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1、实验内容,球菌标本片观察 链球菌 脑膜炎双球菌抗“O”试验血浆凝固酶试验甘露醇发酵,目的要求,掌握球菌的基本形态。掌握抗“O”试验的原理、操作方法、结果判断。掌握血浆凝固酶试验的原理、操作方法、结果判断。,链球菌,脑膜炎双球菌,本试剂胶乳液是由溶血素O和羟化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。ASO胶乳的灵敏度调整到200IU/ml,超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒,产生清晰凝集,为阳性;无凝集,为阴性。方法:间接凝集结果:效价大于200单位意义:风湿热及其活动性的辅助诊断,抗“O”试验(ASO test),原理:,步骤:,抗“O”试验(ASO test),阴性对照(1滴)待检血清(1滴)+
2、胶乳试剂(1滴)胶乳试剂(1滴),-?,2min,2min,阳性对照+胶乳试剂 2min+,血浆凝固酶试验:凝固酶分类,游离凝固酶:为分泌到菌体外的类似凝血酶原样物质,被血浆中的协同因子激活而作用于纤维蛋白原使血浆凝固。(试管法测定)结合凝固酶:是一种结合于菌体胞壁的凝固酶,是一种纤维蛋白原受体,使细菌凝聚成团成块块。(玻片法测定),原理和意义 测定血浆凝固酶的有无是鉴定葡萄球菌致病性的重要依据。本实验采用玻片法检测结合血浆凝固酶。结合凝固酶是一种结合于菌体胞壁的凝固酶,是一种纤维蛋白原受体,与血浆中液态的纤维蛋白原结合,使细菌凝聚成团成块。,血浆凝固酶试验,步骤:,血浆 血浆,1,2,金葡(
3、1环)白葡(1环),+,凝集(+),不凝集(-),血浆凝集试验,生理盐水(各1环),+,无菌操作:,血浆凝集试验结果,甘露醇发酵,甘露醇发酵管成份:蛋白胨10g 氯化钠 5g 甘露醇10g 牛肉膏粉 5g 溴麝香草酚兰0.024g 最终pH7.40.2原理:蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;甘露醇检测细菌发酵糖类的特性;溴麝香草酚兰为pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈蓝色。方法:按无菌操作取菌接种到甘露醇发酵管内,置37培养24h,观察结果。结果:金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸,发酵管变成黄色。,实验报告,绘制两张标本片镜下图简述抗“O”试验原理及实验结果简述血浆凝固酶试验原理及实验结果,