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1、实验二 显微镜介绍及操作训练,【实验目的】掌握显微镜的构造、使用方法及镜下绘图。【实验材料】普通光学显微镜、石蜡油、擦镜纸、组织切片标本、HB铅笔、红蓝两色铅笔、橡皮擦、直尺,【实验内容与方法】一、认识光学显微镜的结构,(一)物镜:镜头上标有4,10,40,100放大倍数。(二)目镜:常用10目镜。显微镜的放大倍数=目镜放大倍数物镜放大倍数。,(三)光源:分为自备光源和外部光源。(四)集光器(聚光器):聚集光线,增强视野的亮度。可调节光圈的大小。(五)镜座(六)镜臂,(七)载物台(八)物镜转换器(九)调焦装置:包括粗调和微调。,显微镜的类型,(一)光学显微镜普通光学显微镜倒置显微镜相差显微镜荧
2、光显微镜激光扫描共聚焦显微镜,显微镜的类型,倒置相差显微镜,荧光相差显微镜,荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,(二)电子显微镜透射电子显微镜内部结构扫描电子显微镜外部形态,透射电子显微镜,扫描电子显微镜,二、使用方法及注意事项(一)低倍镜与高倍镜的操作,1、正确的移动、放置显微镜,规范的观察姿势 2、开机 3、调光,4、肉眼观察切片5、放置切片6、调节瞳距7、低倍镜观察8、高倍镜观察9、更换切片10、关闭显微镜,(二)油镜的操作规程,1、再把油镜转到工作位置上。2、在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油(或石蜡油)。7、观察完后,下降载物台约1cm,先用干的擦镜纸擦12次,再用二甲苯滴湿的擦镜
3、纸擦两次,最后再用干擦镜纸擦一次。擦拭时要细心,动作要轻,不可用力擦。,实验三 血液涂片制作及瑞氏染色,【实验目的】掌握血涂片的制作方法及涂片标本瑞氏染色方法。【实验材料】器材:医用一次性采血针、无菌棉签、镊子、洁净的载玻片和推片、显微镜、碘伏、滤纸 试剂:瑞氏染液、蒸馏水,切片类型,涂片 血液涂片装片 植物装片切片 病理切片,【实验步骤】1、采血 先按摩取血部位,再用碘伏消毒左手无名指或中指的指腹,干后用采血针刺破指腹的皮肤。第一滴血用无菌干棉签擦去不用。,2、涂片 将第二滴血置于载玻片的一端,再取另一张边缘光滑的推片,斜置于血滴前方,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状。然后
4、将推片与载玻片保持3045角,平稳地向前匀速推进至载片的另一端,载片上便留下一层薄厚适宜的血膜。推进时速度要一致,否则血膜成波浪形,厚薄不匀。,血 涂 片制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄),一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明,涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号,李四,B 1 2 3,3、染色 待涂片在空气中完全干燥后,滴加35滴瑞氏染液盖满血膜为止,1min后按11或12滴加蒸馏水,与染液混匀。室温下染色10min左右。用蒸馏水冲去染液,再将血涂片用自来水温和冲洗,至血膜呈淡红色。自然干燥或用滤纸吸干后即可在显微镜下观察。,血 涂 片 染色,勿冲洗混匀静置10分钟,直接流水温和冲洗3-5分钟(切勿先倒掉染液),涂片经水洗干燥后用显微镜观察涂片,李四,涂片干燥后加瑞氏染色液3-5滴覆盖整个血膜1分钟,四、镜下观察血涂片,1、低倍镜观察,分清红细胞、白细胞。2、高倍镜:中性粒细胞:嗜酸性粒细胞:淋巴细胞:单核细胞:血小板:嗜碱性细胞:,中性杆状核粒细胞,嗜碱性粒细胞,单核细胞,