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1、实验五 中毒性肾病,实验目的,复制家兔升汞中毒性肾功能不全功能模型。并观察升汞中毒家兔的一般状态（症状），尿的变化，及肾脏大体形态改变。,实验原理,氯化汞(HgCL2)主要有肾脏排泄并选择性地使近区小管变性坏死，从而形成急性肾功能不全。本实验用氯化汞造成家兔的中毒性肾病，通过观察动物尿质、尿量及肾脏形态学变化，测定酚红排泄率的异常改变，了解急性肾功能衰竭少尿期的主要症状及发生机理。,实验动物及试材,家兔，体重2.5kg以上。兔实验台，手术器械一套，木试管夹，试管，滴管，酒精灯，输尿管塑料插管，载玻片，纱布，棉球，比色标准管1套，烧杯。1%HgCL2，1%普鲁卡因，生理盐水，5%醋酸。,实验方法
2、与步骤,模型复制手术操作-收集尿液肾脏功能检查 酚红排泄试验 尿液检查:蛋白、细胞、管型 肾脏形态,试验结果,思考题,结合实验，讨论蛋白尿，管型尿的发生机制。,模型复制,实验前2d，取健康雄性兔2只，称重后一只皮下注射1%HgCL2，（按1.51.7mL/kg，一次注射），造成急性肾功能不全；另一只则在相同部位注射等量生理盐水作为对照备用，于实验前12h禁食。,手术操作,实验时将两兔称重后仰卧位固定于兔实验台上，下腹部剪毛，局麻.在耻骨联合上1.5cm处正中切开长约4cm，暴露膀胱，并将膀胱翻向体外，在膀胱底部找到并分离两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处用线结扎。,手术操作,待输尿管充盈后，用眼科
3、剪剪一小口，向肾盂方向插入一细塑料管，结扎固定，以便收集尿液。自耳缘静脉缓慢注入生理盐水30mL，以保证有足够的尿量。,酚红排泄试验,待两侧插管滴尿无出血时，从家兔耳缘静脉准确快速注入酚红溶液(0.6%)1mL，同时计时。记录酚红最早排除时间（即滴入瓶内的尿液变红的时间）。记录60 min尿量。测定和计算:将收集的全部尿倒入500mL量筒内，加入水至500mL处，搅拌均匀，从中吸取10mL尿液置于试管中，与标准管比色，算出1h内酚红排出量。,尿蛋白测定检查,取正常及中毒家兔尿液各3mL分别放入试管中，以试管夹夹试管在酒精灯上加热至沸腾（切勿使尿液溢出）。加入5%醋酸35滴，再煮沸。若尿变清，是尿酸盐所致；若变浊，则表示尿中含有蛋白，以浊度程度不同判断尿蛋白含量标准如下：,蛋白浊度判断标准,尿液镜检,取12滴的尿液涂片,先高倍后低倍观察。计算10个不同高倍视野细胞的近似平均数，低倍视野观察管型并计算。,形态学观察,将对照及中毒家兔一并杀死，解剖取出肾脏，观察并比较二者的肉眼变化如体积，皮质条纹，色泽等。,不同稀释倍数酚红(0.6%)对应的吸光度,思考题,结合试验结果，讨论尿蛋白和管型发生的机制。,
