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1、课题1 菊花的组织培养,右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：（1）步骤是，最常用的方法是。（2）步骤一般常用的化学试剂是，目的是。(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是，其中步骤相当于，步骤相当于。（4）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是。,去掉细胞壁，分离原生质体,酶解法,聚乙二醇（PEG）,诱导植物原生质体融合,植物组织培养,脱分化,再分化,远缘杂交亲本的遗传特征,杂种植株获得双亲的遗传物质,（5）若远源杂交亲本A和B都是二倍体，则杂种植株为倍体。（6）从理论上讲，杂种植株的育性。若运用传统有性杂交方法能否实现？
2、。并说明现由。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于。（7）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？。,四,可育,不能,因为不同种生物之间存在生殖隔离,克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围,不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中，才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖,学习目标熟悉植物组织培养的基本过程。理解细胞分化概念及脱分化，再分化。课题重点与难点课题重点：植物组织培养的基本过程。课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。细胞分化，脱分化，再分化。,活动1：,什么是细胞分化
3、？细胞分化的原因和结果？愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？脱分化、再分化？组织培养的过程？以及组织培养的理论基础？,一、细胞的分化与全能性,细胞分化：,个体发育中，细胞在形态、结构和 生理功能上出现稳定性差异的过程。,特定时空下基因的选择性表达。,形成各种组织器官。,结果：,原因：,定义：,脱分化（去分化）再分化愈伤组织,愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。,2.植物组织培养的理论基础：,细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。,细胞全能性表达条件：离体 一定的营养物质、激
4、素和其他外界条件,二、植物组织培养的基本过程,活动2：,影响组织培养的因素？菊花组织培养应注意的问题？,三、影响植物组织培养的因素：,不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同,大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等,1、外植体的选取,2、培养基的配制(MS培养基),3、不同植物激素浓度，使用顺序和使用量,4、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：,5、pH、温度、光照菊花：pH=5.8 温度控制在1822 每日光照12h,活动3
5、：用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来?（提示：怎样配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题?）,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,培 养,栽 培,四、实验操作,移 栽,冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,实验操作,（一）制备MS固体培养基,1、配置各种母液,2、配置培养基,定容,调PH,培养基的分装,3、灭菌,分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌,1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝,（二）外植体消毒,2、消毒：,流水冲洗酒精无菌水冲洗氯化汞无菌水冲洗至少三次之上,（三）接种,用70的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台
6、并用紫外线照射20分钟,1、接种室消毒,2、无菌操作要求,操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。,3、材料的切取和接种,4、接种注意事项,每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种,外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜34块，菊的茎或叶68块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件,插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分,（四）培养,无菌箱中培养，定期消毒，保持适宜的温度，光照,（五）移栽,1、打开封口膜,
7、2、清洗转移至消过毒的蛭石或珍珠岩中,幼苗长壮后，移栽到土壤中,（六）栽培,思 考,？,在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,总结植物组织培养过程:,离体组织或细胞,植物体,细胞分裂素生长素,愈伤组织,芽,根,细胞分裂素生长素,细胞分裂素生长素,植物细胞培养,不需要光,需要光,本课题内容小结,菊花组织培养,基础知识,实验操作,植物体的组织培养,影响组织培养的因素,细胞分化细胞全能性组织培养过程,营养激素环境条件,MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培,
