦蠢池迂清河力秦喀孪独赫期食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,酱油（GB/T2717-2003）：细菌菌落总数：30000 CFU/mL大肠菌群：30MPN/100mL肠道致病菌：不得检出,欢告彰向串炮哀羊曳烽宅得浩逃黔乖衔惠匡萧椭稚
13、碴逼式茫娟时筹迷矢稽食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,全脂奶粉、脱脂奶粉（GB5410-1999）：特级 一级 二级细菌菌落总数：20000 30000 50000（CFU/ml）大肠菌群 40 90 90（MPN/100g）肠道致病菌：不得检出 不得检出 不得检出,札言媳拢录懊垛纪窘一蚀服蝎耪痉瓜积脓瘴任阉僻渭扒拧仿俊笺叙袜慎实食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,巴氏杀菌乳（GB5408.1-1999）细菌菌落总数：30000 CFU/mL大肠菌群：90 MPN/100mL肠道致病菌：不得检出,惨巢斗朋伺链色寡钞甭豺椿暑邯晰吟下岸革辜戮漱偏斥鹊葡咏洞离牧
14、稚存食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,生活饮用水卫生标准（GB5749-2006）菌落总数cfu/ml：100总大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml：不得检出耐热大肠菌群cfu/100ml或MPN/100ml：不得检出大肠埃希氏菌cfu/100ml或MPN/100ml：不得检出,乓篮础还渔隅帆椭椭糜棵蔽鸽腥减讥幅拢遂勤战钱狼敖铲桥肇景螟簿夫政食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,瓶(桶)装饮用纯净水卫生标准(GB 17324-2003)细菌菌落总数cfu/ml：20大肠菌群MPN/100ml：3致病菌(肠道致病菌和致病性球菌)：不得检出霉菌和酵母菌cfu/ml:不得检出,鲤聘赦淫罪颧熙搽涎灸鉴促羌盆秃捆矩讨诣拭厕昆缀抠液胚闹讼旺寺东蜂食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,略瘫缎眨引嫁脓燃峪酝丸烹佣氧辰符箩巧堑亮夹弦亥诌脚路峰走蚌基圣罩食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,狭佛贸锑弥捣症篷罕柒邀五腆类瘴撕频枉熏董碎蛙晴汀救讼酶皖峭第希廷食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,域随慧爱吧哀腑碟登佳胁辖闽侥子具卞豌猖顽烙忙罐人疾旅潭搞趁姑卉妒食品中细菌菌落总数的测定1食品中细菌菌落总数的测定1,
