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1、肠道杆菌,掌握：大肠埃希菌生化反应特点及致病性，卫生学检查的意义；志贺菌属的分群、致病性及耐药性；沙门菌属的致病性。熟悉：肠道杆菌的生物学共性及鉴别要点；志贺菌的微生物学检查及预防；肥达反应的结果分析及用途；肠热症的微生物学检查；沙门菌带菌者的检查；其它肠道杆菌的致病性。了解：沙门菌抗原结构与血清型；特异性预防；其它肠道杆菌的生物学特点。,重点 1、肠道杆菌的培养特性、生化反应和血清学鉴定。2、肠热症的细菌学检查和血清学检查，肥达氏反应的 分析判断。难点 肥达氏反应的分析判断,肠 道 杆 菌,埃希菌属大肠埃希菌（E.coli）-肠外感染 变形杆菌普通变形杆菌-肠外感染和食物中毒正常菌群 克雷伯
2、菌属 沙雷菌属 致病性大肠埃希菌：EPEC ETEC EIEC EHEC EAggEC致病菌 致贺菌属 伤寒沙门菌 沙门菌属肠道沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌 鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌,埃希菌属大肠埃希菌（E.coli）-肠外感染 变形杆菌普通变形杆菌-肠外感染和食物中毒正常菌群 克雷伯菌属 沙雷菌属 致病性大肠埃希菌：EPEC ETEC EIEC EHEC EAggEC致病菌 志贺菌属 伤寒沙门菌 沙门菌属肠道沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肠热症 肖氏沙门菌志贺菌属 希氏沙门菌 鼠伤寒沙门菌 食物中毒 猪霍乱沙门菌 败血症 肠炎沙门菌,问题：1、三种肠道杆菌的形态
3、结构的相同点和不同点？2、通常用哪种生化反应鉴别肠道致病菌和非致病菌？3、用哪种实验可以鉴别志贺菌属和沙门菌属？,俗称大肠杆菌：通常为非致病菌,埃希菌：大肠埃希菌属（E.coli）,志贺菌属（shigella）,通称痢疾（dysentery）杆菌：致病菌,沙门菌属（shigella）：致病菌,生物学形状 形态染色：,E.coli,伤寒沙门菌,shigella,E.coil,Salmonella,生化反应：糖分解实验,细菌,E.coil,shigella,Salmonella,glucose,lactose,+,+,-,-,+,-,培养,SS培养基,纯培养和生化反应,E.coil,乙型副伤寒沙门
4、菌,伤寒沙门菌,伤寒沙门菌 或,shigella,硫化氢试验 有些细菌如沙门菌、变形杆菌等能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸）生成硫化氢，硫化氢遇铅或铁离子生成黑色的硫化物+（FeS黑色）,IMViC试验I-吲哚（indol）试验M-甲基红（methyl red）试验V-VP（Voges-Proskauer）试验C-枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验,IMVIC test,大肠杆菌,产气肠杆菌,Indole test,Methyl red test,VP test,Citrate Utilization test,O 抗原 H K,E.coil,Salmon
5、ella,shigella,E.coil,Salmonella,E.coil,Salmonella,shigella,致病性-致病物质1.黏附素：2.外毒素：耐热肠毒素（heat stable enterotoxin，ST）不耐热肠毒素（heat labile enterotoxin，LT）志贺样毒素,E.coil,致病性-所致疾病（一）肠外感染：化脓性感染 泌尿系感染,（二）某些血清型大肠埃希菌咳引起人类腹泻。根据不同发病机制，可分为五类,肠产毒性大肠埃希菌,肠侵袭性大肠埃希菌,肠致病性大肠埃希菌,肠出血性大肠埃希菌,肠集聚型大肠埃希菌,引起胃肠炎的大肠埃希菌,开始 为黄色水样便，后转为血水
6、便有特殊臭味，大便镜检有大量红细胞，无白细胞伴腹痛,出血性大肠杆菌肠炎,致病：毒力因子主要是菌毛和志贺样毒素。轻则 能使人发烧、腹痛、反胃。重则 能引起人的出血性腹泻、水肿和肠炎等 症状。并发 血栓性血小板减少性紫癜和可能引起病 情更为凶险的溶血性尿毒综合征等，严 重的可致人死亡。,机制：O157H7大肠杆菌也称Vero埃希菌，可以像通常的致病菌一样产生细菌毒素，能使Vero细胞产生病变，故也称Vero毒素，也称志贺样毒素（SLT）。使感染者出现腹泻等一系列病症，甚至因肾功能衰竭和多脏器受损而死亡。,传染源：1、牛是大肠杆菌的主要传染源 2、受污染的水和饮料也容易传播病菌。易感人群：小孩、老人
7、以及其他免疫力差的人群容易成为“牺牲品”。,防治：1、原则上应特别注意食品卫生：避免 食用烹调欠火的牛肉，尽量不喝生牛 奶，不食不干净的食品、水果、蔬菜 等，不饮用不干净的饮料和生水。避免 与患者密切接触，或者在接触时应特 别注意个人卫生。,2、这种病菌对热敏感，一般不会在充分煮熟 的食物和经过严格灭菌程序的牛奶及奶制 品上找到栖身之所。3、消毒剂也是的致命克星。,致病性,致病物质 主要致病物质为菌毛侵袭力、内毒素，少数菌株产生外毒素（shiga toxin,ST)。1、侵袭力-,菌毛,粘附并穿入回肠未端、结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症,菌毛粘附及穿入是致病的首要因素！,shi
8、gella,肠粘膜,内毒素,肠壁植物神经,通透性增加,破坏,对内毒素的吸收,毒血症症状,炎症、溃疡形成,内毒素,肠粘膜,脓血粘液便,肠功能紊乱,肠蠕动失调、痉挛,直肠扩约肌痉挛：腹痛、里急后重,促进,外毒素（志贺毒素）:由A群志贺菌型和型产生,ST生物学活性 肠毒素性 细胞毒性 神经毒性或致死毒性 志贺菌有毒株 无毒株,（二）致病性和免疫性,2所致疾病-细菌性痢疾 传播途径：粪口传播 传染源：病人和带菌者,急性痢疾（2）中毒性痢疾（3）慢性痢疾3免疫性,中毒性痢疾病人,目前至少有67种O抗原和2200个以上血清型,根据其对宿主的致病性,可分为三类,伤寒杆菌副伤寒杆菌(甲、乙、丙),人,肠热症（
9、伤寒、副伤寒）,鼠伤寒杆菌肠炎杆菌 猪霍乱杆菌,人、动物,急性胃肠炎败血症,鸡痢沙门氏杆菌 鸡伤寒沙门氏杆菌,动物,三、沙门菌属(Salmonella),沙门菌属（salmonella）,仅对人 伤寒沙门菌主要包括 甲型副伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌,（二）致病性,1致病物质 侵袭力内毒素肠毒素,（二）致病性,2所致疾病（对人）（1）肠热症：伤寒沙门菌引起伤寒 甲型副伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 引起副伤寒 希氏沙门菌,传染源 伤寒或副伤寒病人或带菌者。传播途径 消化道（粪口传播）致病过程,伤寒和副伤寒杆菌 消化道,经淋巴液,肠系膜淋巴结,经胸导管,入血(第一次菌血症),一期症状(感染初期),
10、经血流播散,肝、脾、肾、胆囊、骨髓等,再次入血(第二次菌血症),二期症状:持续高热,肝脾肿大,玫瑰疹,WBC,三周后,恢复期,三期恢复期,病菌被清除 四周,胆囊带菌,细菌在吞噬细胞内繁殖,肠穿孔、出血、溃疡,2、胃肠炎（食物中毒）：最常见,鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌,大于108,食物中毒（发热、恶心、呕吐、腹痛、水样泻）,3、败血症：,希氏沙门菌鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌,血,败血症（高热、寒战、厌食、贫血）,脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎,4.无症状带菌者,（三）免疫性,病后有牢固的免疫力,（四）防治原则,特异性预防 减毒口服活菌苗效果较好。治疗 首选氯霉素。,化脓性感染：
11、血液、脓液、脑脊液泌尿系疾病：尿液腹泻：粪便,标本,SS平板,生化反应,血清学鉴定,双糖发酵等,玻片凝集试验,微生物学检查,本病第1周取血液。病程13周取骨髓 第2周取粪便，第3周取尿液,Salmonella,顺口溜：1血2便3检尿，要检骨髓全知道,（1）SS培养基,挑选可疑菌落进行下一步生化反应鉴定,E.coil,乙型副伤寒沙门菌,伤寒沙门菌,伤寒沙门菌 或,shigella,血清学鉴定如疑为致病性肠道杆菌需作血清学鉴定。,已知分型Ab,分离菌,直接法玻片凝集试验,+,卫生细菌学检查 细菌总数 大肠埃希菌菌群数。,大肠杆菌,在环境和食品卫生学上常被用作粪便污染的检测指标,3个大肠菌群/1L饮
12、水 5个大肠菌群/100毫升瓶装汽水、果汁,卫生细菌学检查,大肠菌群指数,我国卫生标准：,细菌总数,100个细菌总数/1ml饮水,2血清学检查（肥达试验，wodal test）,Salmonella,反应加样程序 单位：ml,（四）微生物学检查法,肥达试验结果解释及注意事项：正常人抗体水平 伤寒沙门菌 O凝集效价为1：80 H凝集效价为1：160 副伤寒沙门菌H凝集效价为1：80,H与O抗体的诊断意义若O、H凝集效价均超过正常值，则可能感染了伤 寒、副 伤寒；若两者皆低，则患伤寒可能性很小；若O不高，H高则可能是预防接种或非特异回忆反 应若O高，H不高，有可能是感染早期或感染了与伤 寒沙门菌有
13、交叉反应的其他沙门菌。,曾患过伤寒或曾接种过伤寒菌苗，新近又感染流行性感冒或布氏菌等疾病时，可产生高度的“H”凝集素及较低的“O”凝集素，这种反应称回忆反应。确诊为伤寒的患者中，约有10%的患者肥达氏反应始终为阴性，故阴性结果不能排除伤寒的诊断。,课后小结：我们重点介绍了主要是非致病性的大肠杆菌、致病性的志贺菌属和伤寒杆菌，他们均为革兰染色阴性的杆菌，因此形态染色一般无法鉴别，可通过培养（通常用SS/MEB平板培养基进行分离培养，致病菌菌落无色，非致病菌呈现颜色）、生化反应（非致病菌分解乳糖，致病菌不分解乳糖）和血清学试验鉴定（玻片凝集试验和肥大氏反应）。,思考题：问答题1常见引起人类疾病的沙
14、门菌属有哪些？产生哪些致病因素？可致哪些疾病？2、常见的引起肠内感染的致病性大肠杆菌有哪几种？简述其致病机制。3简述大肠杆菌引起的肠外感染。4简述志贺菌的致病因素和所致疾病。5.试述肥达反应的原理、结果分析及实际用途。6、简述幽门螺杆菌的致病因素及与其有关的疾病。,病案1、患者李x，男，19岁以发热、腹痛、头痛、乏力一周，于1999年7月人院，患者于入院前一周开始发热，体温达39，午后发热明显，可高达40，伴腹痛，轻度腹泻，稀糊状，每日28次。无恶心、呕吐，有时头痛、轻咳、不思饮食，精神不佳当地医院诊断为上感，曾给青霉素、红霉素，氯霉素静脉点滴，病情未见好转治疗一周后，高热仍不退，上述症状无缓
15、解，即来本院诊治，以高热待查入院。化验检查：白细胞总数5400立方毫米。中性粒细胞为64%，淋巴细胞为36%。查体：体温40，脉搏96次分，神志清，表情淡漠，胸前皮肤可见少量玫瑰疹心肺无异常。腹软，肝大肋下15厘米，剑下2厘米，质软，于肋缘下刚触及，病理反射未引出，血培养阴性，肥达氏反应（患病一周末）：伤寒“o”凝,凝集价1：640，伤寒“H”凝集价1：320，甲、肖氏副伤寒杆菌“H”凝集价均阴性 病案思考题：该患者初步诊断是什么，根据什么，为何血培养阴 性？为何白细胞总数偏低？,病案3 患儿孟Xx，男，2岁主诉呕吐腹泻一天人院前一H，在托儿所吃过剩米饭，饭后3小时，即有4个小儿同时发病，该患
16、儿症状最重一日内呕吐10余次之多，吐出胃内容物及胆汁腹泻8次，大便呈水样，无里急后重感，无脓血。患儿自诉腹痛，口渴，精神不佳，尿少，不思饮食体查：体温38，呈急性重病容，中度脱水。神志清，较烦躁，营养发育中等，皮肤干燥，弹性差两眼眶明显下陷，颈软，心肺（一），腹软，脐周有压痛肠鸣音亢进化验：白细胞总数14000立方毫米，中性粒细胞80，淋巴细胞20%粪便培养有猪霍乱杆菌生长,病案思考题：该患者患何病？如何引起，如何预防？,病案2 患儿，王Xx，女8岁。主诉发热半日，抽风三次。人院当日上午突发高烧。体温达40，下午1时开始抽风，颜面青紫两眼上翻，四肢抽动，持续12分钟，连轴三次，抽风后患儿昏迷不醒，曾呕吐一次，无腹泻，于下午2时急诊人院。体查：体温40C，呈危重病容，昏迷状态，打针无反应营养发育好，面色潮红，两眼结膜充血，瞳孔等大，对光反射迟钝，呼吸急促。偶尔有双歇气，律齐，率速，腹软，肝未触及肠鸣音亢进血压10060毫米汞柱，病理反射未试出，用取便管取粪化验，呈将液脓血便，镜下满视野脓细胞。白细胞总数25000立方毫米，中性粒细胞90%，淋巴细胞10%。,二病案思考题 1.你对该患者初步诊断是什么，根据哪些症状，可能的发病机理为何？2如何进行微生物学检查，帮助确诊?,
