老年痴呆动物模型.ppt

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1、老年痴呆动物模型,小组成员:*,老年痴呆症简介 所谓老年痴呆症,又称阿尔茨海默(Alzheimers disease,AD),是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病,指的是一种持续性高级神经功能活动障碍,即在没有意识障碍的状态下,记忆、思维、分析判断、视空间辨认、情绪等方面的障碍。疾病类型:1、血管性痴呆症,这类型的痴呆症多为血管病变所导致 2、脑神经细胞退化性的痴呆症,其特征性病理变化:为大脑皮层萎缩,并伴有-淀粉样蛋白(-amyloid,-AP)沉积,神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFT),大量记忆性神经元数目减少,以及老年斑(senileplaq

2、ue,SP)的形成。以下介绍老年痴呆小 鼠模型,建模目的:建立老年痴呆(AD)小鼠模型,用于AD及其治疗药物的研究。所需材料:NIH小鼠,蛋白定量(双缩脲法)测定试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定试剂盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定试剂盒、D2半乳糖(生化试剂)、亚硝酸钠(分析纯)建模方法:选用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖120mg 和亚硝酸钠90mg,每天1次,连续60d,制备老年痴呆动物模型。通过水迷宫试验,脑组织匀浆蛋白质含量、乙酰胆碱酯酶(AchE),和超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定,脑组织病理切片HE染色和刚果红染色,比较老年痴呆模型小鼠和正常小鼠的差异。建模步骤:1

3、、雌性NIH小鼠40只,2024g,每组20只,随机分为空白对照组和AD模型组。造模方法为:小鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亚硝酸钠90mg/kg,连续60d;空白对照组腹腔注射等体积生理盐水。,2、水迷宫试验:自动记录水迷宫装置为80cm50cm20cm的茶色有机玻璃槽(中国医科院药物所研制),内设起点、终点(台阶)和多处盲端,水深9cm,水温2427,记录小鼠从起始点放入至找到台阶的时间(寻找潜伏期),若超过120s则以120s计。给药完毕后第1天,各组小鼠进行训练,使其找到台阶;第24天加长路程,记录各组小鼠的寻找潜伏期。,3、脑内相关指标的测定:行为学试验结束后,每组取10

4、只 小鼠禁食12h,断头处死,取全脑(嗅脑除外),置玻璃匀浆器 中,加入预冷生理盐水制成10%(g/ml)脑匀浆,3000r/min离心10min,取上清液置冰浴中,测定蛋白含量和AchE、SOD活性,按试剂盒说明书所述步骤操作,取样量均为50ml4、病理检查:各组余下小鼠腹腔注射戊巴比妥钠60mg/kg麻醉,仰卧固定于手术台上,剪开胸腔,暴露心脏,用生理盐 水和4%多聚甲醛进行心脏灌注固定,至四肢僵直为止,取全脑和,颊部皮肤组织置4%多聚甲醛溶液中固定24h,石蜡包埋切片,常规HE染色和刚果红染色。(统计方法:数据以平均值标准差表示,使用SPSS810统计软件处理,用t检验进行统计学分析)预防措施:1、改善劳动环境 2、忌酒和戒烟 3、保持精神愉快利于长寿及精神健康 4、饮食调节:既要防止高脂食物引起胆固醇升高,又要摄取必要的营养物质 5、积极用脑,预防脑力衰退 6、避免过于深沉、消极、唉声叹气,要以开朗的心情生活,谢谢再见,祝大家笑口常开,

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