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1、简答/问答,28试述在大肠杆菌DNA复制中各种酶和其他蛋白质因子在前导链和滞后链合成中的功能。29为什么说DNA的复制是半保留复制？如何证明？30为什么说DNA的复制方式是半不连续复制？31简述DNA复制时酶系。32.DNA复制的基本规律？33.图解表示复制叉及参与的生物大分子物质。,34.简述原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶有何不同？35.简述RNA转录的过程？36简述真核生物的转录后修饰的主要特点。,37假定阅读框开始于下列每个核苷酸序列的头三个碱基，预计以它们为mRNA模板在蛋白质合成中所形成肽链的氨基酸顺序。（1）GGUCAGUCGCUCCUCCUGAUU（2）UUGGAUGCGCCA
2、UAAUUUGCU 38以原核生物为例，试述蛋白质的生物合成过程。39.简述原核生物和真核生物翻译起始复合物的生成有何不同。40.tRNA的二级结构为三叶草结构?有什么作用?,名词解释,1、氨基酸的等电点：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值，用符号pI表示。2、结构域(domain)：指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。3、酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并催化底物发生化学反应的部位，称为酶的活性中心。4、糖异生：由非糖物质如乳酸、甘油等在肝中转变为糖的过程。5、氧化磷酸化：生物氧化的释能反应同时伴有ADP磷酸化生成ATP的吸能反应
3、，二者偶联，称为氧化磷酸化。6、呼吸链：定位于线粒体内膜，由一组H和电子传递体按一定顺序排列所构成的，能把还原当量(2H=2e2H)氧化成H2O的反应链称为呼吸链。7、DNA半保留复制（semiconservative replication）：一个亲代DNA分子复制一次所得到的两个子代DNA分子，两条链里的一股是来自亲代，另一股是新合成的，即“新、旧”各半，称半保留复制。8、不对称转录：双链DNA分子上分布着很多基因，并不是所有基因的转录均在同一条DNA单链上，而是一些基因在这条单链转录，另一些基因的转录在另一条单链上，DNA双链一次只有一条链(或某一区段)可作为模板转录，称之为不对称转录9
4、、酶原的激活：有些酶在细胞内合成和初分泌时，并不表现有催化活性，这种无活性状态的酶的前身物称为酶原。酶原在一定条件下，受某种因素的作用，酶原分子的部分肽键被水解，使分子结构发生改变，形成酶的活性中心，无活性的酶原转化成有活性的酶称酶原的激活。,10、核酶(ribozyme)：具有酶促活性的RNA称为核酶11米氏常数（Km值）：米氏常数（Km值）：用m值表示，是酶的一个重要参数。m值是酶反应速度（V）达到最大反应速度（Vmax）一半时底物的浓度（单位M或mM）。米氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。12多酶体系（multienzyme system）：由几个酶彼此
5、嵌合形成的复合体称为多酶体系。多酶复合体有利于细胞中一系列反应的连续进行，以提高酶的催化效率，同时便于机体对酶的调控。多酶复合体的分子量都在几百万以上。13变构酶（allosteric enzyme）：或称别构酶，是代谢过程中的关键酶，它的催化活性受其三维结构中的构象变化的调节。14同工酶（isozyme）：是指有机体内能够催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。15酶的比活力（enzymatic compare energy）：比活力是指每毫克蛋白质所具有的活力单位数，可以用下式表示：比活力=活力单位数/蛋白质量（mg）16、操纵子（Operon）：在转录水平上控
6、制基因表达的协调单位，包括启动子（P）、操纵基因（O）和在功能上相关的几个结构基因。17冈崎片段（Okazaki fragment）：一组短的DNA片段，是在DNA复制的起始阶段产生的，随后又被连接酶连接形成较长的片段。在大肠杆菌生长期间，将细胞短时间地暴露在氚标记的胸腺嘧啶中，就可证明冈崎片段的存在。18复制叉（replication fork）：复制 DNA分子的 Y形区域。在此区域发生链的分离及新链的合成。19前导链（leading strand）：DNA的双股链是反向平行的，一条链是5/3/方向，另一条是3/5/方向，上述的起点处合成的领头链，沿着亲代DNA 单链的3/5/方向（亦即新
7、合成的DNA沿5/3/方向）不断延长。所以领头链是连续的。20滞后链（lagging strand）：已知的DNA聚合酶不能催化DNA链朝3/5/方向延长，在两条亲代链起点的3/端一侧的DNA链复制是不连续的，而分为多个片段，每段是朝5/3/方向进行，所以随后链是不连续的。,22内含子（intron）：真核生物的mRNA前体中，除了贮存遗传序列外，还存在非编码序列，称为内含子。23外显子（exon）：真核生物的mRNA前体中，编码序列称为外显子。24.反密码子（anticodon）：在tRNA链上有三个特定的碱基，组成一个密码子，由这些反密码子按碱基配对原则识别mRNA链上的密码子。反密码子与
8、密码子的方向相反。25 顺反子（cistron）:基因功能的单位；一段染色体，它是一种多肽链的密码；一种结构基因。26.核酸的变性、复性（denaturation、renaturation）：当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时，其中的氢键便断开，双链DNA便脱解为单链，这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的温度下，分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。27 退火（annealing）：当将双股链呈分散状态的DNA溶液缓慢冷却时，它们可以发生不同程度的重新结合而形成双链螺旋结构，这现象称为“退火”。28.增色效应（hyper chrom
9、ic effect）：当DNA从双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时，它在260nm处的吸收便增加，这叫“增色效应”。29.减色效应（hypo chromic effect）：DNA在260nm处的光密度比在DNA分子中的各个碱基在260nm处吸收的光密度的总和小得多（约少35%40%）,这现象称为“减色效应”。,30.发夹结构（hairpin structure）：RNA是单链线形分子，只有局部区域为双链结构。这些结构是由于RNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇，形成氢键结合而成的，称为发夹结构。31.DNA的熔解温度（Tm值）：引起DNA发生“熔解”的温度变化范围只不过几度，这个温
10、度变化范围的中点称为熔解温度（Tm）。32.分子杂交（molecular hybridization）：不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。33、增强子(enhancer)：指一种能够提高转录效率的顺式调控元件，远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列34：启动子promoter：指RNA聚合酶结合并起动转录的DNA序列。真核启动子一般包括转录起始点及其上游约100200bp序列，包含有若干具有独立功能的DNA
11、序列元件，每个元件约长730bp35：底物磷酸化：这种直接利用代谢中间物氧化释放的能量产生ATP的磷酸化类型称为底物磷酸化。,36、两性离子（dipolarion）：指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷，又称兼性离子或偶极离子。37、蛋白质的三级结构：指蛋白质在二级结构的基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的构象。38、凝胶电泳：以凝胶为介质，在电场作用下分离蛋白质或核酸等分子的分离纯化技术。39、顺反子（cistron）:基因功能的单位；一段染色体，它是一种多肽链的密码；一种结构基因。40、DNA的熔解温度（Tm值）：引起DNA发生“熔解”的温度变化范围只不过几度，这个温度
12、变化范围的中点称为熔解温度（Tm）。41、分子杂交（molecular hybridization）：不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。42、辅基：酶的辅因子或结合蛋白质的非蛋白部分，与酶或蛋白质结合得非常紧密，用透析法不能除去。43、激活剂：凡是能提高酶活性的物质，都称激活剂，其中大部分是离子或简单的有机化合物。44、抑制剂：能使酶的必需基团或酶活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶的催化活性甚至使酶的催化活性完全丧失的物质。,45、诱导酶
13、：是指当细胞中加入特定诱导物后诱导产生的酶，它的含量在诱导物存在下显著增高，这种诱导物往往是该酶底物的类似物或底物本身。45、酶原：酶的无活性前体，通常在有限度的蛋白质水解作用后，转变为具有活性的酶。46、：磷氧比：电子经过呼吸链的传递作用最终与氧结合生成水，在此过程中所释放的能量用于ADP磷酸化生成ATP。经此过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数（也是生成ATP的分子数）称为磷氧比值（PO）。如NADH的磷氧比值是3，FADH2的磷氧比值是2。47、底物水平磷酸化：在底物被氧化的过程中，底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键（或高能硫酯键），由此高能键提供能量使ADP（或GDP）磷
14、酸化生成ATP（或GTP）的过程称为底物水平磷酸化。此过程与呼吸链的作用无关，以底物水平磷酸化方式只产生少量ATP。48、糖异生：非糖物质（如丙酮酸 乳酸 甘油 生糖氨基酸等）转变为葡萄糖的过程。49、糖酵解途径：糖酵解途径指糖原或葡萄糖分子分解至生成丙酮酸的阶段，是体内糖代谢最主要途径。50、磷酸戊糖途径：磷酸戊糖途径指机体某些组织（如肝、脂肪组织等）以6-磷酸葡萄糖为起始物在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程，又称为磷酸已糖旁路。51、脂肪酸的-氧化：脂肪酸的-氧化作用是脂肪酸在一系列酶的作用下，在碳原子和碳原子之间断裂，碳原子氧化成羧基生
15、成含2个碳原子的乙酰CoA和比原来少2个碳原子的脂肪酸。52、衰减子：位于结构基因上游前导区调节基因表达的功能单位，前导区转录的前导RNA通过构象变化终止或减弱转录。53、腺苷酸环化酶：催化ATP焦磷酸裂解产生环腺苷酸（cAMP）的酶。,中英文缩写互译,1NAD+（nicotinamide adenine dinucleotide）：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸；辅酶。2FAD（flavin adenine dinucleotide）：黄素腺嘌呤二核苷酸。3THF（tetrahydrofolic acid）：四氢叶酸。4NADP+（nicotinamide adenine dinucleotide p
16、hosphate）：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸；辅酶。5FMN（flavin mononucleotide）：黄素单核苷酸。6CoA（coenzyme A）：辅酶A。7.cAMP:腺苷酸环化酶8ATP，腺苷三磷酸9.hnRNA,核不均一RNA10bZip：碱性亮氨酸拉链结构,填空,1大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_%，如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为_%。2在20种氨基酸中，酸性氨基酸有_和_2种，具有羟基的氨基酸是_和_，能形成二硫键的氨基酸是_.3蛋白质中的_、_和_3种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。4精氨酸的pI值为10.76,将其溶于
17、pH7的缓冲液中，并置于电场中，则精氨酸应向电场的_方向移动。1 16；6.25 2 谷氨酸；天冬氨酸；丝氨酸；苏氨酸3 苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；紫外吸收 4 负极,6-螺旋结构是由同一肽链的_和 _间的_键维持的，螺距为_,每圈螺旋含_个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为_。天然蛋白质分子中的-螺旋大都属于_手螺旋。7鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有_和_。8当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_离子形式存在，当pHpI时，氨基酸以_离子形式存在。9谷氨酸的pK1(-COOH)2.19,pK2(-NH+3)=9.67,pKR(R基)=4.25,谷氨酸的等电点为_。6 C=O；N=
18、H；氢；0.54nm；3.6；0.15nm；右7FDNB法（2,4-二硝基氟苯法）；Edman降解法（苯异硫氢酸酯法）8两性离子；负93.22,10一个-螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有_圈螺旋？该-螺旋片段的轴长为_.（50圈；27nm）11、WatsanCrick提出的双螺旋结构中，_处于分子外边，_处于分子中央，螺旋每上升一圈bp数为，两个nt间的距离为（磷酸核糖、碱基、10，0.34nm）12、蛋白质二级结构的形式有_、_和_。(螺旋、折叠、转角、无规则卷曲)13、丙酮酸脱氢酶系包括_、_、_三种酶，_、_、_、_、_五种辅助因子。(丙酮酸 脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛
19、酸脱氢酶、TPP、硫辛酸、FAD NAD CoASH)14、线粒体呼吸链的递氢体和递电子体有_、_、_、_、_。(NAD或NADP、FAD或FMN、铁硫蛋白、辅酶Q、细胞色素类)15、DNA的三级结构是_结构，核小体是由_和_构成(超螺旋、DNA、组蛋白),16、氨基酸在等电点(PI)时，以_离子形式存在，在PHPI时以_离子存在，在PHPI时，以_离子形式存在。(两性离子、负离子、正离子)17、饱和脂酰COA氧化主要经过_、_、_、_四步反应，氧化的终产物是_，每次氧化可产生_克分子ATP。(3、脱氢、加水、再脱氢、硫解、乙酰辅酶A、5)18、大肠杆菌RNA聚合酶全酶由_组成，核心酶组成是_
20、，参予识别起始信号的是_。(5、2、2、)19以NADH为辅酶的脱氢酶类主要是参与_作用，即参与从_到_电子传递作用；以NADPH为辅酶的脱氢酶类主要是将分解代谢中间产物上 的_转移到_反应中需电子的中间物上。(呼吸；底物；氧；电子；生物合成)20在呼吸链中，氢或电子从_的载体依次向_的载体传递。(低氧还电势；高氧还电势)211分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成_分子ATP(2个ATP）22糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应，这些酶是_、_ 和_。(己糖激酶；果糖磷酸激酶；丙酮酸激酶23调节三羧酸循环最主要的酶是_、_ _、_。(柠檬酸合成酶；异柠檬酸脱氢酶；酮戊二酸脱氢酶24糖异生的主要原料为
21、_、_和_。(乳酸；甘油；氨基酸),25.哺乳动物的代谢调节可以在-、-、-和 _ 四个水平上进行。(细胞内酶水平；细胞水平；激素水平；神经水平)26.酶合成的调节分别在、和 三个方面进行。(转录水平；转录后加工和运输；翻译水平)27以RNA为模板合成DNA称，由 酶催化。(反向转录；逆转录酶)30DNA合成时，先由引物酶合成，再由 在其3 端合成DNA链，然后由 切除引物并填补空隙，最后由 连接成完整的链。冈崎片段合成方向为。(RNA引物 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 5-3）31大肠杆菌DNA聚合酶的 活性使之具有 功能，极大地提高了DNA复制的保真度。（35核酸外切酶 校对）
22、32真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列还保留在成熟mRNA中的是，编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。在基因中 被 分隔，而在成熟的mRNA序列被拼接起来。（断裂基因 外显子 内含子 外显子 内含子）,33B型DNA双螺旋的螺距为_，每匝螺旋有_对碱基（3.4nm；10）34糖原合成的关键酶是_；糖原分解的关键是_。（糖原合成酶 磷酸化酶）35糖酵解中催化作用物水平磷酸化的两个酶是_和_。（磷酸甘油酸激酶 丙酮酸激酶）36糖酵解途径的关键酶是_、_和丙酮酸激酶。（己糖激酶（葡萄糖激酶）磷酸果糖激酶）37丙酮酸脱氢酶系由丙酮酸脱氢酶、_和_组成。（硫辛酸乙酰转移酶 二氢硫辛酸脱氢
23、酶 38三羧酸循环过程中有_次脱氢和_次脱羧反应，产生_ATP。（4,2,）39三羧酸循环过程主要的关键酶是_；每循环一周可生成_个ATP。（异柠檬酸脱氢酶,12.5)401个葡萄糖分子经糖酵解可生成_个ATP。2/35-741RNA的转录过程分为_、_和_三个阶段。（起始 延长 终止）42、以DNA为模板合成RNA的过程为_，催化此过程的酶是_。（转录,RNA聚合酶（DNA指导的RNA聚合酶）,43、维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是-（氢键）44、氨基酸在等电点时具有的特点是-，等电点简称-（不带正电荷，PI）45、合成糖原时，葡萄糖的供体是-（UDPG）46、脂肪酸从头合成的酰基载体是
24、-，分解的酰基载体-（ACP，COA）47、胞浆中形成NADH+H+经苹果酸穿梭后，每摩尔产生ATP的摩尔数是-（2.5）48、三羧酸循环中哪一个化合物前后各放出一个分子CO2-（-酮戊二酸）49、识别转录起始点的是-（RNA聚合酶的因子）50、真核生物在蛋白质生物合成中的启始tRNA是-（甲硫氨酸tRNA）,51、核酶研究的意义-，-，-。（核酶的发现，对中心法则作了重要补充；核酶的发现是对传统酶学的挑战；利用核酶的结构设计合成人工核酶。）52所有冈崎片段的延伸都是按 方向进行的。（53）53前导链的合成是 的，其合成方向与复制叉移动方向；随后链的合成是 的，其合成方向与复制叉移动方向。（连
25、续 相同 不连续 相反54DNA聚合酶I的催化功能有、等。（53聚合 35外切 53外切）55、影响酶促反应速度的因素有、和。（E；S；pH；T（温度）；I（抑制剂）；A（激活剂）56、与酶催化的高效率有关的因素有、等。（邻近效应；定向效应；诱导应变；共价催化；活性中心酸碱催化）57、一碳单位主要有-,其载体为-,主要供体为-（-CH3，-CH2，-CH，-CHO等，FH4，AA）58、蛋白质生物合成的进位是指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应_进入核蛋白体A位（氨酰基-tRNA）,计算,一、中性、碱性、酸性氨基酸的等电点计算。二、根据DNA二级结构、复制、转录、翻译的相关参数计算1、若大
26、肠杆菌染色体含有10万个碱基对，在Ecoli染色体复制期间有多少个DNA螺旋必须解开？2、一生物DNA，其双螺旋链的相对分子质量为3107。试计算：（1）DNA链的长度（设每个核苷酸对的平均相对分子质量为650）。（2）编码88个核苷酸的rRNA的基因有多长？（3）编码细胞色素b（105个氨基酸）的基因有多长（不考虑起始和终止序列）？,三、根据反应速度与底物浓度关系式计算。1、某酶 的Km值为5.0mol/L。问酶活性部位被底物饱和的分数分别为20%、60%时的底物浓度分别是多少？2、1）对于一个遵循米氏动力学的酶而言，当S=Km时，若V=35mol/min，Vmax是多少mol/min？（2
27、）当S=210-5mo/L，V=40mol/min，这个酶的Km是多少？（3）若I表示竞争性抑制剂，Ki=410-5mol/L，当S=310-2mol/L和I=310-5mol/L时，V是多少？,四、根据三联体密码子等计算1、一噬菌体DNA，其双螺旋链的相对分子质量为2106。试计算：（1）若些DNA分子50%的碱基用来编码蛋白质，能编码多少个氨基酸（设每个核苷酸对的平均相对分子质量为670）？形成多少个肽键？内含子有多少个碱基？（2）若编码的蛋白质平均分子量为50 000，能编码多少个蛋白质分子(设氨基酸的平均相对分子质量为118)？五、能量利用率计算(EMPTC A脂肪分解)六、蛋白质含量计算1、大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_%，如测得1克样品含氮量为100mg,则蛋白质含量为_%,2、称取25mg蛋白酶配成25mL溶液，取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1mL溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500g酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1g酪氨酸的酶量，则酶溶液的蛋白浓度为多少？,
