AKTA蛋白纯化仪.ppt

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1、快速蛋白液相色谱系统 AKTA FPLC(明道楼811),林彦,仪器组成,P-920 pump,UPC-900 detector,主要技术指标,泵系统 全自动双泵系统,流速精度高,梯度重复性高,可完成自动缓冲液配置。宽广的流速范围同时满足实验室研究及中试制备应用。流速范围:0.05-20mL/min(梯度)压力范围:0-5MPa,50bar,725psi压力传感器:0-5Mpa,Offseterror:0.05Mpa,Scaleerror:2%压力监控:由UNICORN软件在线监控 梯度生成:高压梯度混合提高了分辨率,准确性和重复性,带压力 传感器和过压报警功能 梯度精度:reproducib

2、ility:1%Bat30050nl/min 延迟体积:600l/module,UV检测器 UV检测波长:254nm,280nm线性:254nm时高至2AU为小于3,280nm时高至1AU为小于5 基线调整:全范围0-100%可调 噪音:4010-6AU 漂移:10010-4AU电导检测 流动池死体积:200nL,电导范围:1mS/cmto999.9mS/cm,精确性:0.1mS/cm,重复性:Max.3%or15mS/cm,,功能/应用范围,可以快速的检测、分离、纯化多种生物样品(蛋白质、多糖、生物酸、生物碱以及天然小分子等),能够有效地针对各种样品:植物、动物、人类生物体,纯化、分离特异性

3、生物小分子。适合实验室摸索等小规模生产。,基本原理,溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出,进而达到分离的效果。,凝胶过滤:根据分子大小和形状进行分离。分子量较大的先出峰,小的后出峰。离子交换色谱:由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上,再采用盐浓度梯度或者更换缓冲液的PH值进行洗脱。对于等电点小于5.0的酸性蛋白质,推荐使用阴离子交换,对于等电点大于7.0的碱性蛋白质,推荐使用阳离子交换。疏水作用色谱:利用蛋白质、多肽在高盐存在下,可以结合疏水凝胶,而在盐浓度降低时又可以解脱的原理实现分离。亲和层析色谱:利用蛋白质、多肽与某些配基的特异性相互作用而进行分离。例如:酶-底物,酶-抑制剂,糖蛋白-凝集素,抗原-抗体等。,常用层析方法,Thank you,

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