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1、第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌,第一节 肠杆菌科,概念:是一大群生物学性状相近的革兰阴性杆菌。分类及临床意义:临床常见有15个菌属,占临床分离菌总数的50%,和G-总数的80%;近50%的败血症、70%的泌尿道感染和大量的肠道感染均由肠杆菌科细菌引起,与医学关系密切的肠道杆菌,条件致病菌,埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属肠杆菌属沙雷菌属枸橼酸菌属,致病菌菌,致病性大肠埃希菌志贺菌属沙门菌属耶尔森菌属,肠道杆菌共同特性,形态染色:均为革兰阴性杆菌,无芽孢,有菌毛,多数有鞭毛(除外志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭毛),少数有荚膜,培养特性:需氧、兼性厌氧;营养要求不高;光滑型菌落;
2、,常用培养基,选择性培养基:SS平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿、硫代硫酸钠等 Mac平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐等中国蓝平板:含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指示剂、EMB平板:含乳糖、伊红和美蓝指示剂,选择性平板的特点,均含有乳糖和酸碱指示剂:细菌分解乳糖产酸,使培养基pH降低,指示剂呈酸性变色,指示剂不同,菌落呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有色菌落,不分解乳糖的细菌为无色菌落含有不同的抑制剂:对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的抑制作用,因此可以选择性的培养肠道致病菌。,选择平板细菌生长现象,双糖铁培养基(KIA),配方:含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、琼脂、酚红、乳糖
3、1、葡萄糖0.1用途:主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2S。,KIA结果观察:,发酵葡萄糖:底层呈酸性反应(黄色),斜面为碱性反应(红色),若发酵葡萄糖产酸产气,底层同时有气泡发酵葡萄糖和乳糖:底层和斜面均呈酸性反应(黄色)产生H2S:培养基变黑,1.未接种细菌,3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性(AA),2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(AA),4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(KA),5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性(KA),生化反应:氧化酶;触酶;硝酸盐还原试验发酵葡萄糖 非致病菌多数分解乳糖,致病菌多数不分
4、解乳糖 其他生化反应:KIA、IMViC、MIU肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阳性。,抗原结构O抗原:化学成分为脂多糖H抗原:化学成分为蛋白质表面抗原:化学成分为多糖(埃希菌属称为K抗原;沙门菌属称为Vi抗原;志贺菌属称为B抗原)O抗原、H抗原为血清分群分型的依据表面抗原可阻抑O抗原、H抗原凝集,加热可解除。,遗传变异:S-R变异、H-O变异抵抗力 对胆盐,煌绿耐受,临床意义:致病物质:菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素传染途径:肠道传染、肠道外传染所致疾病:肠道致病菌:以肠内感染为主,腹泻为共显症状,引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻及肠热症等。鼠疫耶尔森菌引起鼠疫条件致病菌:是医院感染的主要病原菌,出现移位感染(呼吸道、泌尿道、伤口、中枢神经系统),微生物学检验,标本采集肠道标本:新鲜粪便肠外标本:根据感染部位不同采集不同标本,检验程序,肠道杆菌的生化反应鉴定,定科试验与其他科细菌鉴别:,初步分群,肠道杆菌属间鉴定,微量生化反应系统鉴定,将细菌的多项生化反应的2进制数结果数,转换成8进制编码而汇集成册,丛编码的检索表中检索而确定细菌菌名,010011100011100,