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1、无菌技术的实训心得体会 无菌技术的实训心得体会11.在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放于操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒，以避免往返拿取造成污染机率增大。超净工作台台面每次实验前用75%酒精擦拭，按照顶板侧壁器械挡风玻璃操作台面的顺序对超净台内部进行彻底的消毒。然后开启超净台和无菌培养室的紫外灯照射30min，关闭紫外，启动风机运转15分钟后，方可开始实验操作。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线。2.无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以
2、暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流流通。实验用品以75 %酒精擦拭后放入无菌操作台内。实验操作应在台面中央的无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。3.小心取用无菌实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖端或容器瓶口，思想汇报范文亦不要在开口容器的正上方操作。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45角取用。4.操作人员应注意自身安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心毒性药品，例如DMSO，并避免尖锐针头的伤害等。5.每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同也不共享培养
3、基，以避免失误混淆或细胞间污染。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口。6.实验完毕后，关闭超净台风机，以75 %酒精擦拭操作台面及其他实验物品，将多余的物品拿出超净台，打开风机运转15min，关闭风机并打开紫外灯照射30min。7.定期检测CO2 钢瓶的CO2 压力;CO2 培养箱的CO2范文参考网浓度、温度、水盘是否有污染(水盘的水为无菌水，每周更换);定期更换紫外线灯
4、管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：1、添加抗生素2、从物品、用品消毒灭菌着手(1)细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在无菌试验阴性后才能使用。(2)操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。3、从操作者做起(1)进无菌室前要用肥皂洗手，按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。(2)操作者动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话，若打喷
5、嚏或咳嗽应转向背面。(3)操作时要常更换吸管，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。4、防止细胞交叉污染(1)在进行多种细胞培养操作时，所用器具要严格区分。范文写作吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。(2)在进行换液或传代操作时，手或注射器、滴管等不能经过开口瓶口上方，不能触及瓶口，以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。(3)细胞一旦购置或从别处引入，均应及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。5、无菌室的彻底消毒(1) 0.1%新洁尔灭全面彻底
6、擦洗无菌室;(2)甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。容器破碎及感染性物质的溢出的处理：1 小玻璃瓶及其他容器等被传染性物质污染的破碎物品，以及培养物等溅洒的传染性物质，应当立即佩戴手套用布或纸巾覆盖。2 在上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间。3 清理破碎物品及污染物，再用消毒剂擦拭污染区域。4 用于清理的布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。5 如果实验表格或其他材料被污染，在妥善转抄或拷贝后，应当将其弃入污染废弃物容器。无菌技术的实训心得体会224种器械名称及用途 一、手术刀：由刀片和刀柄组成用来切开组织和解剖组织，可根据手术部位和
7、性质的不同而更换大小不同的刀片，据需要采用不同的执刀方式：抓持式、执笔式、执弓式、反挑式。 二、手术剪：分为组织剪和线剪组织剪用以分离，解剖和剪开组织;线剪用来剪断缝线，剪开敷料和引流管等。 三、血管钳主要用于钳夹血管或出血点，以达到止血的目的，也用于分离组织，牵引缝线，夹持和拔出缝针等。组织钳：用于牵拉阑尾等不易滑脱，不易损伤组织。巾钳：固定布巾用。敷料钳：夹持敷料 四、持针器用来夹持缝针缝合，也可用于拔针和打结。 五、手术钳分有齿和无齿两种，用于夹持、提起组织以便于剥离、剪开或缝合。无齿镊用于夹持脆弱组织如血管、神经和黏膜等。有齿镊用于夹持筋膜、肌腱等韧带组织。 六、拉钩分手持和自动两类。
8、手持的又分皮肤拉钩、甲状腺拉钩、阑尾拉钩、S形拉钩。用于牵拉开手术表面的组织，充分暴露操作部位，以便进行手术。甲状腺拉钩用于较浅部位牵拉暴露，主要用于甲状腺手术中。阑尾拉钩用于较小的腹部切口如阑尾。S形拉钩用于腹部深部手术。自动拉钩用于盆腔、腹部手术，可自行固定牵开。 七、吸引器用于吸取胃肠道内容物，胸腹腔及脓肿内液体内液体等，血液。 八、缝针用于缝合各种组织几贯穿缝扎，分为圆针和三角针。圆针用于缝合一般软组织如胃肠道，血管和筋膜等。三角针让用于缝合皮肤及软骨等。 九、缝线分为不吸收和可吸收两类。不吸收的如丝线，可吸收的如肠线。用于缝合组织或结扎血管等，肠线仅用于不应留有异物的伤口。1实习二
9、打结法 实习日期：3月14日一、各种打结法临床上结的种类：方结、三重结、外科结、张力结，其中方结用得最多。 打结方法分单手打结法、双手打结法和持钳打结法。1.方结：结扎较牢固，为外科手术中最常使用的结扣，由两个旋转方向相反的单结重叠而成，适用于较少的组织和较小的血管以及各种缝合的结扎。无菌技术的实训心得体会3【目的要求】1. 认识无菌术在外科手术中的重要性。2. 熟练掌握外科无菌操作的原则和方法。【学时安排】 4学时【教材与参考书】1. 吴在德主编外科学第六版(人民卫生出版社)2. 吴在德主编外科实习医师手册第三版(人民卫生出版社)3. 郭晓惠主编临床医师实践技能考试(北京大学出版社)【实验教
10、具】1. 无菌毛刷、肥皂或肥皂水，酒精或新洁尔灭的泡手桶，无菌小毛巾。2. 干手套，消毒手术衣，消毒液，消毒器械，各种手术铺巾、模型。【实验方法】1. 带教老师讲解和示范。2. 学生在老师的指导下进行操作练习。【实验内容】第一部分 手术人员术前准备一、 传统的肥皂水洗手法：1. 做好洗手的准备手术人员换上手术室准备的清洁衣裤和鞋子。剪短指甲，去除积垢。手部、前臂有破损或感染时不能参加手术。2. 先用肥皂作一般洗手，再用无菌刷蘸肥皂水刷洗手和臂部，从指尖到肘上l0cm处，两臂分段交替刷洗。3. 同样的方法和顺序共进行三次洗刷，每洗一遍约需3分钟，三次共需约10分钟。4. 取无菌小毛巾擦干两手、前
11、臂、肘关节和部分洗刷过的上臂，注意对摺毛巾的技巧和擦干顺序。5. 将双手，前臂和肘部浸泡在70%的酒精桶内5分钟或1:1000新洁尔灭(浸泡5分钟)，或1:2000洗必泰(浸泡3分钟)，浸泡范围应达肘上6cm处。6. 浸泡好的双手必须上举，不可下垂，保持双手上举，作拱手姿势。二、新型灭菌剂的刷手法：1. 碘尔康刷手法的操作技巧：2. 灭菌王刷手法的操作技巧：3. 目前应用的消毒液品种很多，还有如活力碘、碘伏等，使用方法基本相同。三、穿消毒手术衣1. 取出消毒手术衣，提住衣领二角并轻轻抛起，两手迅速插入袖管，两臂前伸，让巡回人员帮助穿上。2. 向前稍弯腰，使腰带悬空，两手交叉，提取腰带向后递，由
12、巡迥护士在身后将腰带系紧。无菌技术的实训心得体会4目的1、保持无菌物品及无菌区域不被污染。2、防止病原微生物侵入或传播给他人，防止交叉感染。评估1、操作项目、目的。2、操作环境是否整洁、宽敞、安静。3、无菌物品的存放是否合理，有无过期。计划目标/评价标准：患者明确无菌操作重要性，愿意配合。无菌物品、无菌区域未被污染。无交叉感染。用物准备：无菌持物钳：常用无菌持物钳有三叉钳、卵圆钳和长、短镊子四件。 无菌容器：常用的有无菌盒、罐、盘、及储槽等。无菌包：包内有无菌治疗巾、敷料、器械等。无菌溶液、启瓶器、弯盘。无菌橡胶手套。治疗盘、小手巾、小纸条、签字笔。实施(一)操作步骤：1、无菌持物钳的使用：用
13、于取用和传递无菌物品。衣帽整齐、洗手、戴口罩，检查有效日期将容器盖打开使钳端闭合垂直取出，使用保持钳断向下用后闭合钳端，垂直放回容器，浸泡时轴节松开，液体在轴节上23CM;并每周更换，使用频率较高，应每天更换一次。注意事项：A不可在盖孔中取、放持物钳;B不可触及容器上缘及液面上的容器内壁，防止持物钳在空气中暴露过久;C禁忌夹取油纱布，以及用来换药或消毒皮肤。2、无菌容器的使用：用于盛放无菌物品。衣帽整齐、洗手、戴口罩，查灭菌日期取物时，打开容器盖，平移离开容器，内面向上，置于稳妥处或拿在手中，用完后立即盖严手持无菌容器时，应把住容器底部。注意事项：A防止盖内面及边缘触及手及任何非无菌区域。B避
14、免容器内无菌物品在空气中暴露过久。3、无菌包的使用：衣帽整齐、洗手戴口罩。A、包扎法：将物品放于包布中央，用包布一角盖住物品左右两角先后盖上，并将角尖向外翻折，盖上最后一角，以“十”字形包扎好，用化学指示胶带贴好。B、开包法：查包的名称、灭菌日期，将无菌包平放在宽敞平坦、清洁、干燥的操作台上，揭开系带，卷刚在包布下，按顺序打开无菌包，用无菌钳夹取所需物品，放在事先准备的无菌区内，如包内物品未用完，按原来的折痕包好，注明开包时间。无菌技术的实训心得体会5无菌操作基本技术1.在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放于操
15、作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒，以避免往返拿取造成污染机率增大。超净工作台台面每次实验前用75%酒精擦拭，按照顶板侧壁器械挡风玻璃操作台面的顺序对超净台内部进行彻底的消毒。然后开启超净台和无菌培养室的紫外灯照射30min，关闭紫外，启动风机运转15分钟后，方可开始实验操作。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线。2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流流通。实验用品以75 % 酒精擦拭后放入无菌操作台内。实验操作应在台面中央的无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。3. 小心取用无
16、菌实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖端或容器瓶口，亦不要在开口容器的正上方操作。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45角取用。4. 操作人员应注意自身安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心毒性药品，例如DMSO，并避免尖锐针头的伤害等。5. 每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同也不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织
17、或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口。6. 实验完毕后，关闭超净台风机，以75 %酒精擦拭操作台面及其他实验物品，将多余的物品拿出超净台，打开风机运转15 min，关闭风机并打开紫外灯照射30min。7. 定期检测CO2 钢瓶的CO2 压力 ; CO2 培养箱的CO2 浓度、温度、水盘是否有污染(水盘的水为无菌水，每周更换);定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前，才能将发生污染的可能性降到最小程度
18、。一般预防可从以下几方面着手：1、添加抗生素2、从物品、用品消毒灭菌着手(1)细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在无菌试验阴性后才能使用。(2)操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。3、从操作者做起(1)进无菌室前要用肥皂洗手，按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。(2)操作者动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话，若打喷嚏或咳嗽应转向背面。(3)操作时要常更换吸管，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕用消毒水浸泡的纱布擦台面。4、防止细胞交叉污染(1)在进行多种细胞培养操作时，
19、所用器具要严格区分。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。(2)在进行换液或传代操作时，手或注射器、滴管等不能经过开口瓶口上方，不能触及瓶口，以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。(3)细胞一旦购置或从别处引入，均应及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。5、无菌室的彻底消毒(1) 0.1%新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室;(2)甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气休对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。容器破碎及感染性物质的溢出的处理：1 小玻璃瓶及其他容器等被传染性物质污染的破碎物品，以及培养物等溅洒的传染性物质，应当立即佩戴手套用布或纸巾覆盖。2 在上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间。3 清理破碎物品及污染物，再用消毒剂擦拭污染区域。4 用于清理的布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。5 如果实验表格或其他材料被污染，在妥善转抄或拷贝后，应当将其弃入污染废弃物容器。无菌技术的实训心得体会
