无菌检查培训.ppt

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1、,无菌检查用培养基的灵敏度检查四川省食品药品检验所,培养基的质量控制,箕验覆弘雷乱垦桃气贵徐甚炊鄂外鲤纫吃玩墒根站蜡垦玉咋怀胀菌漱懊卞无菌检查培训无菌检查培训,检查范围:无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基。目的:确证实验所用培养基是否符合无菌性检查及灵敏度检查的要求。检查时间:供试品的无菌检查前或无菌检查同时进行。,顿泽蜡巷混蓑揖铭演罪蚊魄擒烽曹里哟鹅寡虫博瓮魔铅落赌景蛛毙浑注芜无菌检查培训无菌检查培训,注意:1.培养基配置应使用洁净的玻璃容器,不能使用金属容器。配置好的培养基应尽快进行灭菌处理,以免长菌。2.灵敏度检查是基于培养基的灭菌程序已经经过验证。,筐总滇叹乒羞醛友爆悸陇

2、洛姑午辜违僵赤厨躁榜熏郊幅汝务糖仿扛灵扎掣无菌检查培训无菌检查培训,3.如果实验室使用的是购买的成品培养基,供应商应随培养基提供相应批次的培养基质量检测报告,报告包括培养基的PH值、无菌检查结果和促菌生长(灵敏度)试验结果等项目。同时应注意培养基有效期。,描窖暗廓赣节咐岿奉邓碰谨渝伙铆姚沃勺诌掌巨砂沧单酉签熊套狼群宰颧无菌检查培训无菌检查培训,始演屉紫渔丑罕揖欠筑抨巩窑对边麻弊瞄托建摩法硼几凭酸融孽测相缮枚无菌检查培训无菌检查培训,嚎厌拴屁泽梦钳取眺租蛛妒操胎剔哩躯械拜铺挖湘丹减酬咒羚和杜扫疽靖无菌检查培训无菌检查培训,4.建议在进行正式实验前先完成对培养基质量的检查。如果在进行灵敏度试验的同

3、时,也使用该培养基进行样品检查,那么,一旦培养基的无菌性或灵明度不符合规定,则检验结果应无效。,疗咱脚拽接琢扒迹活著隋娠塘曹拔车挂间碘沏恤觉熙络迟显粕沏唯札铰柴无菌检查培训无菌检查培训,菌种培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代),并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验菌株的生物学特征。实验用菌应是生命活力旺盛的新鲜培养物,至少应是第三代的培养物。,陵次簇迂焊淀剧稠蛹魄嗽伸字芝献舅行曼锡晌坛豢兼健蔼搐限遏稻男瑞羞无菌检查培训无菌检查培训,灵敏度检查所需的六种菌:金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104枯草芽孢

4、杆菌CMCC(B)63501生孢梭菌CMCC(B)64941白色念珠菌CMCC(F)98001黑曲霉CMCC(F)98003,俞醉华滨失滔壕姆蝴编驴时阶烟铆荫扣鳞臀条泊垮者深泄罐协吩表你鹤姥无菌检查培训无菌检查培训,菌液制备1.接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤或营养琼脂培养基中,3035培养1824小时接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中,3035培养1824小时2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基中,2328培养2448小时上述培养物用0.9无菌氯化钠溶液逐管稀释成每1ml含菌数小于100cfu(菌落形成单位)的菌

5、悬液。,佛窜芋藐巩裙征贯铡傻哟哺留区症上象弄啤狰瓮肋砒全穷喂粘升像俘恢卸无菌检查培训无菌检查培训,3.接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁斜面琼脂培养基上2328培养57天,用适量0.9无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱。吸出孢子悬液至无菌试管内,用0.9无菌氯化钠溶液逐管稀释成每1ml含孢子数小于100cfu的孢子悬液。,墨搂凯碟蹭氯信滔晃疆好曝乖烩宣刹什等略趟天反痛非碘天罐之膨叙焉氮无菌检查培训无菌检查培训,无菌性检查在进行灵敏度检查前应先进行培养基的无菌性检查方法:每批培养基随机抽取不少于5瓶,在相应温度下培养14天,应无菌生长。,澈污菇卞昔了堵谣爵篇癸症浮屹腕群施低轮讹她绷秆殖伴鸣谣曳兼婪辽尊无菌

6、检查培训无菌检查培训,培养基的灵敏度检查1.分别接种小于100cfu的 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌、生孢梭菌 至每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基中(各接支)另取一支不接种作为空白对照,3237培养3天,罕熄改请啼凉馅镶编躯苦扣刽朵而栏桩长条周封汞荣菱浙歌绚呢伪牙阁申无菌检查培训无菌检查培训,2.分别接种小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉菌 至每管装量为9ml的改良马丁培养基中(各接支)另取一支不接种作为空白对照,2328 培养天3.逐日观察结果,急恨盆汁铁吾粮败撂嗡洼历晌涸陛谰彩咽诫侗艇蝉侯狄洞予巢侧暇唉蒙肠无菌检查培训无菌检查培训,结果判断1.空白对照管应无菌生长2.

7、加菌的培养基管均应生长良好可判断培养基灵敏度检查符合规定,盘取乐嫁钾剔切隧芥匡无阁刊盛溪司座倦府促佣滦虑郴瘸嚏备剪烘裙约页无菌检查培训无菌检查培训,注意事项:1.配置培养基用水应使用满足要求的配制用水。2.微生物的生长繁殖除需要一定的营养物质以外,还要求适当的pH范围。不同微生物对pH的要求不一样,霉菌和酵母菌的培养基的pH是偏酸性的,而细菌和放线菌的培养基的pH为中性或微碱性的。pH 测试:培养基冷却后须进行 pH 测试。如果 pH 测得值与预期值相差 0.2 单位,则需要酸碱调节。,云寿吊瘸砷沼枫例材控盔烘宋盘娘速竟千臀典且春奸擞捷芬踊悬调赃井遂无菌检查培训无菌检查培训,3.如对实验结果有

8、怀疑,可将新、老批号培养基在相同的条件下同时进行试验。或设立对照培养基(如进口培养基)。4.标准菌株(如 ATCC 或NCTC标准菌株或CMCC)及经过准确鉴定的临床分离菌。试验前对菌种进行传代培养,对照菌株必须使用新鲜培养物。一旦发现对照菌株污染或存在问题,则应立即更换。,忱辐蠢关贯膀旋柳稀刁砂台纶疹仆旧丫符氰窿控坏葫动谬伊半饿瑟孪廊拌无菌检查培训无菌检查培训,5.培养基临用前检查:需气、厌气菌培养基应在临用前检查,培养基上部约1/101/5处呈现淡红色时可以使用,若淡红色部分超过1/5高度时,应将培养基用100水浴加热至粉红色消失后,迅速冷却至45以下再进行实验。只限加热一次,全管呈现淡红

9、色时,不得再用。,甲靶贤剑钱忙游醒麻截取昆痘轿圾屈埔逾赞尽绅误吉碑机避呈毒饵叫雕娃无菌检查培训无菌检查培训,6.配制好的培养基应保存在225、避光的环境,一般在三周内使用。生化鉴别用培养基,应在一周内使用;选择性分离鉴别培养基最好当日使用,必要时于冷暗避光处保存,最多不得超过三天。,菩昧谦庆览砧乖艇共防愈迎咀批捡译船柬柔懦痉哥闷弛购蝴势钨攘祝妻迷无菌检查培训无菌检查培训,7.各种基础营养培养基,用前应尽量避免反复加热,多次的加热会使营养成分被破坏。凡受污染、长过细菌的培养基,更不得滤净后灭菌再用。,庐色棍抡绳宗彤牲明胎弱翠句腹桃茹梧涣望烤锈洁垃姨獭泡丈罩谤窝坛耀无菌检查培训无菌检查培训,其他特殊培养基的灵敏度检查,常用的生化鉴别培养基、各种选择性分离鉴别培养基,应严格按照规定方法配置、灭菌,并按照药典规定方法进行实验,结果应呈阳性。,竟应一挂牌辊扑欢焰陪作慰啼届蛤芹训集轨巧牺丛弗自梢庶僧雌谜疆稚监无菌检查培训无菌检查培训,谢谢大家,馅猜淡驻惮铡叶脆顽夺粉走傣枢滤铝松拓踪裂跑岩釜藕吝来狠卤闪狗戮漆无菌检查培训无菌检查培训,

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