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1、Transwell,简介,Transwell是一种实验技术,其主要材料是Transwell小室,其外形为一个可放置在孔板里的小杯子。其关键部分是杯子底层的通透性可支持物(滤膜),而杯子其余部分的材料与普通的孔板(聚苯乙烯)是一样。滤膜有三种材料:聚酯(PC)、聚碳酯(PET)和胶原包被的聚四氟乙烯(PTFE)。一般常用的是聚碳酸酯膜,膜上的孔径大小范围是0.112.0um。,使用方法,将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影
2、响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。,应用,共培养体系:小于3.0um孔径条件下,细胞不会迁徙通过,因此,若研究不涉及细胞运动能力,不需要细胞穿过聚碳酸酯膜,则应选择3.0um以下孔径。常用0.4、3.0um。将细胞A种于上室,细胞B种于下室,可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。,趋化性实验:可用5.0、8.0、12.0um膜,上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室,计数进入下室的细胞量可反映下室成分对上室细胞的趋化能力。细胞B对细胞A的趋化作用:将细胞A种于上室,细胞B种于下室,可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的趋化作用 趋化因子对细胞的趋化作用:将细胞种于上室,下室加入某种趋化因子,可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。,肿瘤细胞迁移实验:常用8.0、12.0um膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑,计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。肿瘤细胞侵袭实验:常用8.0、12.0um膜,原理与肿瘤细胞迁移实验类似。不同点在于,侵袭实验会在小室的滤膜上涂一层基质胶,增强细胞迁移的阻力,进一步确认肿瘤细胞的侵袭能力。,Thank you!,