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PCR基本原理示意图,待扩增目的DNA片段(红色区域),氢键,加热变性后氢键被破坏,模板分成两条单链。,加热变性,退火(迅速降温),退火后,由于引物分子小,浓度又高,在模板之间还未复性前就迅速与模板匹配结合。,引物2,引物1,引物是人工设计并合成的脱氧核苷酸短链。,升温至Taq酶最适温度,新链延伸方向总是从5 3,在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸;在终止延伸时,新链的长度可能长于目的片段,延伸至目的片段外侧区域。,升温至Taq酶最适温度,在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸;在终止延伸时,新链的长度可能长于目的片段,延伸至目的片段外侧区域。,5,5,3,3,引物2,引物1,3,3,5,5,新链延伸方向总是从5 3,变性温度下链间氢键又被破坏,双链分开成单链。,退火后,引物又与模板匹配结合。,在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸。新链的长度不会超过模板。,反复经过变性、退火、延伸等步骤,经过约3040次循环,下面这种产物将以指数级方式递增,成为主要产物。,难点?!,在PCR循环过程中,以下双链形式的DNA只能以算术级方式扩增。成为PCR反应的副产物。,难点?!,