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1、精品论文大集合虎杖提取物中总黄酮的含量测定王敏，万丽，王凌，叶娉，董芳，吕芳 成都中医药大学，成都（610075） Email:wangmin8782摘要：目的：建立虎杖提取物中总黄酮的含量测定方法。方法：以芦丁为对照品，采用紫外-可见分光光度法，在 500nm 波长处测定总黄酮的含量。结果：芦丁浓度在 11.6870.08g/ml 范围内,与吸光度线性关系良好，相关系数为 0.9997，平均回收率为 99.38%， RSD=1.43%(n=9)。结论：该法操作简便、准确，可作为虎杖提取物中总黄酮的含量测定。 关键词：虎杖提取物；总黄酮；含量测定虎杖为蓼科植物虎杖 Polygonum cusp
2、idatum Sieb.et Zucc. 的干燥根茎及根。具有祛风利 湿，散瘀定痛，止咳化痰的功效。用于关节痹痛、湿热黄疸、跌扑损伤等证1。主要分布于 华东、中南、西南及河北、陕西、甘肃等地2。虎杖中含有的黄酮类物质有抗菌、利尿作用 等作用3。对虎杖提取物中总黄酮的含量测定，未见有文献报道。本研究建立了虎杖提取物 中总黄酮的含量测定方法，并测定了其所含总黄酮的含量，为虎杖提取物的质量控制提供一 定的参考。1 仪器与试药1.1 仪器UV1100 型紫外-可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；BUG25-12 型超声波 清洗机（北京医疗设备二厂）；satorius BP211S 型电子分析天
3、平（1/万，1/10 万）（赛多利斯 公司）。1.2试药芦丁对照品（供含量测定用 批号：080-9303，中国药品生物制品检定所）；虎杖提取物（自制）；试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 对照品溶液的制备精密称取在 120干燥至恒重的芦丁对照品适量，加 70%乙醇制成每 1ml 含 0.292mg 的 溶液，即得。2.2 供试品溶液的制备取虎杖提取物约 0.1g，精密称定，置 50mL 量瓶中，加 70%乙醇适量，超声处理 30 分 钟，放冷，用 70%乙醇定容至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液。2.3 测定波长的选择精密量取对照品溶液和供试品溶液各适量，分别置 25mL 量瓶中，对照品溶
4、液以相应试 剂为空白，供试品溶液以相应试样为空白，在波长 400600nm 内进行光谱扫描，结果对照 品溶液和供试品溶液在 500nm 处均有最大吸收，故选择测定波长为 500nm。见图 1、图 2。- 4 -图 1 芦丁显色后光谱图图 2 样品显色后光谱图2.4 线性关系的考察精密量取对照品溶液 1mL，2mL，3mL，4mL，5mL，6mL 分别置于 25mL 量瓶中，各 加水至 6mL，加 5%亚硝酸钠溶液 1mL，摇匀，放置 6 分钟，加 10%硝酸铝溶液 1mL，摇 匀，放置 6 分钟，加氢氧化钠试液 10mL,再加水至刻度，摇匀，放置 15 分钟，以相应试剂 为空白，在 500nm
5、 的波长处测定吸光度，以吸光度(A)为纵坐标，对照品的浓度（C）为横 坐标，得回归方程：A = 0.0118C- 0.0059(r=0.9997)。结果表明，芦丁的浓度在 11.6870.08g/ml 范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.5 精密度试验精密吸取对照品溶液 3ml，按线性关系的考察项下的方法，自“各加水至 6ml”起，依法 测定，连续测定 6 次。结果表明，吸光度平均值为 0.414，RSD=0.36%，仪器的精密度良好。2.6 稳定性试验精密吸取供试品溶液 2ml，以精密量取供试品溶液 2ml 至 25ml 容量瓶中，加水至刻度， 摇匀，作为空白溶液；另精密吸取对照品溶液 3m
6、l，以相应的试剂为空白，分别在 0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0h 测定吸光度。结果，供试品溶液和对照品溶液吸光度平均值分别 为 0.541 和 0.415，RSD 分别为 0.46%和 0.75%，表明对照品溶液和供试品溶液在 3h 稳定性 良好。2.7 重复性试验精密称取同批虎杖提取物约0.1g，平行取6份，按供试品溶液的制备方法制备，测定。 结果总黄酮的平均含量为28.68%，RSD为1.00%，表明该方法的重复性良好。2.8 回收率试验取同批虎杖提取物约 50mg，精密称定，共 9 份，分别加入不同体积的芦丁对照品溶液， 按供试品溶液的制备方法制备，测定。结果表明，本
7、方法平均回收率为 99.38%，RSD=1.43%， 可靠性良好。见表 1。表 1加样回收率结果样品取样量（mg）样品中芦丁含有 量（mg）芦丁对照品加 入量（mg）测得总量（mg）回收率（）平均回收率（）RSD（%）50.2414.4111.4025.5998.0751.3114.7211.4026.34101.9348.9814.0511.4025.4499.9149.5614.2114.2528.1297.6152.0314.9214.2529.1699.9399.381.4351.4514.7614.2529.13100.8450.8714.5917.1031.6799.8849.86
8、14.3017.1031.1998.7748.6213.9417.1030.6197.492.9 样品测定取虎杖提取物约0.1g，按供试品溶液的制备方法制备，依法测定。结果见表2。表 2 虎杖中总黄酮的含量（n=3）批次总黄酮含量（%)均值（%）127.94228.52328.2228.233 讨论（1）实验所用虎杖提取物为自制，具体制备方法为：加8倍量70%乙醇回流提取2次，每次3 小时，合并提取液，滤过，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.351.40（80）的稠膏，减压 干燥，粉碎成细粉，即得。（2）本实验对样品制备方法中，样品脱脂与否进行了考查，结果表明，样品脱脂与不脱脂 处理对样品测定无明
9、显差异，故本实验中供试品制备选择加 70%乙醇超声处理。参考文献1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)M.北京:化学工业出版社,2005:22. 2中华本草编委会.中华本草M.第 4 册.上海:上海科学技术出版社,1999:1298.3 陈怡,杭太俊,许欣欣.不同产地虎杖中总黄酮含量的比较.江苏药学与临床研究.2006,14(6):399-401.Determination of the content of flavones in Polygonum cuspidatum extractantWang min,Wan li,Wang ling,Ye ping, Don
10、g fang,Lv fangChengdu University of Traditional Chinese Medicine, chengdu,SiChuan (610075)AbstractObject: To establish a determination method of flavones for Polygonum cuspidatum extractant.Methods:Rutin was reference substance and the concentration of flavones was determined by UV-VISspectroscopy a
11、t the wavelength of 500nm.Results:The linear range of calibration curve was 11.6870.08 g/ml for the rutin(r=0.9997),the average recovery was 99.38% and the RSD was1.43%(n=9).Conclusion:The method is simple and accurate,and can be used for the content of flavones of Polygonum cuspidatum extractant.Keywords: Polygonum cuspidatum extractant;Flavones;Content determination作者简介：王敏，男，1983年生，成都中医药大学在读硕士，主要研究方向:中药药效物质 基础与质量标准的研究。
