检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质.ppt

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1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,鉴定原理,本实验中,用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖存在与否,而不能鉴定可溶性的非还原性糖。,还原糖+斐林试剂(0.01g/ml NaOH+0.05g/ml GuSO4),砖红色沉淀,选材:梨汁、西瓜汁、冰糖,水浴加热,1.另取1支洁净的试管编号(C、D和E)备用。2.用量筒量取样品3mL,分别注入试管中,再滴加1mL清水。3.向试管中加入样品4.向试管中分别加入2mL斐林试剂,隔水加热2min,观察并记录溶液颜色的变化情况。,实验步骤,实验记录,1.利用斐林试剂鉴定麦芽糖等还原性糖时,会产生砖红色的沉淀。利用这一原理,如何鉴别果实中是否含有还原性

2、糖?,讨论,鉴定脂肪,鉴定原理,鉴定生物组织中是否含有脂肪,常用苏丹III染液(或苏丹IV染液).脂肪可被苏丹III染液染成橘黄色(或被苏丹IV染液染成红色),镜检时可观察到相应颜色的脂肪颗粒.,实验用具,推荐器材 刀片,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜,等。实验材料 花生种子、花生种子匀浆等富含蛋脂肪的材料。,方法步骤,1.取材:取1粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。2.切片:用刀片在花生种子子叶的横断面上平行切下薄片,放入盛有清水的培养皿中备用。(注意安全!),方法步骤,3.制片:(1)选取最薄的绿片置于载玻片中央;(2)在薄片上滴2-3滴苏丹III染液,染色3分钟;(3)用吸水纸吸去染液

3、,再滴加1-2滴50%的酒精(作用?)。(4)吸去周围酒精,滴1滴蒸馏水,盖上盖玻片。,方法步骤,4.观察:(1)低倍镜观察:找到花生子叶最薄处,移至视野中央;(2)高倍镜观察:查看是否有橘黄色颗粒。,鉴定蛋白质,鉴定原理,鉴定生物组织中是否含有蛋白质,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂。在碱性溶液NaOH中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫色的络合物,这个反应叫双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应,从而用来鉴定蛋白质的存在。,实验用具,推荐器材 刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,等。实验材料 鸡卵清蛋白,牛奶,豆浆等富含蛋白质的材料。,方法步骤,1.取2支洁净的试管,编号备用。2.分别配制0.1g/mL的NaOH溶液和0.01g/mL的CuSO4溶液,在试剂瓶上标明试剂名称备用。双缩脲试剂由这两种溶液配制而成。3.将实验材料和生物组织研磨液等稀释后,各取2mL 加入编号的试管中。,方法步骤,4.向各试管中加入 NaOH溶液,轻轻振荡试管,摇匀。观察试管中物质的颜色变化。5.再向各试管中加入34滴CuSO4溶液,轻轻振荡,摇匀。观察试管中物质的颜色变化。,1.你选择的实验材料是否都含有蛋白质?2.这个实验与前面鉴定还原性糖的实验有什么不同?,讨论,

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