NA的粗提取与鉴.ppt

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1、,知识目标1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。能力目标掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作。态度观念目标通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。,1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解蛋白质,使提取出的DNA纯度较高4、预冷的乙醇溶液具有以下优点:一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子

2、运动,易于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂;5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁,破坏细胞膜,同时也能使蛋白质变性;6、在6075度条件下加温处理,蛋白质变性,而DNA结构不会受到破坏,提取纯度较高的DNA7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色,根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案:方案一:30mL含DNA的滤液2mol/L NaCl同方向搅拌,DNA溶解加入蒸馏水DNA析出过滤得到过滤物放到2mol/LNaCl溶液中溶解DNA-NaCl溶解液方案二:30mL滤液嫩肉粉(木瓜蛋白酶)静置1015分钟DNA滤液方案三:30mL滤液6075恒温保温1015分钟过滤获得

3、DNA滤液,两种材料的DNA粗提取与鉴定过程,以鸡血为材料以花菜为材料,释放组织细胞中的DNA,粗提取DNA,将粗提取的DNA进一步纯化,鉴定提取物是DNA,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,2mol/L,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,5、过滤取纱布上的滤物,纱布过滤,6、再次溶解DNA,2mol/LNaCl溶液,取滤物,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,7、加冷酒精使DNA析出(纯化),冷酒精,鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图,DNA的鉴定,总结:,1.下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是 A氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大 B人血也可代替鸡血进行实验 C柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 DDNA不能溶于酒精2.在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是A.DNA溶解于水 B 血细胞破裂,DNA释放C稀释血液,防止凝固 D 有利于搅拌3.若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐,加入食盐的目的是A.利于DNA的溶解 B.分离DNA和蛋白质C.溶解细胞膜 D.溶解蛋白质4.在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是A有利于溶解DNA B有利于溶解杂质C减少DNA的溶解度 D减少杂质的溶解度,

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