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1、第四章色谱进样技术,分流/不分流毛细管柱进样口分解图,插入件组件衬管绝缘层垫圈变径接头保温层垫圈柱螺母,进样垫固定螺母进样垫O形环分流出口管线分流/不分流进样口实体固定螺母分流平板保温套,衬管的作用,保护色谱柱：不挥发组分滞留在衬管内。但当污染物积攒到一定量时，会吸附样品造成峰拖尾/分裂或出现鬼峰衬管内少量经硅烷化处理的石英玻璃毛可防止注射器针尖的歧视（即针尖内的溶剂和易挥发组分首先汽化）；加速样品汽化；避免固体物质进入并堵塞色谱柱等,溶剂膨胀方程,溶剂蒸汽体积=22,400 x A x B x C x IA=溶剂密度/溶剂分子量B=15/(15+柱头压 in psi)C=(进样口温度C+27
2、3)/273I=液体进样体积 L例如1 L 水于 250 C 15 psi 柱头压产生22,400 x 1/18 x 15/30 x 523/273 x 1=1,192 L 蒸汽,蒸汽膨胀因子（进样口250度，柱前压13psi),18740-80220,19251-60540,18740-60840,直接进样,不分流,分流/不分流,不分流,分流,分流平板的维护,在溶剂中超声处理烘干用非氯化剂去活化HMDSBSTFABSATSIM用溶剂清洗先惰性洗涤-甲苯再用醇类清洗-甲醇烘干,进样口日常维护,定期更换进样垫使用最低可用温度使用气流吹扫使用干净的衬管用溶剂清洗分流平板使用干净的进样针,分流进样需
3、注意的问题,尽量减少分流歧视：分流比越大，越有可能造成分流歧视保证样品快速汽化（适当添加经硅烷化处理的玻璃毛）分流进样时，柱的初始温度尽可能高一些柱安装时注意柱与衬管同轴,分流进样,总流量50 mL/min,隔垫吹扫流量3 mL/min,分流出口流量46 mL/min,柱流量1 mL/min,Internal Detail,衬管,密封圈,柱子,槽,进样,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,50 mL/min,Column Flow,1 mL/min,Split Vent Flow,46 mL/min,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,To
4、tal Flow,50 mL/min,样品汽化,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,50 mL/min,Column Flow,1 mL/min,Split Vent Flow,46 mL/min,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,50 mL/min,Sampling,过载,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,50 mL/min,1 mL/min,Split Vent Flow,46 mL/min,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,50 m
5、L/min,节省载气,节省载气功能会在样品进入色谱柱后，减少分流出口的载气流量以节约载气。柱前压和柱流速仍保持不变，只有分流出口的流量减少。可用于分流和不分流方式。节省载气启动的时间应选在样品进入色谱柱后。,分流出口流量(mL/min),200-175-150-100-75-50-25-,-2-1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,预运行,时间,节省载气流量,进样,节省载气启动时间设在 2.5 分钟。,运行结束,节省载气流量,正常流量,不分流进样,柱初始温度尽可能低一些，最好低于溶剂的沸点10-20度。溶剂要与柱子固定相匹配。衬管尺寸尽量小（0.25-1ml),使样品在衬管内尽量少
6、稀释。最好使用直通式衬管,对于比较脏的样品,要加经硅烷化处理的玻璃毛并注意经常更换根据样品(溶剂沸点,待测组分沸点,浓度等)优化开启分流阀的时间,一般在30-80秒之间,多用0.75分钟，可以保证95%以上的样品进入柱子.,溶剂效应,Solvent BP TempDichloromethane 40 10-30Chloroform 61 25-50Carbon Disulfide 46 10-35Diethyl Ether 35 10-25Pentane 36 10-25Hexane 69 40-60 Iso-Octane 99 70-90,溶剂与固定相须谐调.,不分流进样,Total Flo
7、w4 mL/min,(Septum)Purge Vent Flow3 mL/min,Split Vent Flow0 mL/min,Column Flow1 mL/min,Column Flow1 mL/min,(Septum)Purge Vent Flow3 mL/min,进样,Split Vent Flow,0 mL/min,Total Flow,4 mL/min,Syringe Needle,Sample,Column Flow,1 mL/min,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,=Analyte Vapor,Column Flow,1 mL/min,(S
8、eptum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,=Analyte Vapor,Purge 阀打开 不分流结束,=Solvent,=Analyte,=Solvent,=Analyte,超载,Column Flow,1 mL/min,Split Vent Flow,(Septum)Purge,Column Flow,1 mL/min,Split Vent Flow,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,Total Flow,1 mL/min,Split Vent Flow,0 mL/min,(Septum)Purge,Vent Flow,3 mL/min,
9、Total Flow,4 mL/min,=Solvent Vapor,=Analyte Vapor,其它进样口,程序升温汽化进样口使用PTV进样口大体积进样(LVI)，用于较晚流出组分或不净样品的痕量分析在冷的进样口进行大体积进样，然后进样口采用温度 阶程进样升温。进样口使用“无隔垫顶盖”挥发进样口从一个外加设备如顶空，吹扫捕集或毒性气体进样器引入气体样品。,冷柱上进样,冷柱上进样是将样品直接注入处于室温或更低温度下的色谱柱内，再逐步升高温度使样品各组分依次汽化。优点消除进样口对样品的歧视效应。避免热分解容易利用溶剂效应准确度与精密度均高于分流/不分流进样缺点进样体积小操作复杂，对初始温度、溶
10、剂种类、进样速度等要求较严格易污染毛细管 适用于热不稳定化合物及痕量分析,冷柱头进样,注射器针,柱子,固定相,样品,程序升温汽化进样（PTV）,程序升温汽化进样（PTV）是将液体或气体样品注射于低温的进样口衬管内，再按程序升高进样口的温度。优点：无注射器头的样品歧视不需要特殊注射器抑制了分流歧视可除去溶剂和低沸点组分，实现样品浓缩可低温捕集气体样品，便于同阀进样或顶空进样技术结合有多种操作模式，分流、不分流及溶剂消除模式重线性接近于冷柱头进样,CO2 或液氮冷却 无隔垫，不会造成隔垫污染 无隔垫吹扫，不损失样品 多次进样后无泄漏 最优化的端口体积，适合于毛细管柱,HP PTV with Sep
11、tumless Head Assembly,Septumless Sampling Head,GC,Detector,Step 1:,注样,Step 2:,予柱升温，使溶剂与样品分离,Step 4:,目标化合物结束残留物从分流出口流出,Step 3:,溶剂分离结束，目标化合物进入柱子,.,溶剂,被分析物,基质,S,A,M,分流,不分流,高分流流量,Pre-column,恒温,Pre-column,程序升温,Pre-column,程序升温烘烤,GC Column,GC,Detector,GC Column,GC,Detector,GC Column,GC,Detector,Split/Split
12、less Configuration,APEX ProSep Precolumn Separation Inlet,进样口维护,Septum-11 mm,low bleed,Liner seal(O-ring)Viton below 300CGraphite above 300CChange with Liner,SealGold PlatedMust be kept cleanCan be deactivated,WasherNeeded for tight seal,FerruleGraphite good sealVespel excellent sealGraphite/Vespel very good seal,手动进样应注意的问题,注射速度快取样准确，重现避免样品间互相干扰选用合适的注射器，用10ul进样器进样量不要小于1ul。减少注射针尖歧视：每次进样速度尽量一致，玻璃毛放在衬管中间偏下位置，即针尖到达的位置。取样后可用滤纸拭去针尖外面的残留样品，但要注意不要吸去针内样品,
