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1、色谱分析,气相色谱,液相色谱,提纲,仪器结构及原理,载气系统,进样系统,色谱柱,检测器,气相色谱分析流程示意图1 载气钢瓶；2 减压阀；3 干燥管；4 针形阀；5 流量计；6 压力表；7 进样器；9 色谱室；10 检测器；11 记录仪,记录系统,利用被测样品（气-液和气-固）加热平衡后，取其挥发气体部分进入气相色谱仪分析。,静态顶空萃取,进样方式,固相微萃取,液体直接进样,目前GC的主流,主要为开管柱 open tubular column,管内壁涂渍固定液，无载体空心管,主要特点,毛细管色谱柱的特点,分流比常20:1,原因：柱容量小,分流技术,毛细管柱进样量必须极小（一般液样10-210-3
2、微升，气样约1微升）,何时不用分流？,建立方法的步骤1-选择检测器,商品名:HP-INNOWax,30m0.25mm0.25um,聚乙二醇:极性强,商品名:HP-1,30m0.25mm0.25um,二甲基聚硅氧烷:弱极性,乙苯/对/间/邻二甲苯分成4峰,乙苯/对间/邻二甲苯只有3峰,固定液极性,建立方法的步骤2-固定相的性质,由图可见存在最佳流速（uopt）。实际流速通常稍大于最佳流速，以缩短分析时间。,建立方法的步骤3-载气流速,准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离；,建立方法的步骤4-温度选择,保证液体试样瞬间气化；,保证被分离
3、后的组分通过时不在此冷凝；,气化室,检测器,色谱柱,低于固定液使用温度低于组分沸点能低则低！,分流比的定义？,问什么要采用分流技术？,主要影响因素3-分流比,气相色谱常见问题,气相色谱常见问题,确定待测样是否符合GC要求,沸点低，350oC,易挥发，热稳定,浓度尽可能低：小于10ppm,待测样不能含有水份(特殊柱：水样),溶剂沸点尽可能低，尽量不选用丙酮,实验注意事项,柱温要低于固定液使用温度,样品必须经过0.45m或0.22m的滤膜过滤,气相色谱,提纲,液相色谱,仪器结构,进样口,检测器,色谱图,色谱柱,溶剂,泵,混合器,六通阀与定量环,建立液相色谱法的一般步骤,反相HPLC 极性:固定相
4、流动相 固定相-极性弱 流动相(甲醇,乙腈等)-极性强 极性小物质后出峰,正相HPLC 极性:固定相 流动相 固定相-极性强 流动相(己烷,庚烷)-极性弱 极性物质后出峰,与固定相极性相近tR长,主流,建立液相色谱法的步骤1,色谱柱的类型及适用范围,建立液相色谱法的步骤2-色谱柱,甲醇-水的比例？,流动相的流速？,建立液相色谱法的步骤3-流动相（反相）,液相色谱法的常见问题,液相色谱法的常见问题,进样前，必须检测样品pH值，允许范围27,样品必须经过0.45m或0.22m的滤膜过滤,实验注意事项-样品,进HPLC的样品需要严格控制样品的浓度范围，防止系统污染及平头峰的出现。,实验注意事项-色谱
5、柱,尽量用自己的色谱柱-防止相互污染,连接色谱柱时，应注意连接方向，防止反接、反冲色谱柱。,每次实验结束时，应使色谱柱内充满纯有机溶剂。,实验注意事项-流动相,HPLC流动相的所有溶剂至少需经过G4砂芯漏斗的过滤，且需要超声脱气,HPLC流动相的溶剂至少应为HPLC级/色谱级并与填料相匹配，水应为高纯水（在夏季应每天更换）,严禁长时间以纯水作为流动相,最好用流动相溶样,实验注意事项-流动相,缓冲液的pH值，在填料的允许范围（一般为pH2-8）内,若需要使用缓冲液，也应控制浓度，一般使用0.1%的磷酸或甲酸溶液。,每次使用缓冲液后，需先使用大量水冲洗管路，再用纯有机溶剂长时间冲洗管路及色谱柱，以免对系统造成腐蚀。,做样前和做样后要记录柱压，确保要基本一致。,今日关键词,气相色谱的仪器结构与实验注意事项,液相色谱的仪器结构与方法建立,总结,谢谢各位！,
