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1、背景资料,显微镜的发明和发展:伽利略自己制造出了望远镜，也着手设计显微镜。并对小动物的感觉器官进行了观察。真正用显微镜发现有机体内部世界的是马尔比基、列文虎克、胡克和斯旺麦丹。1660年，马尔比基用显微镜发现了毛细血管，观察了许多动物呼吸系统，还发展了胚胎学研究。1675年，列文虎克用自制的只有一个透镜的显微镜观察到了原生动物。他还最早发现了红血球的存在。1683年，他还发现了细菌。1665年，物理学家胡克用自己制造了复式的显微镜，观察软木塞薄片，将软木上的那些小孔称为“细胞”。电子显微镜是利用高速运动的电子束代替光波的一种显微镜。大大提高了显微镜的分辨本领，能观察物质极为微细的结构形态。,显
2、微镜技术,光学显微镜：-普通光学显微镜：分辨力0.2m，必须染色-相差显微镜：利用细胞内非均一性造成的光相位差，将其转变为亮度差，可观察活细胞结构及其内部运动-荧光显微镜：利用细胞内不同物质对紫外线产生不同颜色荧光的现象，可利用荧光染料-暗视野显微镜：利用侧向斜射光线，使之在物体上散射进入物镜，可提高显微镜的分辨力达到0.20.04 m-偏光显微镜：利用偏振光对一定方向的物体照明，可观察丝状标本的细微结构和鉴别细胞中化学成分,显微镜技术（2）,电子显微镜扫描电子显微镜：电子枪产生的电子在电磁透镜中汇聚成电子束，由扫描线圈控制扫描样品表面，分辨力610nm，立体感强，样品可移动，便于多向观察透射
3、电子显微镜：分辨力0.20.25nm（见P11图）超高压电子显微镜：电子束电压500V，穿透力强，分辨力高可观察较厚样品扫描隧道电子显微镜：利用真空隧道中的量子现象，显示物体表面的原子结构,了解显微镜 的基本结构,1,10,11,4,2,3,7,6,9,8,5,目镜,物镜,镜筒,镜臂,镜座,载物台,压片夹,反光镜,遮光器,粗准焦螺旋,细准焦螺旋,转换器,12,安装 装配适当的物镜和目镜。低倍镜的使用 必须先用低倍镜，视野大，容易发现目标和确定观察部位。(1)检查 有无损坏。(2)准备 前方略偏左侧。将载物台下降。再旋转物镜转换器，将低倍镜对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声)。(3)对光
4、打开光圈，上升聚光器；用内置光源时，使用光亮调节器调光。(4)放标本片 标本片的盖片朝上，观察部分对准光孔的正中央。(5)调节焦距 侧面注视物镜镜头，粗调节钮，镜台上升，低倍镜头与玻片间的距离约5mm，从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调节钮，镜台缓缓下降，视野中出现物像。细调节钮至物像清晰。(6)计算倍数,显微镜的安装和使用,高倍镜的用法,(1)低倍镜找到清晰物像。(2)将需要观察的部分移到视野的中央。(3)眼睛从侧面注视物镜，用手移动转换器，换高倍镜。(4)眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调节钮，直至视野内看到清晰的物像为止。,油镜的使用方法,(1)先用低倍物镜观察标本的概况。(2)更换
5、高倍物镜，视野中央。(3)镜台缓缓下降约1.5 cm，再把油镜转到工作位置。(4)在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油，细心拧动粗调螺旋，使镜台上升。从侧面观察物镜前端与标本的距离，油滴接触，慢慢提升镜台，至物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心，防止油镜压碎标本或损坏油镜(油镜的工作距离约0.2 mm)。(5)眼睛从目镜中观察，拧动细调螺旋，使镜台慢慢下降到能看清标本。这步操作要特别注意不要把细调螺旋的方向拧错，以防压碎标本。(6)观察完毕后，下降镜台约1 cm，把油镜转离光轴，及时清洁。擦镜纸擦12次，去油，二甲苯滴湿的擦镜纸擦2次，擦镜纸擦1次。顺镜头直径方向，不圆周擦。
6、(7)复原 聚光器下降约1 cm。把物镜转离光轴。下降载物台，载物台上标本移动器移到适当位置，关闭内置光源。,是低倍镜还是高倍镜的视野大、视野明亮？为什么？低倍镜的视野大，通过的光多，教亮，放大的倍数小；高倍镜的视野小，通过的光少，较暗，放大的倍数大。为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？不行。用高倍镜观察，只需微调即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。如何判断细胞和
7、气泡？,(一)显微镜的使用1.观察前的准备工作(1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯，观察时要双 眼同时睁开，一边观察一边进行记录或描绘。(2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备好。(3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否完整 和正常，并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透 镜进行必要的清洁工作。然后进行合轴调节。,瞳 距 调 节,2.显微镜的调节,屈 光 度 调 节,粗 调 松 紧 调 节 旋 钮,聚 光 镜 中 心 调 节,孔径光栏调节,N.A聚=(0.6-0.8)N.A物,操作步骤如下:(1）可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水平是固定的，则装配时已保证它与聚
8、光镜合轴，不必调整;如果可变光栏的水平位置可以移动，则应把可变光栏关到最小，使它的中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。(2)载物台上放置观察标本，把聚光器上升到它上端透镜平面稍低于载物台平面的高度，并将它的可变光栏开到最大，用低倍物镜，进行调焦到能看见标本，可调反射镜使视野得到最亮和最均匀 的照明，或把光栏关小，最亮的照明区正处在视野的中央。(3)转到高倍镜，并调焦到看清标本，然后去掉标本，拔出目镜，眼睛直接向镜筒观察，并把可变 光栏关小，看其亮点是否在视野中心，如果不是，就要转动聚光器的调节螺旋，把亮点调到视野中 央，再慢慢开启可变光栏，使视野看到光栏边缘和聚光镜的边缘相接为止。,3.观察操作：
9、(1)低、高倍镜的使用:先把低倍的物镜用粗调焦螺旋下降至离盖玻片0.5cm处，然后一边观察视野一边上升物镜，直至看到图像，再将标本移到视野中心，用细调焦螺旋把物镜调至最清晰处，若要用高倍镜观察时，把所要进一步放大观察的部位移至视野中央，直接顺时针转换成高倍物镜，然后用细调焦螺旋调焦，至看清物像。,其他常用的探究器具,观察器具:放大镜等,其他常用的探究器具,解剖工具:解剖盘 解剖剪 镊 子 刀 片,其他常用的探究器具,计量器具:量筒 天平,其他常用的探究器具,加热器具:酒精灯 三脚架 石棉网,其他常用的探究器具,通用器具:烧杯 试管 试剂瓶 培养皿 研钵 滴管 药匙,使用常用探究器具注意事项,1
10、、要注意安全,不要用手触摸刀口，也不要碰到他人；2、不要用手直接接触被称量的物体；3、加热时，不要离开加热装置，加热结束后要及时、正确地切断热源，不要用手直接接触被加热的玻璃器具。；4、实验结束后，要及时作清理工作。,临时装片的制作,玻片标本,按保存时间长短临时玻片标本永久玻片标本,按取材方式切片涂片装片,制作临时装片时，取了材料再滴清水，还是滴了清水再取材料先滴清水再取材料在观察前，要先对光，需要转动物镜对准通光孔。用于对光的物镜应该是低倍物镜还是高倍物镜？低倍物镜对光再放玻片标本，还是放了玻片标本再对光？先对光，再放标本看到细胞的物象在视野左上角，在转高倍之前，要把这个物象移到视野的中央，该向哪个方向移动？向左上方移动,
