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1、全球基金疟疾项目镜检技术培训（一）,户县疾病预防控制中心2012年3月28日,内 容,疟原虫与疟疾疟原虫的生活史疟原虫检验技术血检质量评估,疟原虫与疟疾（一）,疟原虫是疟疾的病原体，寄生于人体的红细胞和肝细胞内。疟疾、艾滋病和结核最严重的三大传染病。疟疾流行于热带和亚热带，遍及88个国家，近30亿人口受到疟疾的威胁，约占全球总人数的48.30%；每年有2-3亿患者，死亡人数达150-200万（WHO）。疟原虫分布于热带、亚热带地区，尤以亚非拉为甚。在我国以海南、云南为主要流行区。,疟原虫与疟疾（二）,疟原虫有明显的宿主选择性，目前已知疟原虫种类 有130多种，寄生于人体的疟原虫有四种，即：间日
2、疟原虫(P.vivax),恶性疟原虫(P.falciparum),三日疟原虫(P.malariae),卵形疟原虫(P.ovale)。分别引起间日疟、恶性疟、卵形疟及三日疟。四种疟原虫中，以间日疟原虫和恶性疟原虫最常见,2010年我国疟疾疫情（周水生等 2011）,23省区1191县报告7855例，比2009下降45.8%。报告疑似病例34082，死亡19例。病例最多的为云南、安徽、湖北、河南、贵州，占79.2%。云南、海南高传播区病例占总数的34.6%（2721），其中海南仅占2.9%。安徽、湖北、河南及江苏疫情不稳定地区报告的病例总数占全国报告病例总数的45.5%（3572）其他疫情基本控制
3、的省区占19.9%。福建、重庆、江西和陕西等省（市）的报告病例数均较上年有上升，其中陕西省41例，较上年上升141.2%。全年报告恶性疟1258例，占疟疾总报告病例数的16.0%。其中当地感染的恶性疟97例，占恶性疟报告病例数的7.7%，仅分布于云南。报告输入性恶性疟1161例，占恶性疟报告病例数的92.3%，较上年（897例）上升29.4%。除西藏、黑龙江和山西外的20个省(市、区)均有输入性恶性疟报告。,我国疟疾疫情分析,2010年全国疟疾疫情在2009年疫情回落的基础上继续明显下降，报告疟疾病例数已首次减至10000例以下,为历史最低水平。综合分析疟疾疫情，有以下几方面值得引起关注：,中
4、部以安徽为中心沿黄淮流域地区的疟疾疫情回升的势头得到有效遏制，但输入性疟疾病例仍呈逐年上升的趋势。安徽、河南、湖北和江苏等4省的疟疾报告病例数占全国总报告数的比例已连续6年超过南部疟疾高传播地区（云南和海南两省）所占的比例。,云南省疟疾流行虽得到有效控制，但境外的疟疾输入对云南边境地区疟疾疫情产生的影响仍未得到有效改善。海南省疟疾疫情已降至历史最低水平，并首次出现无本地恶性疟病例报告，但报告的疑似病例数是疟疾病例数的100倍，提示需加强对医务人员的培训力度，进一步提高疟疾确诊能力，加大对报告病例核实效力。,近年来劳务输出数量逐年增加，导致归国劳务人员中输入性疟疾病例也逐渐增多，多省的输入性恶性
5、疟病例数多于往年，大多为自缅甸和非洲等恶性疟高发区的劳务归国人员。2010年有20个省（市、区）有输入性恶性疟病例的报告，病例数所占总恶性疟报告数的比例从上年的87%上升至92%。,疟原虫在人体红细胞内期的形态,红细胞内期形态包括：早期滋养体（环状体）、晚期滋养体（滋养体）、早期裂殖体（未成熟裂殖体）、晚期裂殖体（成熟裂殖体）及配子体（雌/雄）。临床实验室多采用Wrights 染色，其染色结果为：红核;蓝质；棕色的疟色素。间日疟原虫（P.v）恶性疟原虫（P.f）,早期滋养体（环状体）胞质淡兰色、呈环状、较粗，约为红细胞直径的1/3；红色的胞核多为1个、偶有2个；一个红细胞内通常只寄生1个疟原虫
6、。环状体寄生的红细胞无变化。,间日疟原虫形态(一),早期滋养体（环状体）,晚期滋养体 兰色胞质有伪足伸出，空泡明显，形态不规则，疟色素棕黄色，细小杆状，分散在胞质内；1个红色的胞核。感染的红细胞变大，染色变淡，出现红色、细小数多的薛氏点。,间日疟原虫形态(二),晚期滋养体,未成熟裂殖体 核开始分裂，约为2-10个，胞质随着核的分裂渐呈圆形，空泡消失，疟色素开始集中，但分布不均。,间日疟原虫形态(三),成熟裂殖体 虫体充满红细胞，核分裂为12-24个，分裂的胞质围绕着每个核，形成12-24个裂殖子，疟色素集中呈堆。,间日疟原虫形态(四),成熟裂殖体,雄配子体 虫体呈圆形，胞质蓝色，略带红色；核大
7、疏松，淡红色，居中；疟色素分散。,间日疟原虫形态(五),雌配子体 虫体呈圆形或卵圆形，胞质深蓝色；核小、致密、深红色，偏向一侧；疟色素分散。,恶性疟原虫形态,恶性疟原虫感染者的外周血中仅见环状体和配子体,早期滋养体（环状体）兰色胞质呈环状、纤细，约为红细胞直径的1/5；红色的胞核12个；红细胞内常有2个或几个疟原虫寄生，虫体常位于红细胞边缘。感染的红细胞无变化。,恶性疟原虫形态（一）,早期滋养体（环状体）,雄配子体 腊肠形，两端钝圆；胞质蓝而略带红色；核疏松、淡红色，居中；疟色素黄棕色、分布核周。,恶性疟原虫形态（二）,雄配子体,雌配子体 新月形、两端较尖；胞质深蓝色；核致密深红色，居中；疟色
8、素黑褐色、分布核周。,雌配子体,疟原虫生活史,在蚊体内的发育在人体内的发育（重点）1.在肝细胞内的发育（红细胞外期红外期）2.在红细胞内的发育（红细胞内期红内期）3.配子体形成(有性生殖的开始),疟原虫生活史（一）,红细胞外期：子孢子是疟原虫的感染期。按蚊刺吸人血时，子孢子随唾液进入人体血循环，经30分钟1小时进入肝细胞，进行裂体增殖形成红外期裂殖体。成熟的红外期裂殖体内含有数以万计的裂殖子，肝细胞胀破，裂殖子释放入血，这一期为红细胞外期。间日疟原虫需要8天（速发型），恶性疟原虫需要6天。裂殖子去向：被吞噬细胞吞噬。进入红细胞内发育。,红细胞外期（红外期）红外期裂殖体 子孢子 红外期裂殖子,疟
9、原虫生活史（二）,红细胞内期：裂殖子进入红细胞，以血红蛋白为营养进行裂体增殖，依次发育为小滋养体（环形体）、大滋养体、繁殖体，裂殖体成熟后胀破红细胞，释放裂殖子，此为红细胞内期。完成一代裂体增殖，间日疟原虫需要约48小时，恶性疟原虫需要36-48小时。裂殖子去向：被吞噬细胞吞噬。进入其他正常红细胞，重复其裂体增殖。形成配子体,红细胞内期（红内期）早期滋养体 晚期滋养体 裂殖子 未成熟裂殖体 成熟裂殖体（裂体生殖）,疟原虫生活史（三）,配子体形成：疟原虫经过几代裂体增殖后，有些裂殖子侵入红细胞后不在进行裂体增殖而发育为雌、雄性配子体。雌雄配子体的形成是疟原虫有性生殖世代的开始。成熟的配子体若被适
10、宜的按蚊吸入后，在蚊胃内进行有性繁殖；否则在人体内经过3060天即衰老变性，被吞噬细胞消灭。,疟原虫生活史（四）,疟原虫在按蚊体内的发育：当雌性按蚊刺吸疟疾患者或带虫者血时，疟原虫随血进入蚊胃，除配子体外的其他各期均被消化。在蚊胃内，雌、雄配子体逐渐发育为雌、雄配子，雄配子钻进雌配子体内，受精形成合子。合子变长、能动、成为动合子。动合子穿过胃壁，在弹性纤维膜下形成圆形卵囊。卵囊长大，囊内的核和胞质反复分裂进行孢子增殖，生成成千上万的子孢子。子孢子随卵囊破裂释出或由囊壁上的微孔逸出，随血淋巴集中于按蚊的唾腺，当受染蚊再吸血时，子孢子即可随唾液进入人体，又开始人体内的发育。间日疟原虫需要9-10天，恶性疟原虫需要10-12天。,配子体 配子()()合子 子孢子 卵囊 动合子,疟原虫生活史（五）,实验诊断方法,1病原检查 血膜染色镜检 最好一张玻片上同时制作厚、薄两种血膜，瑞氏或吉氏染色、镜检。选择适宜的采血时间：恶性疟在发作开始时，间日疟在发作后数小时至10余小时采血。,2、免疫学诊断（了解）循环抗体检测-间接荧光抗体实验、酶联免疫吸附实验 循环抗体检测-放射免疫实验、夹心法酶联免疫吸附实验3、分子生物学技术（了解）,
