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1、第27章 双股DNA病毒,第一节 痘病毒科(Poxviridae)第二节 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科第三节 疱疹病毒科(Herpesviridae)第四节 腺病毒科（Adenoviridae）,第一节 痘病毒科(Poxviridae),本科若干成员在病毒学上有重要意义。Jenner(1798)描述的用牛痘病毒预防人类天花，是病毒免疫的里程碑。目前痘苗病毒及其他痘病毒被作为基因工程疫苗的载体广泛应用，鸡痘、羊痘及羊口疮危害较严重，牛痘病毒具有公共卫生意义，黏液瘤及皮肤疙瘩病病毒等是检疫对象。,分 类,本科分两个亚科:脊椎动物痘病毒亚科及昆虫痘病毒亚科。前者又分8个属，除疣病毒属外，均对动物有致病
2、性。此外，从蜥蜴、蛙、鹿、袋鼠等新分离的痘病毒尚末鉴定。随着研究的不断深入，对痘病毒的致病性有新的认识，例如昆虫痘病毒原先只知道对昆虫致病，近年来又发现它对鱼类有致病作用。,形态,(1)多为砖形(250nm250nm200nm)；少数为卵圆形(260nm160nm)副痘；（2）衣壳中含类脂与管状或球管状的蛋白质结构，称为DNA芯髓，芯髓之旁为两个侧体，具有囊膜。,主要特征,（1）基因组单分子的线状双股DNA，约 200kb；（2）细胞浆内复制；（3）通过胞吞方式出芽，而非细胞裂解释放出病毒粒子。（4）能在上皮细胞浆中形成胞浆包涵体。,副痘病毒,某些末分类的爬行动物的痘病毒外形为砖状，但表面结构
3、类似副痘病毒。病毒颗粒的外层结构之内是哑铃样的芯髓，以及两个功能不明的侧体(later body)。芯髓内含病毒DNA及若干 蛋白质。其囊膜含有宿 主细胞的类脂成分及某 些病毒特殊蛋白。,抵抗力,（1）怕热：55，20min或37，24h丧失感染力；（2）怕日光和紫外线:可迅速灭活；（3）抗冷，抗干燥；（4）病灶干痘痂，毒力可保存几个月。,传 播,痘病毒在动物间的传播途径如下:皮肤的伤口感染，或由污染环境的直接或间接传染。例如口疮病毒还可通过呼吸道感染，绵羊痘、猪痘、鸡痘及黏液瘤也可通过昆虫叮咬感染。痘病毒感染宿主谱一般较窄，对环境抵抗力较强，在干燥的痂皮中可存活数年之久。,培 养,痘病毒可在
4、发育的鸡胚绒毛尿囊膜上生长，多数可在膜上形成痘斑，如山羊痘、禽痘、牛痘等。痘斑的形态、颜色、大小以及形成的时间因痘病毒的种类而异。黏液瘤病毒引起的痘斑比较小，独立而分散分布，呈灰白色。而牛痘、痘苗病毒常侵害血管，常为出血坏死性的痘斑。可根据痘斑特征，对病毒作出初步鉴定。,致病性,痘病毒可引起各种动物的急性和热性传染病，特征是皮肤和粘膜发生特殊的丘疹和疱疹。兔痘病毒所致的疾病为传染性皮肤纤维瘤和粘液瘤。禽痘病毒所引起的疾病特点是在上皮组织产生增生性和肿瘤性病。,诊断,（1）病毒分离：采取无菌的清朗庖液或取痘斑研磨后，加双抗处理后，鸡胚绒毛尿囊膜接种，在37 孵育57d，可见绒尿膜上形成增生性、坏
5、死性痘疱。（2）病理切片：将绒尿膜固定制作切片，用苏木素和伊红染色，在上皮细胞的胞浆内可以见到嗜酸性包涵体。,1、鸡痘病毒,（1）禽痘病毒属成员。（2）某些毒株具有血凝素：鸡、其它禽类、绵羊等的红细胞。（3）致病性：可分为三种病型，即皮肤型、白喉型和混合型。皮肤型：在鸡冠、肉髯和眼皮等处，产生一种特殊的痘子。白喉型：主要在口腔和咽喉部分，先在粘膜上生成一种黄白色小结节，后逐渐融合形成一层黄白色干酪样的假膜。,轻度感染多无全身变化严重者精神沉郁,禽 痘,食欲减退，贫血、消瘦,禽 痘,头面部痘痂,禽 痘,眼部痘痂,禽 痘,喙部痘痂,禽 痘,喙部痘疹,禽 痘,鸽翅部和头面部痘痂,禽 痘,有时痘疹和痘
6、痂同时存在,禽 痘,鸽腿部和爪部病变,禽 痘,爪部痘痂,禽 痘,爪部严重痘痂，严重时跛行,禽 痘,蛋鸡头面部痘疹和痘痂同时存在,禽 痘,病鸡常有结膜炎,禽 痘,眼睑粘连,眼睑粘连,禽 痘,皮肤无痘疹，只表现呼吸困难、流鼻,禽 痘,皮肤有痘痂，呼吸困难,禽 痘,皮肤型 在病变发展的不同时期可见痘疹、痘痂和痘痂脱落后形成的白色斑痕或溃疡,禽 痘,黏膜型可见口腔黏膜有痘样痂皮,禽 痘,黏膜型鸡痘口腔病变,禽 痘,气管黏膜白色痘疹,禽 痘,气管黏膜密布白色痘疹,禽 痘,防制,目前主要采用鸡痘疫苗进行预防。鸡痘活疫苗：用于35日龄以上的幼鸡，对雏鸡有一定的毒力。鸽痘活疫苗：毒力比鸡痘疫苗弱，用于1日龄雏
7、鸡和产蛋母鸡，一般采用毛囊接种法。鸡痘鹌鹑化活疫苗：毒力很低，雏鸡使用安全，效果良好。注意发病季节，驱除传播本病的蚊、蠓、蜱等吸血昆虫，加强卫生消毒。,2、绵羊痘病毒,（1）致病性：自然条件下只感染绵羊，致全身性疱疹，肺常出现特征性干酪性结节，各种绵羊对绵羊痘病毒的易感性不同，死亡率550%不等。人由于直接接触病羊污染的物质也可感染。（2）培养：可在鸡胚绒毛尿囊膜上、绵羊、山羊、犊牛睾丸细胞培养中生长，并产生明显的CPE。（3）预防：定期接种疫苗，常用羊痘氢氧化铝苗或鸡胚化羊痘弱毒疫苗。,3、山羊痘病毒,（1）该病毒与绵羊痘病毒之间存在共同抗原。（2）在自然条件下仅感染山羊，表现为发热、有粘液
8、性、脓性鼻漏及全身性皮肤丘疹。,4、粘液瘤病毒,（1）致病性：野兔、家兔都非常易感。兔感染48h后出现临床症状，首先眼结膜炎，接着头部广泛肿胀，呈特征性的“狮子头”，严重者体温升高到42，多在48h死亡。澳大利亚曾引入此病毒，以图消灭过剩的野生家兔。（2）培养：鸡胚绒毛尿囊膜，3d后产生直径0.51.0mm的圆形痘疱。,5.口疮病毒(Orf virus),本病毒为副痘病毒属的代表种，引致羊的口疮，又名绵羊接触传染性脓疱皮炎。病毒感染绵羊及山羊，主要是羔羊，黄羊羔也可感染，羚羊感染后发生乳头状瘤，人类与羊接触也可感染。羊口疮广泛分布于包括我国在内的世界养羊地区。,主要特性,病毒比较耐热，5560
9、经30min才能灭活，在-75时十分稳定，在-10时稳定性较差。干燥痂皮在野外可保持毒力达数月之久，于普通冰箱内至少可保存32个月，可被氯仿灭活。对乙醚低度敏感。对pH3.0无耐受力。,诊 断,根据临床症状及流行情况不难作出诊断。必要时可取病羊的水泡、脓疱或痂皮等，作电镜检查可确诊。或接种绵羊睾丸细胞分离病毒。,预防与控制,用含毒的悬液或细胞培养的弱毒，在母羊产羔前数周在腿内侧刺种，可使羔羊获得有效的被动免疫。,第二节 非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科（Asfarviridae and Iridoviridae）,虹彩病毒科：分为4个属，其中2个属与鱼类和两栖类疾病相关。非洲猪瘟病毒科：仅有一个成员
10、，即非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）。这两科的病毒均为：线状双股DNA，20面体对称，有囊膜。,1.非洲猪瘟病毒,为非洲猪瘟的病原体：仅家猪易感；以急性高热为特征，全身出血，病程短，死亡率高；由呼吸道入侵扁桃体和鼻粘膜附近淋巴结增殖血流（病毒血症，红细胞及白细胞中含毒）。,病毒的特点（1）双股DNA，190kb；（2）是唯一已知的核酸为DNA的虫媒病毒。本病毒各个毒株之间免疫原性很低，对同株的免疫力也是短暂的，目前尚无有效疫苗可用。注意：我国目前没有非洲猪瘟，必须严加防范！,第三节疱疹病毒科(Herpesviridae),疱疹病毒在哺乳类、鸟类、爬行
11、类、两栖类、昆虫及软体动物均有发现，除绵羊外的家畜家禽，均可引致重要的传染病，例如牛鼻气管炎病毒、伪狂犬病毒及马立克病病毒等。迄今至少已鉴定100种疱疹病毒，其中至少19种已完成全基因组测序，包括马疱疹病毒1、2及4型、牛鼻气管炎病毒1型、牛恶性卡它热病毒及斑点叉尾鲍疱疹病毒。,主要特性,1、基因组为单分子线状双股DNA，约125235kb。2、直径150nm，162个壳粒组成的20面体对称，有囊膜，囊膜上有糖蛋白的纤突。3、病毒衣壳在细胞核内复制和装配，可形成巨大的包涵体，后经核膜以芽生方式获得囊膜；目前尚不明确如何通过细胞质。,与兽医相关的几个疱疹病毒,伪狂犬病毒（Pseudorrabie
12、s virus）禽传染性喉气管炎病毒（Avian infectious laryngotracheitis virus）马立克病病毒（Mareks disease virus，MDV）鸭瘟病毒（Duck plague virus）,1、伪狂犬病毒,（1）分类地位：为疱疹病毒甲亚科成员，又名猪疱疹病毒1型。（2）致病性 猪为原始宿主，也可感染马、牛、绵羊、山羊及多种野生动物。,主要症状 成年猪多为隐性感染，少数出现轻微发热和神经症状；幼猪感染后呈发热、麻痹、昏迷等症状，死亡率很高；怀孕母猪流产、死胎或木乃伊胎；其它动物感染后死亡率很高，特征症状为体躯某部奇痒。,（3）病毒分布与动物排毒情况 病毒
13、分布：最初位于扁桃体，感染24hr内可从头部神经节、脊髓及桥脑中分离到病毒 排毒：康复猪可通过鼻腔分泌物及唾液持续排毒，但粪、尿不带毒。,（4）病毒培养 易在鸡胚绒毛尿囊膜上生长，接种后3-4d能形成大小不一的隆起的白色痘斑 可在细胞培养中生长：兔、猪和仓鼠的肾细胞（可产生CPE和空斑，形成包涵体）；兔和豚鼠睾丸细胞；鸡胚成纤维细胞。,微生物学诊断,动物试验：12mL适当稀释的病脑组织悬液皮下接种兔；25d后于接种部位出现奇痒症状，最后麻痹致死。病毒分离：常用猪肾细胞系(PK-15)，病毒接种后2472h，出现CPE（细胞层折光性，最后脱落，形成合胞体）。病毒鉴定：可用特异性抗血清做中和试验、
14、免疫荧光试验鉴定病毒；ELISA（国际贸易指定试验）：能迅速检测大量样品；PCR技术：鉴定伪狂犬病毒，多用于隐性感染。,预防灭活苗弱毒苗基因缺失苗，在计划根除伪狂犬病的国家，可选用此类疫苗。,2.禽传染性喉气管炎病毒,属双股DNA病毒，疱疹病毒科，又名禽疱疹病毒1型，仅1个血清型。20面体对称，球形。绒尿膜接种，在绒毛尿囊膜增生，坏死，形成大小不等的灰白色痘斑。各种年龄鸡均可被感染，仅以成年鸡的症状最典型：病鸡呈现呼吸困难和咳出血性渗出物；产蛋下降，蛋壳褪色，产软壳蛋。,病鸡呼吸困难，表现为头颈伸直，张口呼吸，常发出罗音,传染性喉气管炎,病鸡剧烈甩头或呈痉挛性咳嗽，常咳出血性分泌物，多因窒息死
15、亡,传染性喉气管炎,病毒分离,病料采集：发病早期的气管渗出物、气管粘膜及肺组织。鸡胚接种：绒尿膜接种，第3d开始形成痘斑,56d死亡。雏鸡接种：易感雏鸡接种后34d出现明显的症状和病变。,3.马立克病病毒,双股DNA 病毒，疱疹病毒科，又名禽疱疹病毒2型。裸露的MDV：直径85100nm，常见于感染细胞的核内，胞浆中偶尔也可看到。有囊膜的MDV：直径150160nm，主要见于核膜和核泡，有时见于胞浆。羽囊上皮内的病毒子：完全病毒，不与细胞结合，能在体外存活较长时间，有传染性。,主要感染鸡和火鸡，鹌鹑、稚鸡、鹧鸪也能感染。以淋巴细胞增生和肿瘤形成为特征，潜伏期较长。一般以23月龄的鸡发病最为严重
16、。感染鸡群的垫料和羽毛具有传染性：含有从羽囊上皮细胞来的病毒，传染性在室温可保持48个月，在4至少保持10年，但常用化学消毒剂作用10min就能使之灭活。,皮肤型病鸡可见全身毛囊肿瘤性增生,马立克氏病,马立克氏病,神经型病鸡常见一侧腰荐神经增粗,肝脏弥漫性肿瘤结节,马立克氏病,肺脏切面完全瘤化,马立克氏病,微生物学诊断,采集病料与病毒分离：用病鸡的肿瘤组织或抗凝血作为接种材料；血清学试验：常用琼扩试验；流行期，常用高免血清检测病鸡羽囊上皮中的病毒，流行后期，可用已知病毒抗原检查病鸡血清中的抗体。荧光抗体试验,4.牛传染性鼻气管炎病毒,又名牛疱疹病毒1型，属疱疹病毒甲亚科。感染牛，主要有呼吸道及
17、生殖道两种表现型。呼吸道型极少发生于舍饲牛，常见于围栏牛。引致多种症状，包括鼻气管炎、脓疱性阴道炎、龟头包皮炎、结膜炎、流产及肠炎，新生犊牛可为全身性疾病，并可有脑炎。,致病机理,潜伏感染的带毒牛可能终生排毒，成为传染源。生殖道型可因性交或人工授精引起，呼吸道型与结膜炎可因气雾传染。上述两型均为局部上皮细胞坏死，坏死灶周边细胞核内可见包涵体。病毒在犊牛肺、睾丸或肾细胞培养生长良好，12d可产生明显的细胞病变，并有嗜酸性核内包涵体。经适应可在HeLa细胞培养中生长，不能在鸡胚生长。,诊 断,可取病变组织作涂片或切片，作荧光抗体染色或PCR检测。必要时可接种牛胚肺细胞等作病毒分离。ELISA法可检
18、测血清及奶中的抗体。,预防与控制,在流行较严重的国家，一般用疫苗预防控制，常用各种弱毒疫苗及基因缺失疫苗。疫苗虽不能防止感染，但可明显降低发病率及患病严重程度。杆状病毒表达的gD糖蛋白或含有该基因的DNA疫苗也已试用于免疫预防。在发病率低的欧洲国家，则采取淘汰阳性牛的严厉措施，不再允许使用疫苗。,5.鸭瘟病毒(duck plague virus),又名鸭疱疹病毒1型(Anatid herpesvirus 1)，引致鸭瘟。主要危害家鸭、番鸭、野鸭、鹅、天鹅及其他水禽也易感。迁徒性水禽对病毒起传播作用。野鸭在感染后1年以上仍能分离到病毒。,致病机理,病毒只有一个血清型，但毒力有差异。病毒在814d
19、龄鸭胚绒尿膜及鸭胚成纤维细胞上均易生长，前者绒尿膜可出现灰白色坏死灶，胚体死亡，肝有坏死灶。后者可形成核内包涵体。在鸡胚或鸡胚细胞上经适应后也可生长。病鸭发生肠炎、脉管炎以及广泛的局灶性坏死，产蛋率可下降25%40%，发病率在5%100%，出现临床症状的病鸭大多数死亡。可通过接触传染。,诊 断,可结合临床症状作组织切片荧光抗体染色，或检测包涵体，必要时可分离病毒。应注意与雏鸭肝炎等相区别。,预防与控制,可接种鸡胚或鸭胚传代的弱毒疫苗，还应设法防止带毒野生水禽进入鸭群。,病初精神萎顿,鸭 瘟,厌食，缩颈垂翅（人工感染病例）,鸭 瘟,羽毛松乱，离群独处，呆立一隅,鸭 瘟,两腿麻痹，行走困难,鸭 瘟
20、,强行驱赶，则扑翅向前跳跃,鸭 瘟,因体温升高，病鸭大量饮水,鸭 瘟,部分病鸭头颈部肿胀，流鼻,鸭 瘟,眼睛流出浆液性、血性分泌物,鸭 瘟,病鸭排白色稀便,鸭 瘟,黄绿色稀粪、甚至便中带血,鸭 瘟,第四节 腺病毒科（Adenoviridae）,1、各种动物的腺病毒形态基本相同，衣壳结构清晰，易在电子显微镜下仔细观察，在感染细胞核内的病毒粒子经常排列成结晶状。而且腺病毒的核酸和蛋白质又易分离提取，故是目前动物病毒中在形态和化学结构上研究得最为详细的病毒之一。2、腺病毒没有囊膜，核衣壳的直径为7080nm，呈二十面体立体对称。内为线状的双股DNA。,3、纤突直径为2nm，长约1031nm随腺病毒型而不同。4、在细胞核内转录、复制、核内装配；通过细胞裂解释放。腺病毒通过其纤突球部与敏感细胞膜上的特异性受体结合后，即开始了感染过程。结合后的病毒，或依靠细胞的吞饮作用，或直接侵入细胞。,1.减蛋综合征病毒,双股DNA病毒，腺病毒科。病毒颗粒呈20面体对称，无囊膜，能凝集禽类红细胞。产蛋母鸡的产蛋量下降和蛋的质量降低危害种、蛋鸡 的重要传染病之一。产蛋下降一般持续410w逐渐恢复 蛋色变淡、蛋壳粗糙不平，软壳蛋、薄壳蛋、破蛋。,
