《高职工业微生物学》PPT课件.ppt

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1、(三)霉菌的繁殖方式及生活史,以无性繁殖为主,产生无性孢子;条件适宜时,也可产生有性孢子进行有性繁殖。,复习,复习,2.有性孢子繁殖两个性细胞结合产生新个体的过程。分三个阶段:(1)质配:两个性细胞结合,细胞质融合,成为双核细胞,每个核均含单倍染色体(n+n)。(2)核配:两个核融合,成为二倍体接合子核,此时核的染色体数是二倍(2n)。(3)减数分裂:具有双倍体的细胞核经过减数分裂,核中的染色体数目又恢复到单倍体状态。,复习,3.霉菌的生活史从孢子开始,经过发芽、生长成为菌丝体,再由菌丝体经过无性繁殖和有性繁殖产生孢子。无性繁殖阶段;菌丝体(营养体)在适宜的条件下产生无性孢子,无性孢子萌发形成

2、新的菌丝体,多次重复。有性繁殖阶段;在发育后期,在一定条件下,在菌丝体上分化出特殊性器官(细胞),质配、核配、减数分裂后形成单倍体孢子,再萌发形成新的菌丝体。,复习,三、霉菌的代表属,(一)毛霉(二)根霉(三)青霉(四)曲霉(五)链孢霉属(六)头孢霉属,复习,四、霉菌与人类的关系,(一)病原性霉菌1.浅部感染真菌2.深部感染真菌3.霉菌毒素(二)霉菌与制药工业,复习,第三节 大型真菌,能产生肉眼即可看清的大型子实体的真菌。一、形态和结构基本构成为子实体和菌丝体菌丝体三个发育阶段初生菌丝:单倍体二生菌丝:以锁状联合方式增殖细胞。三生菌丝:二生菌丝特化形成。形成各种子实体。子实体由营养菌丝和繁殖菌

3、丝组成,是产生孢子的结构。,复习,二、繁殖方式及生活史大型真菌一般属于担子菌门和子囊菌门。(一)繁殖方式无性繁殖:芽殖、裂殖和分生孢子有性繁殖:产生担子和担孢子(二)生活史即担子菌的有性世代。,复习,三、大型真菌与制药工业(一)药用大型真菌资源银耳、茯苓、猪苓、灵芝、冬虫夏草、马勃等(二)药用真菌有效化学成分1.多糖2.萜类化合物甾醇类(三)药用大型真菌发酵工艺的研究,复习,病毒,病毒是非细胞型微生物。其体积微小,结构简单,必须在活细胞内增殖。病毒的大小与形态:病毒的大小:完整的成熟病毒颗粒称为病毒体。病毒体的测量单位是纳米。病毒的形态:动物病毒多为球形,少数为弹状、砖块状。噬菌体为蝌蚪状。,

4、复习,病毒的结构与化学组成,化学组成:主要为核酸和蛋白质核酸:DNA或RNA病毒蛋白:结构蛋白和酶蛋白结构:内部:核心,主要为核酸。即病毒的基因组,DNA或RNA。决定病毒的遗传、变异和复制。此外有少量酶蛋白。外部:衣壳,为蛋白质。由多肽壳粒组成。有螺旋、面体、复合三种对称类型。可保护病毒的核酸、介导病毒侵入宿主细胞,并有抗原性。衣壳与核心一起称为核衣壳,构成最简单的病毒体。,复习,包膜:是病毒在成熟过程中以出芽方式穿过宿主细胞,向细胞外释放时获得的。由病毒自身的蛋白质与宿主细胞膜或核膜的脂质和少量糖类构成。有保护作用,并与病毒的感染有关。包膜表面常有不同形状的突起,称为包膜子粒或刺突。为蛋白

5、质,有多种作用。,复习,病毒的增殖,病毒的增殖:以复制的方式增殖。一个复制周期可分为吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放五个步骤。,复习,噬菌体,一、噬菌体的生物学性状 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒,在葡萄球菌和志贺菌中首先发现。病毒的特性:个体微小,可以通过细菌滤器没有完整的细胞结构,由蛋白质和核酸组成专性细胞内寄生的微生物分布极广,复习,形态个体小,需用电子显微镜观察蝌蚪形、微球形和丝形结构大多数噬菌体呈蝌蚪形,由头部和尾部两部分组成化学组成蛋白质构成噬菌体的头部的衣壳及尾部,保护核酸。核酸-遗传物质,复习,二、噬菌体的增殖1.吸附和穿入2.生物合成转录形成mRN

6、A,转译成噬菌体所需的酶、调节蛋白和结构蛋白。以噬菌体核酸为模板,通过核酸多聚酶催化作用,大量复制子代噬菌体的基因核酸。3.成熟与释放蛋白质和核酸合成后,在细胞质内按一定程序装配成成熟的噬菌体。当子代达一定数目后,菌细胞突然裂解,释放出的噬菌体又能感染新的敏感细菌。有些丝形噬菌体以出芽方式逐个释放。,复习,三、噬菌斑及噬菌体效价,分离:在液体培养基中,噬菌现象可使浑浊菌液变为澄清。在固体培养基中,适量噬菌体和宿主菌液混合后接种培养,培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。噬菌体的滴定一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成的,称为噬斑(plaque)。通过噬斑计数,可测知一定体积内的噬斑形成单

7、位数目,即噬菌体的数量。常以每毫升噬菌体液能出现的噬菌斑(PFC/ml)表示噬菌体的效价或滴度。,复习,四、噬菌体的一步生长曲线,烈性噬菌体在感染的初、中期,没有噬菌体繁殖的迹象,最后只有在宿主细胞破裂后才能看到噬菌体数目大量增加。此种繁殖过程为一步生长。,复习,噬菌体复制(繁殖)的三个阶段:1、吸附期:游离的噬菌体吸附到宿主细胞2、潜伏期:从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期3、裂解期:随着菌体不断破裂,新噬菌体数目增加,直到最高值。,将细胞裂解后测定病毒的数量。前期可将培养物先离心去上清以消除未吸附病毒的影响,取培养物直接测定病毒数量,将培养物过滤去细胞后测定病毒数量,隐蔽期(ec

8、lipse period)在潜伏期的前一段,受染细胞内检测不到感染性病毒,后一阶段,感染性病毒在受染细胞内的数量急剧增加。自病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间为为隐蔽期。隐蔽期病毒在细胞内存在的动力学曲线呈线性函数,而非指数关系,从而证明子代病毒颗粒是由新合成的病毒基因组与蛋白质经装配成熟,而不是通过双分裂方式产生的。裂解量每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目,即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。,五、噬菌体与宿主细胞生活周期,1.烈性噬菌体2.温和噬菌体溶原性细菌(lysogenic bac

9、terium):携带溶原性噬菌体的细菌,此状态称为溶原状态(lysogeny)。前噬菌体(prophage)整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体。溶原性:前噬菌体偶尔可自发或在某些理化和生物因素的诱导下脱离宿主菌基因组而进入溶菌周期,产生成熟噬菌体,导致细菌裂解。温和噬菌体的这种产生成熟噬菌体颗粒和溶解宿主菌的潜在能力称为溶原性(lysogeny)。噬菌体免疫状态:溶原性细菌具有抵抗同种或近缘噬菌体重复感染的能力。,噬菌体溶菌性周期和溶原性周期,六、噬菌体的应用,鉴定未知的细菌噬菌体与宿主菌的关系有高度特异性,可用于未知细菌的鉴定和分型。如应用伤寒沙门菌Vi噬菌体可将有Vi抗原的伤寒沙

10、门菌分成96个噬菌体型。分子生物学的研究工具噬菌体基因数量少,结构比细菌和高等细胞简单得多,而且容易获得大量的突变体。噬菌体可用来构建基因文库,细菌感染的诊断与治疗应用噬菌体效价增长试验可检测标本中的相应细菌。在怀疑有某种细菌存在的标本中,加入一定数量的已知噬菌体,37孵育68h,再测定该噬菌体的效价。辅助治疗,如应用铜绿假单胞菌噬菌体治疗创口感染。遗传工程基因工程载体噬菌体展示技术,第五章 微生物的营养,1.微生物的营养物质2.培养基,第一节 微生物的营养物质,营养:微生物从外部环境中摄取和利用营养物质,以满足正常生长和繁殖需要的一种生理过程。营养物质:能满足微生物生长、繁殖及完成各种生理活

11、动所需要的物质的统称。微生物为了生存就必须从环境中吸取各种物质以合成细胞物质、提供能量以及在新陈代谢中起调节作用。,一、微生物细胞的化学组成,(一)化学元素主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁(其中前六种占细菌细胞干重的97%)。微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼。,(二)组成物质及生理功能1.水:占细胞总重70%90%,以游离水和结合水两种形式存在。,2.固形成分(1)蛋白质:简单蛋白和复合蛋白重要的结构物质,酶或辅酶,参与物质运输,参与细胞的生长繁殖和遗传变异。(2)核酸遗传变异的物质基础,多与蛋白质结合。(3)糖类复杂的组成成分如真菌多糖,脂多糖等;游离形式

12、的如糖原和淀粉。(4)脂类:脂肪、磷脂、糖脂、甾醇等细胞组分,储藏物质,微生物细胞化学组成含量的区别,(三)营养要素及主要作用,1.碳源凡是可以被微生物用来构成细胞物质的或代谢产物中碳素来源的营养物质。生理功能构成菌体组分能量的来源组成代谢产物来源无机碳:CO2及碳酸盐有机碳:糖类、醇类、脂类、有机酸和烃类等。,微生物的碳源谱,微生物工业发酵中用做碳源的原料传统种类糖类(单糖,饴糖);淀粉(玉米粉、山芋粉、野生植物、淀粉等);麸皮;各种米糠等代粮发酵:纤维素、石油、CO2、H2微生物利用碳源物质具有选择性。不同种类微生物利用碳源物质的能力也有差别。微生物不同,利用上述含碳化合物的能力不同,如假

13、单胞菌属中的某些种可以利用90种以上的不同类型的碳源物质;而某些甲基营养型细菌只能利用甲醇或甲烷等一碳化合物进行生长。,2.氮源凡用来构成菌体物质或代谢产物中氮素来源的营养源。生理功能提供合成细胞中含氮物,如蛋白质、核酸,以及含氮代谢物等的原料;少数细菌可以铵盐、硝酸盐等氮源为能源。来源无机氮源:铵盐、硝酸盐、尿素及氨等;氮气分子:固氮菌。能吸收并利用环境中游离氮气作为氮源,借助一些特殊的酶将分子态的氮转化为氨和其他氮化物固氮作用。有机氮源:动植物蛋白质及其不同程度的降解物,如鱼粉、牛肉膏、蛋白胨等。,微生物的氮源谱,实验室常用的氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。生

14、产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。速效氮源无机氮源或以蛋白质降解产物形式存在的有机氮源可以直接被菌体吸收利用。速效氮源通常有利于机体的生长。迟效氮源蛋白氮必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸等才能被机体利用。迟效氮源有利于代谢产物的形成。,3.能源能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。异养微生物的能源就是其碳源,单功能营养物:如辐射能双功能营养物:NH4+是硝酸细菌的能源和氮源三功能营养物:如是异养微生物的能源、碳源及氮源。,4.无机盐为细胞生长提供必需的各种金属元素及一些微量元素,以满足细菌细胞生理活动的需要。

15、所需的量主要元素:10.1mg,磷、硫、镁、钾、钙、钠等。微量元素:110-7g,铁、铜、锌、锰、钻等。一般微生物生长所需要的无机盐有:硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钠、钾、镁、铁等金属元素的化合物。生理功能,5.生长因子一类对微生物正常生活所不可缺少而需要量又不大,但微生物自身不能用简单的碳源或氮源合成,或合成量不足以满足机体生长需要的有机营养物质。B族维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶。缺乏合成生长因子能力的微生物称为“营养缺陷型”微生物。营养缺陷型微生物是由于自发或诱发突变等原因从野生型菌株产生的需要提供特定生长素物质才能生长的菌株。不需要生长因子而能在基础培养基上生长的菌株为野生型(wil

16、d type)。,生理功能构成酶的活性基成份细胞核酸的组成物质提供代谢中电子载体对生长因子的需要一般用量:150毫微克/ml;可通过给培养基加入酵母膏、血清、豆芽浸液、玉米浆等供给。,二、微生物的营养类型,根据生长所需要的营养物质的性质(碳源),可将生物分成两种基本的营养类型异养型生物:在生长时需要以复杂的有机物质作为营养物质自养型生物:在生长时能以简单的无机物质作为营养物质而微生物既有异养型的也有自养型的,大多数微生物属于异养型生物,少数微生物属于自养型生物。,根据生长时能量的来源不同,又可将生物分成两种类型化能营养型生物:依靠化合物氧化释放的能量进行生长光能营养型生物:依靠光能进行生长动物

17、和大部分微生物属于化能营养型生物,它们从物质的氧化过程中获得能量。植物和少部分微生物属于光能营养型生物。按供氢体分无机营养型生物有机营养型生物,微生物的基本营养类型,(一)光能自养型:能以CO2作为主要或唯一的碳源,以水、硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机化合物作为供氢体并利用光能进行生长。如蓝细菌、藻类、绿硫细菌、红硫细菌等。,(二)光能异养型:不能以CO2或碳酸盐作为主要或唯一的碳源,而是以有机物作为碳源并需以有机物作为供氢体,利用光能将CO2还原为细胞物质。如红螺细菌。光能异养型细菌在生长时大多数需要外源的生长因子。,(三)化能自养型:能够以CO2或碳酸盐作为主要或唯一的碳源,以无机物氧化释放

18、的化学能为能源,利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。如硫化细菌、硝化细菌、氢细菌与铁细菌。它们在自然界物质转换过程中起着重要的作用。亚硝化细菌2NH4+3O22NO2-+2H2O+4H+132Kcal硫化细菌:通过氧化还原态的无机硫化物(H2S、S、S2O32-、SO32-)获得能量(硫杆菌属,硫微螺菌属)H2S+1/2 O2 S+H2O+50.1 Kcal铁细菌:氧化Fe2+为Fe3+获取能量并同化2Fe2+1/2O2+2H+2Fe3+H2O+21.2 Kcal,(四)化能异养型:微生物生长所需的能量来自有机物氧化过程放出的化学能,所需要的碳源主要是有机

19、化合物,如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等。此型微生物利用的有机物通常既是它们生长的碳源物质又是能源物质。大多数微生物属于化能有机营养型:包括绝大多数的细菌、全部真菌、原生动物及所有的致病微生物都是化能异养营养型。,腐生型:利用无生命的有机物质为碳源,如动植物尸体和残体。寄生型:利用有生命的有机物质作为碳源,主要借助寄生方式生活在活体细胞或组织间隙中,从体内获得生长所需的营养物质。主要为致病性的病原菌。中间类型(兼性腐生或兼性寄生)如结核杆菌、痢疾杆菌就是兼性寄生菌。,营养类型划分不是绝对的 红螺菌既可利用光能,也可不利用(黑暗)氢单胞菌是异养和自养的过渡型(称兼性自养型)自养与异养的区别不是能否

20、利用CO2,而在于是否以CO2式碳酸盐为唯一的碳源。自养型以无机碳化物为碳源,异养型虽然也可利用CO2,但必须在有机碳存在情况下。,三、营养物质的运输,简单扩散借助细胞内外营养物质的浓度梯度,使营养物质通过细菌细胞的壁膜屏障结构从高浓度向低浓度扩散。是一个不需要代谢能的运输方式。不需要载体参与。物质运输的速率较慢:速率与胞内外营养物质的浓度差有关,即随细胞膜内外该物质浓度差的降低而减小,直到胞内外物质浓度相同水、甘油、乙醇、某些氨基酸和气体分子。,促进扩散借助细胞内外营养物质的浓度梯度和载体蛋白(透过酶),使营养物质通过细菌细胞的壁膜屏障结构,进入细胞内的过程。透过酶的参与加快了养料的运输速度

21、。透过酶多为诱导酶。只有在环境中存在某种养分时才诱导合成相应的透过酶。,特异性,即一定的透过酶只能与一定的养料离子或结构相近的分子结合促进扩散的动力仍然是养料在细胞质膜内外的浓度差,不消耗能量。由于透过酶数量有限而表现出饱和效应。氨基酸、单糖、维生素及无机盐等。,主动运输借助细胞膜上的底物特异性载体并消耗一定的能量,将溶质从低浓度的一面通过细胞膜向高浓度的一面转移的方式,是微生物吸收营养的主要方式。大多数氨基酸、糖类、离子(K+,Na+,HPO42-,HSO42-)等。需要载体蛋白参与。需要消耗代谢能(质子动力和钠钾泵)。可以进行逆浓度运输的运输方式。可以改变运输的的平衡点。具有高度的选择性。

22、载体转运蛋白单向转运蛋白同向转运蛋白反向转运蛋白,基团转移基团转位是一种特殊的主动运输,与普通的主动运输相比,营养物质在运输的过程中发生了化学变化(糖在运输的过程中发生了磷酸化)。其余特点与主动运输相同。主要运输葡萄糖、果糖、甘露糖、核苷酸、丁酸和嘌呤等物质。这些物质在运输过程中被磷酸化,进入细胞后,不能再渗透到细胞外。其中的磷酸基团来源于胞内的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP),因此,也将基团转位称为磷酸烯醇式丙酮酸-磷酸糖转移酶运输系统(PTS),简称磷酸转移酶系统。,主动运输,基团转移,磷酸转移酶系统,磷酸烯醇式丙酮酸-磷酸糖转移酶运输系统(PTS)通常由5种蛋白质组成,包括酶、酶(有a、b、c

23、三个亚基)和一种低相对分子质量的热稳定蛋白(HPr)。酶和HPr是非特异的细胞质蛋白,酶a是可溶性细胞质蛋白,亲水性酶b与位于细胞膜上的酶c相结合。在糖的运输过程中,PEP上的磷酸基团逐步通过酶、HPr的磷酸化与去磷酸化作用,最终在酶的作用下,转移到糖,生成磷酸糖释放于细胞质中。,四种运输营养物质方式的比较,第二节 培养基,培养基:应科研或生产的需要,由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质(混合养料)。特点:任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素,且应比例适当。所以一旦配成必须立即灭菌。用途:促使微生物生长;积累代谢产物;分离微生物菌种;鉴定微生物种类;微生物细

24、胞计数;菌种保藏;制备微生物制品。,一、培养基的配制原则,选择适宜的营养物质营养物的浓度与比例应恰当物理化学条件适宜培养基的的灭菌处理及无菌状态的维持,选择适宜的营养物质,即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。不同营养类型的微生物,其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物质组成。异养微生物的培养基至少需要含有一种有机物质,但有机物的种类需适应所培养微生物的特点。按微生物的主要类群来说,它们所需要的培养基成分也不同:细菌:牛肉膏蛋白胨培养基放线菌:高氏一号培养基霉菌:查氏合成培养基酵母菌:麦芽汁,营养物的浓度与比例,浓度过高微生物的生长起抑制作用浓度

25、过小不能满足微生物生长的需要。碳氮比(C/N)直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累,故常作为考察培养基组成时的重要指标。,速效性氮(或碳)源与迟效性氮(或碳)源的比例各种金属离子间的比例,物理化学条件适宜,1.pH值:各类微生物的最适生长pH值各不相同细菌:7.07.6,放线菌:7.58.0,酵母菌:3.86.0,霉菌:4.05.8在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,培养基的初始pH值会发生改变,为了维持培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式:内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐,调节培养基的碳氮比。外源调节:按实际需要不断向发酵液内

26、加酸或碱液,2.水活度水活度值是指在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸气压力与同样条件下纯水蒸气压力之比,即wPwP0w。式中Pw代表溶液蒸气压力,P0w代表纯水蒸气压力。纯水w为1.00,溶液中溶质越多,w越小。微生物一般在w为的条件下生长,w过低时,微生物生长的迟缓期延长,比生长速率和总生长量减少。细菌生长最适w较酵母菌和霉菌高,而嗜盐微生物生长最适w则较低。,3.氧化还原电势:不同类型微生物生长对氧化还原电位(Eh)的要求不同。好氧微生物在Eh值为+0.1V以上时,可正常生长,一般以+0.30.4V为宜;可通过增加通气量、加入氧化剂(或O2)进行调节。厌氧微生物在Eh值低于+0.1V条件时

27、可正常生长。兼性厌氧微生物在Eh值大于+0.1V以上时进行有氧呼吸,低于+0.1V时进行无氧发酵。对专性厌氧微生物而言,自由氧对其有毒害作用,培养基的氧化还原电位调节就十分重要。培养厌氧微生物时,除了在配制培养基、灭菌、接种和培养等一系列操作中采用严格的厌氧技术除去氧气外,还要在培养基中加入还原剂,降低其氧化还原电位。,培养基的灭菌及无菌维持,新配制好的培养基必须立即灭菌。高压蒸气灭菌一般培养基:1.05 Kg/cm2,121.3,15-30 min含糖培养基:0.56 Kg/cm2,112.6,15-30 min根据培养基的应用目的选择原料及其来源。是培养菌体还是积累代谢产物?是实验室种子培

28、养还是大规模发酵?代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物?,二、培养基的类型,根据营养成分的来源划分天然培养基、合成培养基、半合成培养基根据物理状态划分液体培养基、固体培养基、半固体培养基根据用途划分基础培养基、加富培养基(完全培养基)、鉴别培养基、选择培养基、菌种保藏培养基、分析培养基等根据微生物种类划分细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、霉菌培养基等。,天然培养基(complex medium)利用化学成分还不完全清楚或不恒定的天然物质,(如肉汤、蛋白胨、麦芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米粉、牛奶、血清等)制成的培养基,天然培养基比较经济,除实验室外,更适宜于生产上大规模地培养微生物。合成(

29、组合)培养基(synthetic medium)由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基,组成成分精确、清楚,重复性强,但微生物生长较慢,且价格昂贵,一般适于在实验室范围内研究微生物营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌种选育、遗传分析等方面的工作。如高氏培养基、察氏培养基等。半合成培养基(semi-defined medium)在合成培养基的基础上添加些天然成份,以更有效地满足微生物对营养物的需要,如马铃薯蔗糖培养基。,液体培养基(liquid medium)液体培养基不含任何凝固剂,菌体与培养基充分接触,操作方便,常用于大规模的工业生产以及在实验室进行微生物生理代谢等基本理论的研究工作。

30、固体培养基(solid medium)天然固体营养基质制成的培养基,或液体培养基中加入一定量凝固剂(琼脂1.52)而呈固体状态的培养基。为微生物的生长提供营养表面。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。可依使用目的不同而制成斜面、平板等形式。半固体培养基(semi-solid medium)在液体培养基中加入的琼脂构成的培养基。常用来观察细菌运动的特征,以进行菌种鉴定和噬菌体效价滴定等方面的实验工作。,凝固剂种类:琼脂(agar):石花菜中提取的高度分支的复杂多糖明胶(gelatin):胶原蛋白制备产物硅胶(silica gel):硅酸纳与盐酸聚合而成,纯无机物理想凝固剂应具备的条件不被

31、微生物分解、利用、液化;不因消毒灭菌而被破坏在微生物的生长温度内保持固态;凝固点的温度对微生物无害透明度好,粘着力强,基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基;另外基础培养基也可作为一些特殊培养基的基础成分(如制备糖发酵培养基时)。营养培养基在普通培养基中加入某些特殊的营养物,如血、血清、动、植物组织液或其他营养物质(或生长因子)的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求苛刻的微生物,或用以富集(数量上占优势)和分离某种微生物。,选择培养基:是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要,或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂

32、的微生物群体中分离出来.鉴别培养基用于鉴别不同类型微生物的培养基,在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,从而产生某种明显的特征性变化,以区别不同的微生物,例:伊红美兰乳糖培养基。厌氧培养基用于培养厌氧微生物的培养基。营养物质的Eh一般控制在-150-420mV。环境中不能有氧。,三、常用培养基,1.细菌培养基营养肉汤:牛肉膏 3g;水1000ml;蛋白胨5g;调pH 7.27.42.放线菌培养基高氏1号可溶性淀粉20g;KNO3 1g;K2HPO4 1g;MgSO40.5g;NaCl1g;FeSO47H2O0.5g;水 1000ml;pH 7.27.43.霉菌培养基查氏培养基蔗糖30g;KCl 0.5g;MgSO4H2O 0.5g;FeSO40.5g;水1000ml;K2HPO41g;NaNO33g;pH6.74.酵母菌培养基麦芽汁培养基,

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