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1、美德声TORCH试剂盒操作演示,1.IgM试验操作,1.试剂盒从冰箱取出，室温下放置20-30分钟，恢复到常温。,2.稀释样本10微升血清加入到1ml样本稀释液（DILSPE）中，稀释比例1：101.,我是样本稀释液,3.配制抗原抗体酶复合物,1.9ml抗原稀释液,冻干抗原粉,抗原稀释液,酶结合物,100微升酶结合物,混匀,混匀,复合物配制好要一个小时后才能用哦！最好在加样前配好,配好后没用完的复合物要放在-20保存,4.制备洗涤液,我是洗液，根据用量把我进行20倍稀释就好了,5.加样,按以下表格加入样本、阴阳性对照及标准品,不要把我们弄错哦,注：标准品用瓶身上标记的量的蒸馏水溶解，阴阳性对照
2、不用稀释，直接可用,黄色的是阴性对照,标准品,绿色的是阳性对照,6.第一次孵育37，孵育60min,7.洗 板 每个微孔用350洗液，洗5次,8.加入抗原抗体酶结合物,除了空白孔外，每个微孔内加入100微升之前配制的抗原抗体酶结合物。,9第二次孵育,跟第一次孵育一样，还是37，孵育60分钟,10.洗板,跟第一次洗板一样，还是每个微孔用350洗液，洗5次,11.加入色原/底物,每一个微孔内加入100微升，室温下避光孵育20分钟。注：计时要从加第一个孔时开始哦！,12.加入终止液,也是每孔加100微升终止液可是硫酸哦，使用时要小心！,13.酶标仪读数,在450nm和620-630nm波长处判读结果
3、，阳性结果可做确认实验进行确认。,结果判读,质控组判断：符合以下判断表示试验过程可靠：A1为空白孔，其OD值0.05B1,C1孔阴性对照OD平均值小于0.15；CV值30%标准品S/Co1.5阳性对照OD值0.75结果判断：Cut-off值=阴性对照平均值+0.25 S/Co1.0 阴性结果 1.0S/Co1.2 灰区 S/Co1.2 阳性结果,二、确认试验,1.样本稀释、抗原抗体酶复合物（以下称A液）配制跟刚才是一样的。唯一不同的是酶复合物的配制（以下称B液）,用抗原稀释液对酶结合物进行20倍稀释就行。不需要再加入任何抗原物质！,2.按下表加样,3.孵育、洗板37孵育60分钟，然后洗板。（同
4、刚才的试验是一样的）,4.按下表加入酶复合物,剩下操作和刚才的试验一样孵育 60min 洗板 加入底物 20min 加入终止液 酶标仪读数,结果解释,结果阴阳性判断同刚才试验也一样,三 IgG试剂盒的操作,1.试剂盒从冰箱取出，室温下放置20-30分钟，恢复到常温。,2.稀释样本,10微升血清加入到1ml样本稀释液（DILSPE）中，稀释比例1：101.,我是样本稀释液,3.加样,按下表加样，都为100微升（定性实验）,六瓶不同浓度的标准品，无需稀释，直接可用。定性试验只用1、2和6号标准品就行,4.孵育,37，孵育60min,5.洗板,每个微孔用350洗液，洗5次,6.加入酶标二抗,除了空白
5、孔外，其他孔内都加入100微升,直接可用，不需要任何稀释,7.孵育,37，孵育60min,8.洗板,每个微孔用350洗液，洗5次,9.加入色原/底物,每一个微孔内加入100微升，室温下避光孵育20分钟。注：计时要从加第一个孔时开始哦！,10.加入终止液,也是每孔加100微升终止液可是硫酸哦，使用时要小心！,11.酶标仪读数,在450nm和620-630nm波长处判读结果,12.结果判读,质控组判断：符合以下判断表示试验过程可靠：A1孔为空白孔，其450nm处OD值 标准品1的OD值+0.100标准品6的OD值 1.000结果判断：定性检测：样本中抗体吸光度低于标准品2的吸光度时，为阴性结果；反之，为阳性结果。标准品2（50IU/ML）被美国国家临床实验标准委员会（NCCLS）认为该浓度是IgG抗体提供有效保护防止病毒二次感染的最低浓度。,大功告成！谢谢,
