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1、药理学实验Experiment of Pharmacology,厦门大学医学院药学系,有机磷酸酯类中毒及解救,Toxication and Detoxication of Organophosphates,一、实验目的二、实验原理三、实验动物四、实验器材和药品五、实验步骤和观察项目 六、注意事项七、讨论,内容介绍,一、实验目的（Experiment purpose)观察有机磷酸酯类的中毒的表现。2.观察解救药阿托品(atropine)、碘解磷定(PAM)的解救作用效果，比较两种药物作用的特点。,二、实验原理（Experiment theory),有机磷酸酯类农药+胆碱酯酶 磷酰化胆碱酯酶（数小
2、时即“老化”）酶活性受抑制 乙酰胆碱堆积 M样、N样作用及CNS症状.,急性毒性,M样症状N样症状中枢症状,全血胆碱酯酶活力测定原理血样中胆碱酯酶能催化乙酰胆碱水解为乙酸和胆碱。在一定量的血液中加入一定量的乙酰胆碱，经过一定反应时间后，测定剩余的乙酰胆碱含量，即可计算出被水解乙酰胆碱的量，从而推算出血样中胆碱酯酶的活力。,剩余乙酰胆碱含量测定原理乙酰胆碱可与羟胺反应生成羟肟酸，后者在酸性条件下可与Fe形成羟肟酸铁络合物，该络合物呈红棕色，在525nm波长有较强吸收峰，通过比色法即可算出乙酰胆碱的含量。,三、实验动物（Experiment animal）,家兔，体重2.53.0kg。,四、实验器
3、材和药品Experiment material,兔固定箱、测瞳尺、注射器、兔耳夹、脱脂棉球、台秤、分光光度计、恒温水浴箱、试管及试管夹、加样器、滤纸；5%敌百虫(depterex)溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、2.5%碘解磷定溶液。,五、实验步骤和观察项目（Experiment method）,1.取健康家兔，称体重，观察并记录各组家兔的活动情况：呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌肉震颤，采血。2.耳缘静脉给予depterex(1.5ml/kg),给药后密切观察上述指标的变化并记录。待M样、N样中毒症状均较明显时，采血；给予耳缘静脉注射atropine(1ml/kg)或PAM-C
4、L(2ml/kg)，观察中毒症状有何变化，采血。3.测定胆碱酯酶活性,全血胆碱酯酶活性测定实验操作步骤,六、注意事项（Cautions）,1、观察呼吸、瞳孔、唾液及肌张力的方法。2、采血方法。3、耳缘静脉注射方法，敌百虫刺激性大，固定 好家兔头部；PAM注射宜缓慢。4、加入试剂量要准确，尤其是血样及乙酰胆碱。5、碱性羟胺于使用前20分现配。6、比色杯使用方法。,七、讨论（Discussion）,1、阿托品解救有机磷酸酯中毒机制。2、解磷定解救有机磷酸酯中毒机制。3、两种药物解救敌百虫中毒各有什么特点？如何解救疗效好？4、使用atropine 和PAM 解救后，家兔全血AChE 活性有何变化？,M受体阻断药-阿托品解毒作用及原理 阿托品能竞争性阻断M受体，迅速解除M样症状和体征；解除部分中枢神经系统中毒症状，兴奋呼吸中枢，使患者苏醒；大剂量阿托品阻断神经节的NN胆碱受体，可对抗有机磷酸酯类对神经节的兴奋作用。,胆碱酯酶复活药（cholinesterase reactivators）,作用：使受抑的胆碱酯酶恢复活性应用：解救有机磷酸酯类中毒代表药物：碘解磷定（派姆，PAM）氯解磷定（PAM-Cl）,碘解磷定（派姆，PAM）,PAM还可与有机磷酸酯类直接结合,特效治疗,1.轻症单用阿托品,反复用药,阿托品化2.中度以上及早加用解磷定,反复用药,
