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1、不同油莎豆品种块茎营养成分的比较分析,1 研究背景 2 研究内容 3 实验结果 4 结论,1 研究背景 油莎豆又名油莎草、油莎果，地下结有大量块茎，块茎富含油脂、蛋白质、糖和淀粉，素有“地下核桃”之称。主要用于油粮、饲料、食品、医药、生物柴油、生物润滑油、沼气等行业产品的原料。油莎豆是目前油料作物中地下块茎产量最高的品种，故研究油莎豆的淀粉、脂肪和蛋白质等的含量对工业化提取具有现实意义。,2 实验内容1、不同品种油莎豆块茎中粗脂肪的含量测定2、不同品种油莎豆块茎中粗蛋白的含量测定3、不同品种油莎豆块茎中可溶性糖的含量测定4、不同品种油莎豆块茎中淀粉的含量测定5、不同品种油莎豆块茎中水分的含量测
2、定,1、提取工艺流程 油莎豆（磨成粉）正己烷溶解 过滤 正己烷提取液 滤渣（粗蛋白）多次蒸馏 出正己烷 粗脂肪 苯酚硫酸法 考马斯亮蓝比色法 旋光法 可溶性糖 蛋白质 淀粉 图1 油莎豆营养成分测定工艺流程图,2.1 用浸提法测定油莎豆块茎中粗脂肪的含量 操作方法：挑取干净饱满的油莎豆在75的干燥箱中烘干后粉碎 粒度控制在95%通过80目筛 称取2.00 g豆粉 正己烷浸泡溶解 磁力搅拌器上搅拌2 h后 转入80恒温水浴锅中加热1 h 过滤掉残渣 合并滤液于烧杯中 在100的恒温水浴锅中加热蒸发掉正己烷 再于干燥箱中干燥直至恒量 所得到的黄色液体就是粗脂肪,2.2 用考马斯亮蓝法测定油莎豆块茎
3、中粗蛋白的 含量,原理：用考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。,试剂的配制 100 gmL牛血清白蛋白标准溶液、考马斯亮蓝G-250 2.2.2 蛋白质标准曲线制作 以吸光度为纵坐标，蛋白质浓度作为横坐标作图得标准曲和回归方程：y=0.0048x+0.0004 R2=0.9998,2.2.3 样品处理 取油莎豆粉1.00 g 转移到离心管中 加入用10mL正己烷 搅拌后静置0.5
4、 h然后在4 000 r/min离心10 min 弃去上清液 得到粗蛋白 重复三次后 加入蒸馏水于离心管中搅拌溶解 然后在4 000 r/min离心10 min 收集上清液重复三次 再合并上清液 定容于100 ml的容量瓶中。,再取待测样品提取液各0.1 mL,再加入0.9 mL蒸馏水，5.0 mL考马斯亮蓝G250试剂，充分混合，放置2 min后，在595 nm波长下比色记录吸光度。在标准曲线上查得相应的蛋白质含量（g），按下式计算蛋白质含量。油莎豆蛋白质含量%V为提取液总体积(ml)C为提取液的蛋白质含量(g/ml)W为油莎豆块茎(g),2.3 用苯酚硫酸法测定油莎豆块茎中可溶性糖 的含量
5、 原理：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10100 mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在490nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160 min以上。,试剂的配制 70乙醇，葡萄糖标准溶液（100 g/mL）：5%苯酚溶液（需要当天配制）2.3.2 葡萄糖标准曲线制作 以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度作为横坐标作图得标准曲和回归方程：y=0.0083x+0.0154 R2=0.9991,2.2.3 样品处理称取油莎豆粉1.00 g 放入离心管中 再加入10
6、mL正己烷充分搅拌 在4 000 r/min离心10 min 弃去上清液 重复脱脂数次后 再加入15 mL 70乙醇 搅拌使可溶性糖充分溶解 然后在4 000 r/min离心10 min 收集上清液 重复以上操作数次 合并上清液于100 mL容量瓶中,取待测样品提取液 1.0 mL稀释于50 ml的容量瓶，再取稀释液1.0 ml于试管中，按标准曲线的测定方法依次加入试剂，在490 nm波长下测吸光度。根据所测样品提取液的吸光度，在标准曲线上查得相应的可溶性糖含量。按下式计算：可溶性糖%=V为提取液总体积(ml)C为提取液的含糖量(g/ml)W为油莎豆块茎(g),2.4用旋光法测定油莎豆块茎中淀
7、粉的含量,2.4.1 原理：酸性氯化钙溶液与淀粉共煮时可使淀粉发生轻度水解，同时钙离子与淀粉分子上的烃基络合，这就使得淀粉分子充分地分散到溶液中，成为淀粉溶液。淀粉分子由于具有不对称碳原子，因而有旋光性。所以利用旋光仪测定淀粉溶液的旋光度。,2.4.2 溶液的配制：氯化钙-乙酸溶液：溶液密度为 1.30.02，pH值为2.30.02，30硫酸锌溶液，15亚铁氰化钾溶液2.4.3 样品的处理：脱脂：称取油莎豆粉1.0 g，放入离心管中，再加 入10mL正己烷，用玻璃棒充分搅拌后，在4 000 r/min离心10 min，弃去上清液，重复脱脂数次。脱糖：加入15 mL 70乙醇，搅拌使可溶性糖充分
8、溶解，然后在4 000 r/min离心10 min，倾去上清液，重复以上操作数次。,2.4.4 溶提淀粉：加醋酸氯化钙：先加入醋酸氯化钙溶液约10 ml到离心管中 搅拌后全部倾入到三角瓶内 再用醋酸氯化钙溶液50 ml分数次洗涤离心管 合并洗涤液到三角瓶内 煮沸溶解：先用标签标记液面高度 置于加有石棉网的电炉上 在3 min4 min内迅速煮沸 保持沸腾15 min 立即将三角瓶取下 置冷水中冷却（煮沸过程中要不断搅拌，并加水保持液面高度）,加沉淀剂：将三角瓶内的水解液转入100 ml容量瓶 加 30ZnSO41 ml摇匀混合后 再加15 K4Fe（CN）61 ml（如果有泡沫可加无水乙醇数滴
9、以破坏泡沫）用蒸馏水定容到刻度 混合静置以使蛋白充分沉淀 过滤：先倾入上清溶液约10 ml于滤纸上，使滤纸完全湿润，等溶液流干弃去滤液，再将剩余溶液进行过滤。用干燥的容器接受此滤液，收集约50 ml，即可供测定之用。,2.4.5 样品测定：将旋光仪打开预热2 min左右，用旋光测定管装满滤液，按照旋光仪使用说明，进行旋光度的测定。结果按下式计算：淀粉（）100/20DLW100 式中：a：用钠光时观测到的旋光度；20D：淀粉的比旋度，在这种方法条件下为203；L：旋光管长度（dm）；W：样品质量（g）。,2.5 用直接干燥法测定水分的含量 水分的测定直接参照GB/T 5009.3-2003食品
10、中水分的测定方法即直接干燥法.各称1.5 g油莎豆粉末,105下烘干至恒重,用分析天平称量。,3 结果与分析,3.1 油莎豆块茎中粗脂肪含量 表1 不同品种油莎豆块茎中油脂的含量(%),3.2 油莎豆块茎中粗蛋白含量 表2 不同品种油莎豆块茎中粗蛋白的含量(%),3.3 油莎豆块茎中可溶性糖含量 表3 不同品种油莎豆块茎中可溶性糖的含量(%),3.4 油莎豆块茎中淀粉含量 表4 不同品种油莎豆块茎中淀粉的含量(%),3.5 油莎豆块茎中水分含量 表5 不同品种油莎豆块茎中水分的含量,经过测定，三种油莎豆主要营养成分列于表,并与国家农场种植油莎豆和花生的营养成分进行比较。表6 油莎豆和花生的主要
11、营养成分对比(%),从表6中我们可以看出粗脂肪的含量是最多的是莆院5号油莎豆，蛋白质、可溶性糖、淀粉、水分含量最多的是莆院6号油莎豆。从表中我们也可以看出由我校课题组提供的油莎豆所含的脂肪、蛋白质、糖含量明显低于国家农场种植的油莎豆，而淀粉含量要高于国家种植。说明油莎豆营养成分含量不仅与种植的地区、土壤、环境、管理水平而异，也与品种有关。,从表中我们也可以看出油莎豆的脂肪、蛋白质含量低于花生，但是花生中几乎含有很少的糖和淀粉。所以说油莎豆中不但含油量高、而且富含淀粉和糖分，是许多油料植物和谷物无法比拟的。油莎豆中的糖含量可达到20%，也是极具有开发价值的。而油莎豆油现主要是发展生物柴油，以缓解国内用油紧张。,谢谢！,
