利用免疫学进行防治和诊断方法.ppt

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1、第九章 免疫学应用,第一节 免疫学防治,一、免疫学预防,二、免疫学治疗,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,二、体内免疫学检测,第一节 免疫学防治,一、免疫学预防,(一)人工自动免疫:是给机体输入疫苗或类毒素等抗 原物质,剌激机体产生特异性免疫力。,1、死疫苗:用物理或化学的方法将病原微生物杀死制备而成 的制剂。又称灭活疫苗。2、活疫苗:用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的 活的病原微生物制成的制剂。又称减毒活疫苗。3、类毒素:用0.3-0.4%甲醛处理外毒素,使其失去毒性,保 留抗原性的物质。4、新型疫苗:亚单位疫苗、合成疫苗、基因工程疫苗,第一节 免疫学防治,死疫苗和活疫苗的比较

2、,第一节 免疫学防治,一、免疫学预防,(二)人工自动免疫的注意事项,1、接种对象:免疫力差、流行地区的易感者等;2、接种剂量、次数和间隔时间:死疫苗2-3次,间隔7-10天;活疫苗1次;类毒素2次,间隔4-6周。3、接种途径:死疫苗多皮下注射、活疫苗多皮内注射、皮上 划痕或以自然感染途径接种。4、接种后反应:接种24小时左右局部出现红肿、疼痛、淋巴 结肿大;短暂发热、头痛、恶心等,一般症 状轻微,数天恢复正常。5、禁忌症:高热、严重心、肝、肾疾病、传染病、恶性肿 瘤、孕妇等。,第一节 免疫学防治,我国推行的儿童基础免疫程序,第一节 免疫学防治,二、免疫学治疗,(一)人工被动免疫:是给机体输入抗

3、体,使机体获得特异性免疫力。可立即获得,但免疫维持时间短,2-3周,多用于治疗或紧急预防。,1、抗毒素:是抗细菌外毒素的抗体。多为马血清制剂,具有抗体性和免疫原性。2、人丙种球蛋白:从正常人血浆或健康产妇胎盘中提取制成。3、人特异性免疫球蛋白:来源于恢复期病人及含高价特异性抗体供血者血浆,或接受类毒素和疫苗免疫者的血浆。,第一节 免疫学防治,人工自动免疫和人工被动免疫的特点,第一节 免疫学防治,二、免疫学治疗,(二)免疫增强剂(IPA):是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。主要用于恶性肿瘤、免疫缺陷病和传染病的辅助治疗。,免疫增强剂分类,第一节 免疫学防治,(三)过继免疫:是将供

4、者的淋巴细胞或淋巴因子转移给受 者,以增强其细胞免疫功能。(四)免疫抑制剂:是一类抑制机体免疫功能的生物或非生 物制剂。,常见免疫抑制剂种类,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,(一)体液免疫检测(血清学反应),1、抗原抗体反应的特点:,特异性,可逆性,比例性,阶段性,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,1、抗原抗体反应的特点:,抗体过剩,比例适当,抗原过剩,抗原抗体的比例与其形成免疫复合物大小的关系,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,2、常见的体液免疫检测法:,(1)凝集反应:,间接凝集和间接凝集抑制试验,第二节 免疫学诊断,(2)沉淀反应:,单向琼脂扩散试验,第二节 免疫学诊

5、断,(2)沉淀反应:,双向琼脂扩散试验,第二节 免疫学诊断,(2)沉淀反应:,对流免疫电泳,-,+,第二节 免疫学诊断,(3)补体结合反应:,补体结合反应,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,3、免疫标记技术:,免疫荧光技术,免疫荧光直接法,免疫荧光间接法,第二节 免疫学诊断,3、免疫标记技术:免疫酶技术,1、包被抗体 洗,2、加抗原 洗,3、加酶标抗体 洗,4、加底物显色,1、包被抗原 洗,2、加抗体 洗,3、加酶标抗 球蛋白 洗,4、加底物显色,ELISA双抗体夹心法,ELISA间接法,第二节 免疫学诊断,3、免疫标记技术:放射免疫测定法(RIA),放射免疫测定法(RIA)是将放射性核

6、素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫标记技术。,3、免疫标记技术:金免疫技术,金免疫技术是一处以胶体金作为标记物的免疫标记技术。是目前应用广泛、简便、快速的检验方法。,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,(二)细胞免疫检测T细胞总数测定,(1)E花环试验:正常情况下,外周血淋巴细胞中能形成花环的细胞(即T细胞)约70%-80%。,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,(二)细胞免疫检测T细胞总数测定,(2)荧光抗体染色 从外周血分离单个核细胞(PBM)后,用鼠抗人CD3的单克隆抗作第一抗体与PBM结合,再用荧

7、光素(FITC)标记的兔抗鼠IgG抗体作第二抗体进行间接荧光染色。,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,(二)细胞免疫检测T细胞亚群测定,用间接荧光法检测CD4和CD8 T细胞CD4/CD8正常比值为左右。,第二节 免疫学诊断,一、体外免疫学检测,(二)细胞免疫检测淋巴细胞转化试验,第二节 免疫学诊断,二、体内免疫学检测,(一)体液免疫检测,1、I型超敏反应皮肤试验 用常见变应原作皮内注射或划痕后,在20分钟内引起红斑及丘疹。如超过1cm或无红肿但注射处有痒感,或全身有不适反应者均为阳性,反之为阴性。2、中和反应皮肤试验 将微量外毒素注射于受试者前臂屈侧皮内,24-48小时局部出现皮肤红肿者为阳性反应,表示无免疫力。阴性反应为有免疫力。,第二节 免疫学诊断,二、体内免疫学检测,(二)细胞免疫检测,以特异性抗原或有丝分裂原注入皮内,剌激体内致敏T细胞分化增殖,释放淋巴因子,引起局部皮肤的IV型超敏反应。1、特异性抗原皮肤试验:在受试者前臂内侧皮内注入少量可溶性抗原,24-48小时后,观察局部皮肤红肿硬结的大小。大于1cm即为阳性,表示有细胞免疫力。2、植物血凝素(PHA)皮试:将PHA注射于受试者前臂屈侧皮内,6-12小时后局部出现红斑硬结,24-48小时达高峰,即为阳性反应,常用于检测细胞免疫水平。,

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