体外受精和早期胚胎培养最终.ppt

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1、体外受精和早期胚胎培养,试管婴儿,1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯布朗”在英国诞生,现已成为母亲。,转基因试管牛,我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生,1988年3月10日我国首例试管婴儿,试管动物技术,是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。,快速繁殖动物优良品种,目的:,技术手段:,体外受精和早期胚胎培养,一、体外受精,1.卵母细胞的采集和培养,2.精子的采集和获能,3.受精,二、早期胚胎培养,1.卵母细胞的采集和培养,用促性腺激素注射处理后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精

2、。,如:小鼠、兔、猪、羊等,方法一:,超数排卵法,1.卵母细胞的采集和培养,方法二:,从屠宰的母畜卵巢中直接采集卵母细胞。,适用于大家畜和大动物,如牛,牛卵巢中采卵,牛卵巢,方法三:,借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。,适用于大家畜和大动物,如牛,B超活采仪,方法二和三采集的卵母细胞需经体外人工培养成熟,2.精子的收集和获能,1)收集的方法:假阴道法、手握法和电刺激等2)获能处理:培养法:把精子放入获能液中。(适用对象:啮齿动物、家兔和猪)化学法:把精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,化学药物诱导。(适用对象:牛、羊),3.受精,在获能溶

3、液或专用的受精溶液中完成受精过程,离心的目的是什么?,卵母细胞的培养的目的是什么?,保存剩余的卵子和精子的方法是什么?,活体采集的牛卵母细胞,卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱,卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱,三、胚胎的早期培养,1.受精卵的发育培养:,检查受精状况和受精卵的发育能力。,2.培养液的成分:,无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等,3.适时移植:,向受体移植或冷冻保存。,无机盐、有机盐,氨基酸、核苷酸,维生素、激素,糖、氨基酸,血清、血浆,促生长因子,血清,无机盐、微量元素,不同动物胚胎移植时间不同牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段试管婴儿:8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。,成熟卵子,人工体外受精,雌、雄原核融合,体内移植,试管牛,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,有性生殖 无性生殖,核移植技术、胚胎移植,遵循,体外受精胚胎移植,比较试管动物和克隆动物,来自2个个体 主要来自核供体,

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