《血细胞形态学》PPT课件.ppt

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1、血细胞形态学,概论,血液和骨髓细胞瑞氏染色形态学检查法,通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。,形态学检查方法的价值,发现血细胞构成和形态异常 了解骨髓造血功能状态 对血液病提供确诊依据或提供重要线索 是各种血液病形态学检查的基础,形态学检查方法的局限性,不能了解骨髓结构 不能了解细胞分子生物学特性和功能,内 容,第一部分 标本制作第二部分 单个血细胞形态(重点)第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比第四部分 骨髓报告书写格式(重点),第一部分,标 本 制 作,一、骨髓血细胞检查适应症,多次检查外周血有异常(数量、形态)原因未明的

2、肝、脾、淋巴结肿大 不明原因的发热 恶性肿瘤史 有无转移,不名原因骨痛、骨质破坏等。助诊溶酶体贮积症(即类脂质沉积病)进行血液病鉴别诊断和疗效观察,骨髓血细胞检查禁忌症,凝血因子严重缺乏的出血性疾病,如血友病。穿刺部位有炎症或畸形晚期妊娠的妇女做髂骨穿刺要谨慎,二、血液和骨髓标本的来源,部位:髂前上棘或髂后上棘穿刺 必要时行胸骨穿刺,胫骨(儿童)骨髓穿刺成功的标志:1.抽吸骨髓时患者感锐痛2.外观红色粘稠状、有骨髓小粒、油滴。3.显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等),三、血液和骨髓标本的制作,四、血液和骨髓标本的瑞氏染色,选取长短厚薄适宜的涂片(骨髓2张、

3、血片2张)瑞氏染液:缓冲液 1:2,时间1小时,小水流冲洗,自然晾干后备检。瑞氏染液含美蓝和伊红两种成分 美蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞 浆),染成兰色;伊红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成紫红色。,偏酸 合适 偏碱,光学显微镜使用,显微镜使用注意事项低倍镜(10倍):判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级 骨髓增生程度 估计小粒细胞面积 计数全片巨核细胞数目 寻找瘤细胞团油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。,骨髓小粒分级(1),肉眼及低倍镜下观察:(-)无骨髓小粒(+)骨髓小粒稀疏,相隔较远(+)骨髓小粒较密集,于血膜尾部甚 易发现(+)骨髓小粒十分密集,彼

4、此紧密 相连,全片都易发现,骨髓小粒分级(2),显微镜(100 倍油镜):估计骨髓小粒细胞面积:各种有核细胞(除脂肪细胞外)占整个骨髓小粒面积的百分比,在正常骨髓中,小粒细胞面积50-75%。,小粒分级(3),细胞成份分析:造血细胞、非造血细胞。造血细胞:幼稚粒、红细胞 非造血细胞:脂肪细胞、成熟淋巴细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等。,骨髓小粒分级(4),临床意义骨髓小粒:正常骨髓中+-+急、慢性髓系细胞白血病多为(+)或(+)淋巴细胞白血病多无粒、无油骨髓小粒细胞面积及细胞成分:慢性再障多在50%以下,以非造血细胞为主 各种白血病及增生性贫血多在75%以上,以 造血细胞为主。,油滴分级

5、(1),(-)无油滴(+)油滴少且小,细沙状均匀分布,涂片后于血膜尾部有很少油滴(+)油滴稍多且大,有的直径达1mm 以上,涂片后血膜尾部易见油 滴。(+)油滴聚集成片,不易干燥,油滴分级(2),临床意义:正常骨髓一般(+-+)慢性再障:最为多见,达+或+各型急、慢性白血病多数为(-),少数为(+),增生程度分级,增生程度 RBC与有核细胞之比 常见病增生极度活跃 1:1 各类白血病增生明显活跃 10:1 各类白血病 增贫增生活跃 20:1 正常骨髓、某些贫血 增生减低 50:1 慢性再障、MDS增生极度减低 300:1 急性再障、急停,临床分类过程中,增生程度介于两者之间,以+/-号表示。如

6、:增生活跃+或-。,第二部分,正常骨髓细胞形态,(一)骨髓细胞分化,正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态学特征才较明显,才能辨认。,1-1 血细胞成熟过程规律,胞体:大 小 巨核 小 大胞浆:细胞越幼稚,染色越深;细胞越成熟,染色越浅淡胞浆染色:深蓝(原始)-蓝色(早幼)-浅 蓝(中幼)-粉色颗粒变化:无颗粒(原始)-嗜天青颗粒(早 幼)-特异性颗粒(中性粒、嗜酸 粒、嗜碱粒)。胞浆量:少 多,胞核:体积由大-小,成熟红细胞无核染色质

7、:细致疏松-粗糙紧密块状核膜:不显著-显著核仁:清楚-不清-消失胞核与胞浆体积之比:大-小 细胞发育成熟过程:原始-早幼-中幼-晚幼-成熟细胞,以红细胞系统的成熟过程为例,1-2 单个细胞观察顺序,细胞大小、形状 胞浆量多少、颜色、颗粒细胞核形状、染色质结构(粗细、凝聚)、核仁数目、大小。核、浆比例。,(二)各系列各阶段细胞形态,1 红细胞系统:临床四阶段划分(有些 学者提出六阶段划分)正常骨髓中 约占15%-25%,原始红细胞,细胞圆形或椭圆形,直径1525m胞核圆形或椭圆形,居中染色质粗颗粒网状,深紫红色,核仁23个胞浆浓(深)蓝色,着色不均,边缘着色深,核周浅染,无颗粒,有钝伪足比例 0

8、.03-0.05%,早幼红细胞,圆形,直径15-18m核圆形,略偏位,染色质开始凝聚,核仁消失胞浆量增多,蓝色,无颗粒比例 0.92-0.41%,中幼红细胞,胞体圆形,直径818m核圆形,居中,或偏位,染色质凝聚小块直至碎墨块状核、浆各占半,浆灰兰色,淡兰色比例 7.41-1.91%,晚幼红细胞,直径713m核圆形,偏位明显,染色质凝聚成大块或团块状,甚至固缩不能看出任何结构(碳核)胞浆量增多,淡灰或粉红色比例 10.75-2.36%,成熟红细胞,呈双面凹圆盘形,直径7-8m中央为1/3淡染区,原始红、早、中、晚幼红比较,巨幼细胞贫血(MegA),叶酸、VB12 缺乏,骨髓中出现巨幼红细胞,分

9、早巨幼红细胞、中巨幼红细胞、晚巨幼红细胞三个阶段与相对应阶段的正常幼红细胞比,其特点:1 胞体大 2 胞浆丰富 3 核发育落后于浆,染色质疏松,早巨幼和早幼红,中巨幼和中幼红,晚巨幼和晚幼红,病理情况下成熟红细胞形态,H-J小体,成熟红细胞或幼红细胞胞浆内1个或多个直径1m暗紫红色小体 见于HA、MDS、MEGA,异形红细胞,红细胞呈不规则形,盔甲形、梨形、半月形等,是红细胞破坏加速的证据之一见于HA,TTP。(根据病种 不同),球形红细胞,小而实心,中心浅染区消失,见于HS。,多嗜性红细胞,胞浆灰红或灰兰色,为晚幼红脱核后,反映骨髓造血旺盛,HA时多见,再障时少见。,Cabot环,淡紫红色线

10、条,“8”形,圆形。多见于HA。,椭圆形红细胞,见于遗传性椭圆形红细胞增多症。,口形红细胞,红细胞中心一条苍白裂隙,似金鱼嘴。,泪滴形红细胞,多见于骨髓纤维化。,红细胞大小不均,同一患者涂片红细胞大小显著,直径相差2-3倍,多见于HA,MDS、MegA等,点彩红细胞,红细胞胞浆有许多大小不一,形状不整嗜碱性点状物。(瑞氏)注意与网织红细胞鉴别(煌焦油蓝染色),靶形红细胞,红细胞周边、中央着色深,间隔空白带,见于地贫,(小细胞低色素)中心浅染,成熟红细胞中浅染区扩大,多见于IDA、MDS(RAS)、地中海贫血、慢性病贫血,红细胞缗钱状排列,红细胞沿长轴一个个 相联,多见于浆 细胞疾病,2 粒细胞

11、系统,在正常骨髓中约占50%-65%嗜中性粒细胞在粒细胞系统占绝大部分,嗜酸性粒细胞小于5%嗜碱性粒细胞小于1%嗜酸粒细胞增多,见于CML,嗜酸粒细胞增多症,嗜酸粒细胞白血病,过敏性疾病等嗜碱性粒细胞增多,见于CML,嗜碱性粒细胞白血病。,粒细胞系统,原始粒细胞 早幼粒 中幼粒(特异性颗粒)嗜中性 嗜酸性 嗜碱性 中幼粒 中幼粒 中幼粒 晚幼粒 晚幼粒 晚幼粒 杆状核 杆状核 杆状核 分叶核 分叶核 分叶核,原始粒细胞,胞体圆形或椭圆行,直径1220m胞核圆形或椭圆形,居中或稍偏染色质淡紫红色细颗粒,细颗粒网状,均匀平坦,淡蓝色小核仁3-5个,外凸胞浆量少,天蓝色透亮,无颗粒(1型),原粒1型

12、,原粒11型,在I型基础上胞浆有少数细小颗粒,但无Golgi区,早幼粒,胞体较原始细胞大,胞浆稍多胞浆出现粗大嗜天青颗粒,Golgi发育(核附近有淡染区)胞核圆形,有偏位染色质粗网状,聚集,核仁1-4个或消失约占1.570.6,中幼粒,胞浆出现特异性颗粒 嗜中性中幼粒:粉黄底色,不透亮,约占6.49+-2.04%。嗜酸性中幼粒:大小一致,圆形颗粒,灰黄色嗜碱性中幼粒:大小不一,暗褐色,分布散乱,覆盖核上,嗜中性、酸性、碱性颗粒比较,胞体圆形或椭圆性,直径15-20m,核偏于一侧,肾型或半圆型,染色质粗网状,凝聚,核仁消失。,晚幼粒(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性),直径10-16m胞核肾型,有凹陷,凹

13、陷度在假设圆径1/2-3/4,小于1/2为中幼粒,大于3/4为杆状核约占7.9+-1.97%,杆状核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性),直径10-13m胞核如杆状、带状,胞核之凹陷度大于3/4染色质凝固块状。约占23.72+-3.5%,分叶核(嗜中性、嗜酸性、嗜碱性),直径10-13m核呈分叶状,3-4 叶,很少5叶,叶与叶之间有一丝相连或断开染色质块状,分叶小于2叶,见于pelger-huet畸形,粒细胞分叶能力减退,(MDS),分叶大于5叶,见于 Meg A约占9.44+-2.92%,嗜酸性中、晚、杆、分,3 淋巴细胞系统,原始淋巴细胞圆形或椭圆形,直径10-20m,核居中,略偏位,有切迹,染色质

14、深紫红色,粗糙,正副染色质不透亮,排列成粗网状,厚,核仁模糊1-2个,有凹陷胞浆天兰色,兰色窄带绕核,透亮,无颗粒(正常骨髓中见不到,多见于ALL,或淋巴细胞增殖性疾病),幼稚淋巴细胞,体积与原淋相似,胞核有小凹陷染色质粗糙,核仁消失胞浆淡蓝色,偶有少许嗜天青颗粒(ALL,CLL),成熟淋巴细胞,直径5-18m染色质致密块状,有假核仁胞浆量少,兰色,透亮,少许嗜天青颗粒,大淋巴细胞,胞浆量多存在于正常骨髓中,约占15%-25%,晚幼红和淋巴细胞鉴别,尤其小淋巴细胞与碳核样晚幼红鉴别:相同点:胞体小,胞浆量少,无颗粒,核致密、固缩,无结构。不同点:晚幼红胞浆颜色接近成熟红细胞,核膜不如淋巴细胞光

15、滑、刀切样。多见于IDA、AA。,淋巴细胞与晚幼红比较,4 单核细胞系统,原始、幼稚、成熟阶段,在正常骨髓中仅见成熟单核细胞原始单核细胞不规则形或圆形,直径14-25m胞核不规则,有折叠扭曲,染色质纤细网状,紫红色,核仁大,1-3个胞浆灰兰色,浅兰色,似毛玻璃,不透亮,有伪足,有时有内外浆,无颗粒(见于单核细胞白血病),幼稚单核细胞,染色质纤细,有凝聚,或粗网状,核仁不清楚或消失胞浆量多,灰兰色,许多细小沙砾状嗜天青颗粒(见于急、慢性单核细胞白血病),成熟单核细胞,胞体稍小,直径12-20m核居中或偏一侧,形状不规则染色质凝聚如筛底或粗线条状,不形成块状胞浆量多,灰兰色,散布细小粉红色颗粒。在

16、正常骨髓中约占5-8%,5 浆细胞系统,来源于B细胞原始浆细胞:胞体15-25m,核偏位于细胞一端染色质粗颗粒网状,紫红色,有核仁胞浆灰兰色,近核处有一半圆形透明区,无颗粒(见于浆白、MM),原浆,幼稚浆细胞,(浆细胞样淋巴细胞)染色质开始凝聚,呈车轮 状,无核仁胞浆量多,灰兰色,有时少许紫红色小颗粒(见于浆白、MM),原、幼浆比较,幼浆,成熟浆细胞,椭圆形,直径8-20m核圆形,明显偏位,染色质粗凝块,车轮状,胞浆丰富,灰兰色,无或少许嗜天青颗粒,近核处明显半圆形空白区在正常骨髓中约占3%。,骨髓瘤细胞,原、幼浆细胞、多核浆细胞见于浆细胞疾病。Mott细胞:胞浆中出现大小不等、蓝紫色或肉红色

17、的小球体,形如桑葚,又称桑葚细胞。为MM一种罕见类型。Rusell小体:浆细胞的胞浆内出现若干个大小不等的肉红色小体,为球蛋白聚集产物,可能是内质网在分泌球蛋白过程中被阻塞而形成的,一旦形成此体,细胞很快死亡。火焰状浆细胞:浆细胞的胞浆呈火红色或浓红紫色时,见于IgA型MM。,火焰浆1,火焰浆2,含念珠样空泡,RUSELL小体,葡萄样浆细胞(RUSELL),脂肪细胞与葡萄样浆细胞鉴别,原始淋巴与原始浆细胞比较,6 巨核细胞系统,原始巨核:圆形或椭圆形,胞体20-45m核圆形或椭圆形,有凹陷,折叠染色质暗深紫红色,粗大颗粒,排列紧密,核仁1-2个胞浆量少,深兰色,无颗粒病理情况下,小巨核(原始)

18、外形不整齐,如撕纸状,有大小不一的伪足(见于MF、MDS、),幼稚巨核细胞,体积增大40-70m胞核多形,染色质开始凝聚 胞浆增多,灰兰色,嗜天青颗粒,核仁不清。,成熟巨核细胞,直径50-70m胞核形状不规则胞浆丰富,粉色,紫红色小颗粒,云雾状,胞浆或周边若干血小板(产板巨核)。否则为成熟无血小板形成巨核正常骨髓中巨核数目7-133,平均36个,裸核,巨核细胞发育成熟后,胞浆解体形成血小板后,只剩一胞核。,血小板,星形、逗点状、不规则形,直径2-5m,淡兰色,胞浆有淡紫色小颗粒病态时有巨大血小板,直径25-50m(MDS、MF),病理巨核,单元核小巨核双圆核小巨核多圆核巨核多分叶巨核淋巴样小巨

19、核多见于MDS、M7、CML、全髓细胞白血病,淋巴样小巨核与淋巴细胞,单圆核小巨核,多圆核小巨核,原始粒细胞、原始红细胞、原始巨核细胞、原始单核细胞、原始淋巴细胞、原始浆细胞比较,7 骨髓中其它正常细胞,成骨细胞:数个或成堆出现,椭圆形,直径25-40m核圆形,偏一侧染色质深紫红色,粗颗粒,核仁小浆多,蓝灰色,不均匀,泡沫状,距核远处,淡紫区,少许紫红色嗜天青颗粒,,破骨细胞,骨髓中最大多核细胞,外形多不规则,周边不整齐,如撕纸状2-数十个核,每个核1-2个核仁,染色质粗网状胞浆丰富,淡蓝、灰兰色,胞浆中粗大不均一、分布不均的嗜天青颗粒。与多核巨核细胞鉴别:,多核巨核细胞,胞体大,浆丰富,云雾

20、状,充满大小较均匀一致的、细小的紫红色颗粒,核圆形或椭圆形,染色质浓聚。,破骨细胞与多核巨核细胞鉴别,相同点:胞体大,不规则,浆丰富,有颗粒,多核。不同点:破骨细胞胞体周边不整齐,撕扯状,胞浆颗粒大小不一、分布不均匀,核索条状。多核巨核细胞周边较整齐,颗粒大小均匀一致,紫红色细小颗粒,胞浆云雾状,核深紫红色、浓聚,破骨细胞和多核巨核鉴别,网状细胞,形态多样,周边不整,撕纸状,长轴25-50m胞核大小一致,圆形、椭圆形染色质紫红色粗网状,有核仁胞浆丰富,灰蓝或淡兰色 嗜天青颗粒,或有空泡。,吞噬细胞,网状细胞吞噬 色素颗粒、血细胞(噬血细胞)等,组织嗜碱细胞,又称肥大细胞,圆形、椭圆形、不规则形

21、、带状、蝎尾状,直径5-30m胞核圆形或椭圆形,直径7-10m染色质粗网状,无核仁胞浆淡染或无色,充满圆形、大小相同、直径0.3-1.5m,紫色或淡紫色嗜碱颗粒,多覆盖核上,核要比周围染色浅。,脂肪细胞,是组织细胞摄取脂肪滴形成,其胞体直径30-50um,圆形或椭圆形,边缘不整齐胞核较小,形状不规则,常被挤在一边核染色质 致密,无核仁胞浆充满大量大小不一的脂肪空泡。,脂肪细胞与葡萄样浆细胞鉴别,退化细胞,有的细胞已衰老,或脆性较大,在推片时人为将其推破。蓝状细胞:呈扁平状,无立体感,胞浆散乱,兰色淡薄,形如竹蓝,又名蓝状细胞。涂抹细胞(破坏细胞):大小不一,通常只有一个退化的核而无胞质,胞核肿

22、胀,核结构模糊不清。ALL时较多,有助于ALL诊断。,红细胞造血岛,中央为组织细胞,周边绕以有核红细胞,Auer小体,胞浆内出现1根或数根酷似细棒或针状的小体,结构均匀一致。细胞浆内出现Auer小体是急性白血病的特征之一。急性粒细胞白血病时,这种小体较粗,急性单核细胞白血病较细,急性淋巴细胞白血病缺如,APL可有多量的Auer 小体,如束柴状.,正常骨髓有核细胞 构成比,第三部分,粒细胞系统:占骨髓有核细胞百分比45-75%各 阶段比例:原+早2.2%(5%),中性中幼粒约62%中性晚幼粒约82%,中性杆状核234%,中性分叶核约93,嗜酸性粒细胞(中幼粒-分叶核)5%嗜碱性粒细胞(中幼粒-分

23、叶核)0-1%。,红细胞系统占骨髓有核细胞百分比15-25%原始红细胞约0.2-1.3%,早幼红约0.5-2.4%,中幼红约 10%,晚幼红约10%幼红细胞形态如何,成熟红细胞形态。粒/红(G/E)=2-4/1,淋巴细胞:在正常骨髓中,见不到原、幼淋巴细胞,只见到成熟淋巴细胞,约占骨髓有核细胞15-25%。单核细胞:同样,在正常骨髓中见不到原、幼单核细胞,只见成熟单核细胞,约占骨髓有核细胞5%左右。,巨核细胞系统:正常骨髓涂片(1.5x3cm)巨核细胞数目7-136个分原始巨核、幼稚巨核、成熟巨核(成熟有血小板形成巨核、成熟无血小板 形成巨核)、裸核、血小板。,外周血白细胞构成比,白细胞包括粒

24、细胞、淋巴细胞、单核 细胞粒细胞主要以中性粒细胞为主,约占50-65%,嗜酸性粒细胞0-3%,嗜碱性粒细胞0-1%,所以说粒细胞一般指中性粒细胞其中,中性杆状核约占10%左右,中性分叶核约占50%左右正常情况下,在外周血中见不到幼稚粒细胞。,淋巴细胞:为成熟淋巴细胞,约占20-40%。正常情况下,见不到原、幼淋巴细胞。单核细胞:为成熟单核细胞,约占5%左右,正常情况下,外周血见不到原、幼单核细胞。,成熟红细胞形态大致均匀,正常情况下,外周血见不到有核红。血小板呈小堆 或散在分布。每15-20个红细胞对1个左右血小板。,骨髓报告书写格式,第四部分,骨 髓,1 判断骨髓取材、涂片、染色是否满意,小

25、粒()油滴()2 判断骨髓增生程度 G=%E=%G/E=3 粒系百分比(增高、大致正常、减低),各 阶段比例如何(左移、大致正常、右移),各阶段粒细胞形态有无异常。4 红系百分比(增高、大致正常、减低),组 成,幼红细胞形态如何,成熟红细胞形态如 何。,5 淋巴、单核细胞比例形态如何6 全片共见巨核细胞 个,分类25个,其中,原 始巨核 个,幼稚巨核 个,成熟有血小板形成 巨核 个,成熟 无血小板形成巨核 个,裸核 个,血小板数量、分布。(单个散在、小堆、大堆、大片状)7 骨髓小粒造血细胞面积、成分。特殊细胞情 况8 有无寄生虫、转移瘤,血 片,1 白细胞数增多、大致正常、减少。2 粒细胞比例增高、大致正常、减低,形态如 何。3 成熟红细胞形态如何,计数100个白细胞未 见有核红。4 淋巴单核细胞比例形态如何5 血小板数量、分布。,形态学意见:签字:审片人/分片人 日期:,骨髓检查诊断疾病的性质,肯定性诊断:各种类型急性白血病;慢性粒细 胞白血病;巨幼贫;符合性诊断:再生障碍性贫血,多发性骨髓 瘤;增生性贫血等可疑性诊断:骨髓增生异常综合症等排除性诊断:形态学描写:对于明确诊断的疾病,经治疗后做骨髓血细胞检查,要于以前骨髓片进行对比,得出疾病完全、部分缓解,改善、进步、复发等意见,附 正常骨髓报告,

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