《Ⅱ微生物发酵产酶》PPT课件.ppt

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1、 微生物发酵产酶,一 生产工艺流程 1.收集筛选菌种:2.菌种保藏:3.细胞活化:4.根据菌种选培养基扩大培养:5.发酵管理:发酵工艺流程:收集筛选菌种菌种保藏细胞活化扩大培养发酵管理,收集、筛选菌种,1.用钱购买菌种2.收集土样筛选菌种 收集土样 初筛:单菌落培养,用透明圈法选出产 目的酶的微生物(使用鉴定培养基)复筛:单菌落培养,选出符合优良菌种 要求的菌落(使用选择培养基),菌种保藏,菌种保藏方法:(1)斜面培养法(2)(3)(4)(5)(6),细胞活化,保藏的菌种通常以芽孢形式存在(保藏时营养缺乏),需放入营养充足的营养环境中活化:芽孢营养细胞,扩大培养,1.定义:根据菌种特点配制培养

2、基,使菌种 大量繁殖用于发酵2.方法:种子罐培养;实验室培养(工业生产)(实验室)3.目的:使菌种大量繁殖,用于发酵培养基配制:碳源、氮源、生长因子、无 机盐、水CN:碳源:糖加碳源加C/N酸性利于菌种 保存(作保存培养基)氮源:有机、无机加氮源减C/N碱性 利于酶制剂生产(产酶需N元素),产酶微生物,1.菌种要求:繁殖力强(繁殖周期短)产酶稳定,产酶能力强 安全(不用病菌)利于发酵管理(易于发酵)2.常用产酶微生物:略单菌落培养法:稀释涂平板,长单菌落,易 于分离透明圈法:例如:明胶作培养基可鉴别出产蛋白酶 的菌落(明胶是蛋白质,蛋白酶可分解明胶)CaCO3作培养基可鉴别出产酸菌落(产生 的

3、酸可分解CaCO3,形成透明圈),发酵管理,1.温度、PH:最适生长温度、PH与最适产酶温度、PH不同,要实时监控、调节温度、PH 温度:0-10oC;PH:酶活力范围内,防酶变性调PH方法:CaCO3(备用碱)磷酸缓冲液:维持PH稳定 调C/N:只工业上适用,C/N酸,C/N碱2.增大溶氧量:(1)搅拌,使大气泡变为很多小气 泡(2)加大通入氧气量,3.气泡:产生:搅拌发酵液增大溶氧量 危害:阻碍CO2排出,使PH减 小,使发酵液变酸,影 响微生物生长、产酶 气泡过多会使菌液漫 出,造成菌种污染 消除方法:机械消泡、化学试剂 消泡、表面活性剂消 泡4.湿度开始:低后来:高,5.提高酶产量的方法加诱导物减阻遏物转基因(获得产酶能力强的微生物去产酶)加表面活性剂加产酶促进剂,微生物生长与产酶模式,微生物生长模式:调整期、对数期、平衡期、衰亡期产酶模式:1.同步合成型:调整期始产酶,平衡期始停产 2.中期合成型:对数期始产酶,平衡期始停产 3.滞后合成型:平衡期始产酶,衰退期始停产 4.延续合成型:调整期始产酶,衰退期始停产提高产酶能力的方法(变为延续合成型)1.非调整期始产酶(中期、滞后):有营养物阻遏效应,减少营 养阻遏物浓度2.平衡期始停产(同步、中期):mRNA不稳水解,降温使mRNA稳,

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