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1、第三章食用菌菌种生产,本章重点：食用菌制种条件，培养基种类及配方，菌种分离方法，无菌接种技术，菌种培养、保藏等方法措施。教学目的：使学生掌握食用菌母种、原种、栽培种的制种技术。,第一节食用菌菌种的概念,一、菌种的概念原意是指孢子（相当于植物的种子），但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。二、菌种的类型在生产中根据菌种的来源、繁殖代数及生产目的，把菌种分为母种、原种和栽培种。分别叫一级种、二级种、三级种。,母种：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成。可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。原种：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的
2、作用。原种可以直接出菇。栽培种：由原种扩繁而成。主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。,第二节食用菌制种条件,一、食用菌制种程序,种菇,试管培养基,培养,母种,固体培养基,原种,固体培养基,栽培种,培养,培养料灭菌,培养基灭菌,培养料灭菌,培养,二、制种的基本设备和条件1.接种条件接种室,接种箱,超净工作台,酒精灯和接种工具,2.培养条件菌种培养室,恒温培养箱,3.消毒灭菌条件灭菌条件高压灭菌锅,手提式,大型高压灭菌锅,常压灭菌锅,常压灭菌锅,3.消毒条件,常用的消毒药剂有：酒精、甲醛、硫磺、多菌灵、克霉灵、气雾消毒剂、生石灰、高锰酸钾等。紫外线灯30W4.制种常用容器玻璃容器：试管、培养皿、
3、三角瓶、罐头瓶、菌种瓶等。塑料容器：聚乙烯、聚丙烯塑料袋或筒料，塑料套环，聚丙烯膜等。5.菌种保藏条件 冰箱 冷藏室 冷库,第三节食用菌菌种的培养基,一、培养基,1.概念：培养基是采用人工的方法，按照一定比例配制各种营养物质，以供给食用菌生长繁殖的基质。2.种类：液体培养基固体培养基固化培养基液体培养基优点是营养分布均匀，有利于菌丝吸收，理化条件易控制，便于机械化操作；菌丝生长迅速，产量高。固体培养基优点是原材料广泛价格低廉，配制容易。固化培养基是指将各种营养物质按比例配成营养液后，再加入适量的凝固剂，冷却后凝固。,二、母种培养基,1.常用母种培养基配方马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g
4、，水1000ml。马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生B110mg，水1000ml。,2.试管培养基制作称重马铃薯去皮切成小块加水煮沸30分钟左右过滤取汁加糖、琼脂及其它营养趁热分装试管塞好棉塞每7个捆成一梱棉塞部位用牛皮纸包好灭菌摆鈄面。装入试管的量为试管的1/51/4高度。,三、原种和栽培种培养基,1.培养基配方1）阔叶树锯末78%，米糠或麸皮20%，石膏粉1%，蔗糖1%，加水至含水量50%60%。2）谷粒（玉米、麦粒等）1000克，石膏粉13克，碳酸钙4克。2.培养基制作拌料灭菌谷粒煮熟而又不胀破，拌入石膏粉，装瓶灭菌。,第四节食用菌菌种分离,菌
5、种分离是菌种纯化的基本方法，是制种的重要环节。组织分离 菌种分离孢子分离 种木分离,一、接种箱和超净工作台的使用,1.接种箱擦净放入物品（培养基、接种工具等其它物品熏蒸30分钟或紫外灯照射30分钟点燃酒精灯接种2.超净工作台擦净放入物品紫外灯照射30分钟关掉紫外灯打开过滤风机点燃酒精灯接种.,无菌操作及转管,1.无菌操作即在绝对无菌的条件下接种。2.转管将母种接到试管培养基上，目的扩大数量，也叫扩繁。,无菌室,超净工作台,酒精灯,三、菌种的分离,1.组织分离法选择头潮菇，菌肉肥厚，形正，未散孢，八分成熟的种菇。消毒接种培养纯化试验,孢子分离法是用成熟的有性孢子萌发培养成菌丝体而得到的菌种。消毒
6、采集孢子接种培养挑菌落纯化,第五节食用菌菌种制作,这节内容主要是通过实践课来完成，下面仅介绍制种的工作程序和需要注意的问题,一、培养基的选择与制备,1.培养基的选择根据菌类所需要的营养，菌种的保存时间，栽培季节，栽培料资源来确定培养基配方。2.培养基制备注意：含水量适宜，装瓶的松紧度适宜，培养基做好后或拌料装瓶后应马上灭菌。,二、接种,一支试管可以扩繁为2030支试管,一支试管可以扩繁为五瓶原种,一瓶原种可以接3040瓶栽培种,第六节菌种的培养,1.营养成分2.水分和空气3.温度4.光线5.酸碱度6.培养时间7.定期检查,第七节菌种质量的鉴定,菌种质量的鉴定一般是从菌种的纯度、长势、颜色、菌龄
7、、均匀度和出菇快慢等6方面进行鉴定的，最可靠的方法就是出菇试验。,一、母种质量鉴定,1.转管次数最多不超过45次2.菌龄低温保存不超过6个月3.外观菌丝浓白、粗壮、富有弹性、爬瓶力强，没有干燥、收缩现象和大量红褐色液体。4.长势菌丝生长快、整齐、浓而健壮。5.温度适应性在适温培养后，放在高温下培养几小时，菌丝仍能健壮生长的。6.干湿性鉴定7.出菇试验,二、原种和栽培种质量的鉴定,原种、栽培种最好不做贮备菌种，按栽培时期有计划地生产。接原种的母种转管次数要少。外观要求：1.菌丝生长健壮，绒状菌丝多，生长整齐。2.菌丝己长滿培养基，有的要求有分化的子实体原基。有菇香味，无异味。3.菌丝色泽洁白或符
8、合该菌的颜色。4.菌种瓶内无杂色出现和无杂菌污染。5.菌种瓶内无黄色汁液渗出。6.菌种培养基不能干缩与瓶壁分开。,第八节菌种保藏和复壮,一、菌种保藏通常采用干燥、低温、冷冻、缺氧和真空保藏，即使生命处于休眠状态。1.斜面低温保藏42.液体石蜡保藏3.滤纸保藏4.自然基质保藏,二、菌种复壮,菌种复壮是使生活力降低的菌种恢复或提高到原有健壮的程度。1.加富培养法2.交替培养法3.顶端菌丝复壮法,复习思考题,什么叫食用菌菌种？它有哪些类型？为什么要繁殖一、二、三级的菌种？食用菌制种需要哪些条件？高压灭菌锅和常压灭菌锅各有哪些优缺点？培养基有哪些类型？怎样进行无菌室、无菌箱消毒？什么是无菌操作？菌种分离有哪些方法？生产中常用的是哪一种？优良有母种、原种、栽培种一般符合哪些要求？,需要掌握的基本技能,母种培养基的制备母种扩繁和无菌操作高压灭菌无菌室、无菌箱消毒灭菌原种、栽培种培养基的制备原种、栽培种接种组织分离,
