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1、2023/7/8,检验机构TORCH检测,郑州安图绿科生物工程有限公司,2023/7/8,TORCH概述,TORCH 检测现状,TORCH IgG/IgM检测方法,安图TORCH 产品介绍,提 纲,2023/7/8,TORCH概述,2023/7/8,TORCH,2023/7/8,巨细胞病毒（CMV）,一、病原体,2023/7/8,二、流行病学,源自雅培公司网站,2023/7/8,三、临床感染,孕妇原发感染可造成造成胎儿先天性感染，初生的病儿可出巨细胞包涵体病（CID），体征为黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜、溶血性贫血和不同程度的神经系统损害。包括小脑畸形、脉络膜视网膜炎、神经萎缩等。部分病儿
2、可于出生后数月至数年才出现耳聋和智力发育低下等症状。,巨细胞包涵体病 欧阳宗仁 北京佑安医院,2023/7/8,一、病原体,风疹病毒（RV）,2023/7/8,二、流行病学 风疹病毒主要经空气飞沫传播，也可通过口、鼻咽、眼的分泌物及血液直接感染，易感人群多为 59岁的儿童，一般在冬春两季发病，可散发或流行。目前我国已经将风疹疫苗列入计划免疫，8个月以上的儿童均要接种疫苗，因此风疹的发病率大大降低，在发达国家，风疹已几乎被实施疫苗计划免疫所消灭，只是在未免疫人群中仍有少数发生。由于接种风疹疫苗可以几乎100%产生保护性抗体，终身免疫，因此人群中风疹抗体的阳性率很高，约80-95%。,二、流行病学
3、,2023/7/8,三、临床表现“三日麻疹”，皮疹消退后，通常无色素沉着及脱屑，预后良好。“先天性风疹综合征”（congenital rubella syndrome,CRS），即出生时体重低于2.5公斤，发育迟缓，出生后全身性器官受损，先天性心脏病，畸形，耳聋、失明等。CRS患儿最常见的是白内障等眼疾患，其次是耳聋，60%有心血管系统缺损。孕妇在妊娠的不同时期感染风疹病毒造成先天性畸形的风险,三、临床感染,Chapter 12.Rubella,in Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases“The Pink Boo
4、k”.2004,Centers for Disease Control and Prevention:Atlanta.p.145-158,2023/7/8,弓形虫,一、病原体,弓形虫（Tox）,2023/7/8,弓形虫生活史,2023/7/8,弓形虫的传播方式有两种：猫犬粪便中的弓形虫卵囊污染了水或食物而使人感染。人接触或进食含有传染性包囊的生肉或不熟肉类。世界各国人群弓形虫感染率不等，从0.6到94，许多国家感染率在2550左右，在西方国家中以法国感染率最高，达80。我国各地人群弓形虫感染率不同，不同作者在不同地方采用不同方法调查的感染率人0.30到47.3不等（中华医学预防杂志 1991；
5、25（1）：56）。,二、流行病学,2023/7/8,金根源等弓形虫病防治手册,2023/7/8,弓形虫的感染分为先天性感染和获得性感染二类。先天性弓形虫病典型症状：脑积水、大脑钙化灶、视网膜脉络膜炎和精神、运动的障碍。在新生儿期有发热、皮疹、呕吐、腹泻、黄疸、肝脾肿大、贫血、心肌炎、癫痫等。获得性弓形虫病可因虫体侵袭部位和机体反应性而呈现不同的临床表现。淋巴结肿大：多见于颌下和颈后淋巴结。弓形虫眼病：以视网膜脉络膜炎多见，成人视力突然下降，婴幼儿可见手抓眼症。免疫功能低下者：常表现为脑炎、脑膜脑炎、癫痫和精神异常。,三、临床感染,2023/7/8,一、病原体,单纯疱疹病毒（HSV）,单纯疱疹
6、病毒可分为1型和2型，两者结构相似，有50%的同源性。,2023/7/8,HSV-1主要是通过呼吸道、皮肤和粘膜密切接触传播，感染腰以上部位的皮肤粘膜和器官，发展中国家成人抗HSV-1抗体阳性率为90-100，其中原发性感染中8090为隐性感染。HSV-2主要是通过性接触传播和母婴传播，感染腰以下部位的皮肤粘膜和器官，目前生殖器HSV感染发生率不断上升，在某些西方国家已跃居性病常见病因的第二位，我国成人HSV-2的抗体阳性率为3-5%。新生儿HSV感染发病率为0.05-1/万例，其中绝大多数为母亲生殖道HSV上行播散或分娩时经产道感染所致。,二、流行病学,2023/7/8,疱疹性口炎(herp
7、eticstomatitis)是小儿容易发生的单纯疱疹病毒1型IgG（HSV-1）引起的急性口腔粘膜感染，也可能单独发生在唇及口周皮肤。单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK)，简称单疱角膜炎，是由单纯疱疹病毒1型IgG(herpes simplex virus,HSV-1)引起的角膜感染，是一种严重的世界性致盲眼病，其发病率和致盲率均占角膜病的首位。单纯疱疹病毒性脑炎(Herpes Simplex Virus Encephalitis，HSE)是一种由于单纯疱疹病毒感染脑实质引起的，以发热、口唇疱疹、头痛呕吐、意识障碍、偏瘫、抽搐、精神异常为主要表现，
8、又称急性坏死性脑炎、急性包涵体脑炎，是临床较为常见的中枢神经系统感染性疾病，其中95以上为HSV-1感染。生殖器疱疹,三、临床感染,2023/7/8,TORCH检测现状,2023/7/8,一、检测方法,1、SFDA批准的TORCH IgG IgM检测方法:ELISA、化学发光（板式、磁微粒）、胶体金 IgG检测为间接法，IgM检测有间接法和捕获法两种2、SFDA批准的TORCH 核酸检测方法：单纯疱疹病毒型核酸扩增(PCR)荧光定量测定试剂盒（检测生殖泌尿道分泌物、生殖道刮片等样本受感染细胞中单纯疱疹病毒II型DNA）人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光法)（器官移植、骨髓移植及HIV
9、阳性/AIDS患者尿液、乳汁、血清或淋巴细胞中的人巨 细胞病毒的检测）目前国内主要用ELISA方法检测IgG和IgM抗体进行TORCH 感染筛查，极少数大医院使用全自动化学发光免疫分析仪检测IgG和IgM抗体，个别实验室进行抗体亲和力的检测，核酸检测项目不全，不适合于初筛，可以用于进一步检测。,2023/7/8,1、四项（弓形虫-IgM、巨细胞病毒-IgM、风疹病毒-IgM、单纯疱疹病毒-IgM）2、六项（弓形虫-IgM、弓形虫-IgG、巨细胞病毒-IgM、巨细胞病毒-IgG、风疹病毒-IgM、风疹病毒-IgG）3、八项（弓形虫-IgM、弓形虫-IgG、巨细胞病毒-IgM、巨细胞病毒-IgG、
10、风疹病毒-IgM、风疹病毒-IgG、单纯疱疹病毒2-IgM、单纯疱疹病毒2-IgG）4、十项（在八项基础上增加单纯疱疹病毒1-IgM、单纯疱疹病毒1-IgG）首先应该同时检测IgM和IgG，IgG和IgM同时检测对临床的指导意义更大；其次应该开展十项检测，因为单纯疱疹病毒1型和2型感染的临床症状不同。,二、检测项目,2023/7/8,TORCH IgG/IgM检测的临床意义,2023/7/8,IgG抗体的检测很重要1、IgG抗体阳性，同时IgM抗体阴性，说明是既往感染，孕妇比较安全，因为即使发生了复发感染，胎儿先天性畸形的几率也非常低。2、IgG抗体为阴性，同时IgM抗体阴性，说明没有感染过，
11、是易感人群，需要在孕期密切关注，建议在前三个月至少再检测一次。3、IgG抗体的动态变化可以作为补充。IgG抗体由阴性转化为阳性是急性感染的标志；IgG抗体滴度显著升高是复发感染的标志；IgG抗体持续阴性而IgM抗体持续阳性可能是IgM假阳性。,Fowler KB，Stagno S，et a1The outcome of congenital CMV infection In relation to matemal antibody statusN Engl J Med，1992,326：663-667,2023/7/8,三、检测程序,1、是否需要筛查TORCH反对观点：筛查孕妇TORCH血清学
12、特异性抗体不能确诊孕妇何时感染，胎儿是否受累，也不能确定是否需要终止妊娠，且需要花费大量人力财力，筛查意义不大。围产期选择哪些感染性疾病进行筛查，需权衡利弊，应从成本效益出发。首先，该病有较高的发病率；其次，该病对胎、婴儿有较大的危害，如致畸或出生后有较严重的后遗症；第三，对孕妇与胎儿感染有较成熟的诊断技术，并有较有效的阻断母婴传播的方法和保护胎儿减少或预防后遗症的治疗措施。支持观点：TORCH感染可能致畸，影响人口素质。我国TORCH感染的特异IgM抗体检出率为3.15至15.54，对孕妇进行TORCH特异性实验室检查是有必要的。需要在临床实验室建立一个切实可行的TORCH检测及报告程序。,
13、董悦对围产期TORCH感染筛查的重新评价中华妇产科杂志，2004，39：725-728林贵高，李金明.临床实验室建立ToRCH检验程序的重要性.中华检验医学杂志，2008年7月第31卷第7期.,2023/7/8,临检中心推荐的TORCH检测程序,Munro SC,et al.J Clin microbiol,2005,43:4713-4718,2023/7/8,2、没有按照TORCH检测程序进行筛查此程序仅是临检中心的推荐程序，没有强制执行。筛查程序的第一步仍旧做得不够好，TORCH-IgG/M的试剂质量尚无标准。只有个别实验室进行抗体亲和力检测，尚无SFDA批准的试剂，没有普遍开展。进一步的
14、检测方法不完善。,2023/7/8,四、质量控制,1、没有国家标准、没有行业标准。2、没有质控品和质控体系。3、临检中心室间质评的结果不理想。,目前临床实验室多采用ELISA法进行TORCH各项目的检测，影响测定结果的原因很多:试剂、人员操作、仪器设备状态。其中试剂是主要影响因素，国外同类产品间的差异也很大。,Hofgartner WT，swanzy SR，Bacina RM，et al J Clin Microbiol，1997，35：3313-3315Wilson M，Remington JS，Clavet C J Clin Microbiol，1997，35：3112-3115,2023
15、/7/8,王露楠,李金明,张瑞.TORCH血清学检测室间质量评价分析.中华检验医学杂志，2008年7月第31卷第7期.,2023/7/8,TORCH感染的检测方法,2023/7/8,间接ELISA法检测TORCH-IgG抗体,2023/7/8,间接ELISA法检测TORCH-IgM抗体,血清需用吸附剂去除特异性IgG和RF因子的干扰,2023/7/8,捕获ELISA法检测TORCH-IgM抗体（中和抗原法）,此反应模式被国外普遍采用,2023/7/8,捕获ELISA法检测TORCH-IgM抗体（酶标记抗原法）,此反应模式被国内普遍采用,2023/7/8,间接法检测TORCH-IgM抗体的干扰因
16、素,血清中特异性IgG抗体竞争结合固相抗原,IgM型RF因子造成假阳性,假阴性,假阳性,2023/7/8,捕获法一步法检测IgM反应模式：国内外都是两步法的反应模式；一步法反应模式从原理上讲不能避免特异性IgG抗体的干扰。,2023/7/8,IgG抗体亲合力(Avidity)测定,机体感染病原体后,初次免疫应答后产生的抗体,通常为低亲合力,经过数周或数月后,经过亲和力成熟的过程,其与抗原的互补更好,而成为高亲合力抗体。,2023/7/8,IgG亲和力检测可以帮助区分是否为原发感染，因为低亲和力的IgG抗体出现在感然后的前几个月，随着时间的推移，抗体逐渐成熟为高亲和力的抗体。感染后3个月内的血清
17、样本IgG亲和指数一般为21%13%，既往感染、复发感染和再次感染的亲和指数一般为78%10%。IgG亲和力指数与感染时间的关系如下图：,Diagnosis and Management of Human Cytomegalovirus Infection in the Mother,Fetus,and Newborn Infant.CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS,Oct.2002,p.680715,2023/7/8,IgG抗体亲和力检测在国外开展比较普遍，但国内尚没有亲和力检测试剂盒上市。以IgG抗体动态监测代替IgG亲和力检测：对于IgG和IgM同时阳性的样本，
18、建议2周后重新取样，与第一次取样同时检测，稀释4个滴度（1:2、1:4、1:8、1:16）。IgG和IgM抗体检测值和滴度没有变化：IgM假阳性。IgG抗体滴度4倍升高：复发感染。IgG和IgM抗体检测值升高：急性原发感染。,2023/7/8,安图TORCH产品介绍,2023/7/8,安图做TORCH产品有10年时间，有较好的技术和市场积淀。2006年开始对产品质量进行再改进，2010年获得批准文号，该产品经历了四年的再研发，质量上有一个质的飞跃。与前意大利DiaSorin公司的技术总监进行技术合作关系。从研发到生产各个环节的质量控制保证了产品质量。,2023/7/8,安图TORCH产品文号齐
19、全,巨细胞病毒IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400393号 弓形虫IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400394号风疹病毒IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400396号单纯疱疹病毒1型IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400391号单纯疱疹病毒2型IgG抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400395巨细胞病毒IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400938号 弓形虫IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2
20、010第3400939号 风疹病毒IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400941号单纯疱疹病毒1型IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400937号 单纯疱疹病毒2型IgM抗体测定试剂盒(酶联免疫法)国食药监械(准)字2010第3400940号,2023/7/8,安图TORCH产品包装精美,2023/7/8,安图TORCH十项反应模式相同加样变色不同,TORCH-IgG,TORCH-IgM,2023/7/8,安图TORCH产品完善的质量控制体系,以国际上知名的同类产品为参照建立企业内控盘Diasorin virion/serion FO
21、CUS Trinity按照公司质控体系的要求对企业盘的性能进行了详细的研究用企业内控盘对产品生产各环节进行质量控制用国际上认可的商品化质控盘完善质控体系,2023/7/8,2023/7/8,国际商业化样本盘BBI检测,CMV-IgG QTC711,符合率100%,2023/7/8,国际商业化样本盘BBI检测,CMV-IgG 血清转化盘PTC901 灵敏度与雅培一致,2023/7/8,国际商业化样本盘BBI检测,CMV-IgM 血清转化盘PTC901 灵敏度与雅培一致,2023/7/8,国际商业化样本盘BBI检测,RV-IgM 样本盘PTR201 与雅培符合率100%,2023/7/8,国际商业化样本盘BBI检测,RV-IgG 样本盘PTR201 与雅培符合率100%,2023/7/8,2023/7/8,谢谢！愿与各位同仁共同推进TORCH检测的规范化,
