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1、专题1 基因工程,基因工程又叫做 或。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的遗传性状。,基因拼接技术,DNA重组技术,基因,修饰改造,定向地,1DNA重组技术的基本工具,第1节,问题探讨,手术刀,缝合针,运输工具,培育抗虫棉需要哪些基本工具?,“限制性核酸内切酶分子手术刀”,自主学习,主要从原核生物中分离纯化而来,已经分离出大约4000种,1、识别某种特定核苷酸序列,2、使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。,形成黏性末端或平末端,磷酸二酯键,黏性末端,黏性末端,EcoRI限制酶的切割,平末端平末端,SmaI限制酶的切割,类
2、型,来源,功能,相同,差别,EcoliDNA连接酶,T4DNA连接酶,大肠杆菌,T4噬菌体,恢复磷酸二酯键,只能连接黏性末端,能连接黏性末端和平末端(效率较低),“分子缝合针”DNA连接酶,自主学习,两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来,DNA连接酶的缝合作用,可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，,DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？,DNA连接酶的缝合作用,A A T T G,C,DNA聚合酶的作用,两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,将一个个核苷酸连接起来，形成磷酸二酯键,DNA聚合酶:,DNA连接酶:,载体的作用,载体的必要条件,载体的种类,自主学习,1)能自我复制2)具多个限制酶
3、切点3)具有某些标记基因4)必须是安全的,对受体细胞无害.,1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制,细菌的质粒 病毒：噬菌体衍生物、动植物病毒等。,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,有标记基因,本质:小型环状DNA分子,分布：许多细菌、酵母菌等生物,最常用运载体质粒,1、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA,D,练习,A,2基因工程中可用作载体的是质粒噬菌体病毒动物细胞核A BC D,3、下列说法正确的是：（）A、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 B、质粒是基因
4、工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”,D,4下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是,A B C D,B,限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC，限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶的切点。（1）请画出质粒被限制酶切割后所形成的黏性末端。（2）请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。（3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？,可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的）,小试身手,http:/,更多精彩尽在,谢谢观看,
