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1、乙肝五项胶体金定性实验,滨医附院检验科,认识乙肝病毒,乙肝五项检测,HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb,认识乙肝五项,在认识乙肝五项前，先了解乙肝病毒感染的相关临床,急性肝炎？慢性肝炎？携带者？,乙肝五项及血清学诊断,HBsAg 已感染标志 不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱HBsAb 中和性抗体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标志。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视接种成功 若感染病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人体内也会产生HBeAg 病毒复制标志。持续阳性3个月以上则有慢性化倾向 HBeAb 病毒复制停止标志。病毒复制减少，传染性较弱HBcAb 曾感染或正感染者
2、都会出现的标志 HBcAb-IGM是新近感染或病毒复制标志 HBcAb-IgG是感染后就会产生的,两对半检查 判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查,两对半 评估病情严重程度价值不大 肝功能 衡量肝脏是否有肝细胞坏死或炎症存在的重要检查（转氨酶价值最高），治疗的重要参考指标。HBV DNA 判断如何治疗的参考依据，也可评估传染性。一般DNA越高，传染性越强（应同肝功能一起检查）,胶体金（colloidal gold）也称金溶胶（goldsol），是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。,胶体金,HBsAg,HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的
3、多克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的乙肝表面抗原和控制区(C)的相应抗体。,14,双抗体夹心法,G区：金标特异性抗体(兔型),C区：羊抗兔Ig,T区：特异性抗体,吸水纸,标本,阳性结果,测试时，血清/血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的待测物质，在测试区内（T）出现一条红色条带,则是阳性结果。如标本中不含有相应的待测物质，则测试区内（T）将没有红色条带，则是阴性结果。无论相应的待测物质是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的红色条带是判定是否
4、有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。,HBeAb,HBcAb检测试纸条采用竞争抑制法，试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的单克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。测试时，血清/血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(T)的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体，预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)的单克隆抗体全部结合。强阳性标本，测试区内（T）将没有红色条带，弱阳性标本，测试区内（T）将有一条非常弱的红色条带，阴性标本，测试区内（T）将会出现明显的红色条带。,17,竞
5、争法,标本,G区：金标特异性抗体(兔型),C区：羊抗兔Ig,T区：标准抗原,吸水纸,阳性结果,18,标本,G区：金标特异性抗体(兔型),C区：羊抗兔Ig,T区：标准抗原,吸水纸,阴性结果,无论相应的抗体是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内（C）。质控区内（C）所显现的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。,标本收集：标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。检测时应尽量使用新鲜的标本。标本若不能及时送检，可在2-8冷藏3天。长期保存需冷冻于-20，忌反复冻融。,操作步骤：在进行测试前必须先完整阅读使用说明书，使用前将试剂板和血样标本恢复至
6、室温（20-30）。1.从原包装铝箔袋中取出试剂板，在小时内应尽快地使用。2.用吸管吸取血清/血浆标本，逐滴（每孔2-3滴）加入试剂板的五个加样孔中。3.等待红色条带的出现，测试结果应在15分钟时读取。20分钟后判定无效。,检验结果判定：阳性（+）：两条红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性（-）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（C）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批
7、号产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（T）内的红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。,强阳性（+）：仅质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内无红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测抗体。弱阳性（+）：质控区（C）出现一条红色条带，在测试区（T）内有非常弱的红色条带出现。弱阳性结果表明：标本中含有少量待测抗体。阴性（-）：两条红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阴性结果表明：标本中检测不出待测抗体。无效：质控区（C）未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。,谢 谢！,
