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1、第二章 无脊椎动物的采集和标本制作第一节 概 述,二、无脊椎动物的处理方法和标本种类生物标本是经过一定方法和手段处理后，能反映生物的某些特征，可较长时间保存的生物个体或局部。标本按制作方法可分为浸制标本和干制标本；按大小可分为宏观标本和显微标本。1.浸制标本是采用保存液来防腐的标本，如果保藏得好，这种标本可以长期保存下来。它能清晰地显示生物体的外部形态和内部构造，还能长期保持生物体的本来色泽。,浸制标本可分为：（1）动物整体浸制。（2）动物解剖标本浸制。（3）生长发育（生活史）标本浸制。,动物整体浸制,动物解剖标本浸制,动物解剖标本浸制,生长发育（生活史）标本浸制,2.干制标本适应于脱水后不变
2、形或不大变形的个体器官。干制标本包括：剥制标本、骨骼标本、玻片标本、螺贝类干制标本、棘皮动物干制标本、昆虫针插标本、鸟巢及卵标本等。,剥制标本,骨骼标本,无脊椎动物整体浸制标本的制作无脊椎动物种类繁多，有的躯体柔软，有的体被硬壳，有的躯体具较强的伸缩性。在制作标本时随上述特征而有所不同。1躯体柔软的动物：如扁形动物门中的蜗虫可用1的铬酸处死及固定。为防止身体发生卷曲，可将固定后的标本用毛笔挑在培养皿中的一张湿滤纸上，放开展平。其上再加一张滤纸，把动物夹在中间，纸上放几片载玻片，再加入10福尔马林液，经12h后，去掉滤纸并移入5福尔马林溶液中保存。华枝睾吸虫的浸制标本也可采用此法进行。,2身体容
3、易伸缩的动物：为防止动物因浸制而产生收缩，常采用下列方法进行制作：（1）麻醉法：一般采用酒精、硫酸镁、薄荷脑、乙醚等麻醉剂先行麻醉，待动物深度麻醉后，再浸入保存液中保存。薄荷脑麻醉法将具有触手的腔肠动物放入盛有水液的玻璃容器内，使动物距离水面1cm左右，待动物全部伸展后，将薄荷脑轻轻洒在水面上成一薄层（或以纱布将薄荷脑包起，用细线缠成直径约1cm的小球，将纱布球轻轻放在水面上），放置一段时间后（约1h），待动物已完全处于麻醉状态（用解剖针触动动物的触手，完全不动时），即可向容器中倒入纯福尔马林液，使其浓度达7时为止。最后将已固定的标本转入5福尔马林液中保存。,酒精麻醉法用95%酒精一滴滴加入培
4、养有动物的水液中，使其达到10%左右的浓度，经1到几个小时后，用针刺动物，见无反应时，迅速将它浸入80%酒精内保存，或浸入到10%福尔马林液中固定保存。线形动物及环节动物的标本制作可采用此种方法。（2）窒息法：将螺类放入玻璃瓶中，加满清水不留空隙，再盖紧瓶盖，使瓶中没有空气存留。经数小时后，可见其腹足类头部与足部伸出亮口，如触之不动时，即用10%福尔马材液或80%的酒精固定保存。,3体被坚硬外壳的动物：如软体动物中的瓣鳃类，为促使其外壳张开，使固定液迅速浸入动物体内，可先将动物浸泡在开水内，待动物死亡贝壳自开后，取出并用清水冲洗干净。注意在开水中将其烫死时，不能放置太久（数分钟即可），否则内部
5、柔软组织易被损坏。如需长久保存的标本，壳较厚且没有光泽，可用10福尔马林液保存，而有光泽的种类最好用80%的酒精固定保存，以免贝壳失去光泽。,玻片标本制作显微玻片标本的制作方法常用的有石蜡切片法和整体装片法两大类。根据对玻片标本不同的要求，又可分为临时和永久玻片。（一）切片法切片法的主要步骤有：取材、固定、冲洗、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、复水、染色、脱水、透明和封片等步骤。（二）装片法适用于原生动物、水螅、涡虫、吸虫、绦虫节片、昆虫、昆虫外部器官和多细胞动物早期胚胎等。装片的方法同于切片法，但无需浸蜡以后的步骤，透明后直接封片。身体柔软的动物制作装片时，成功的关键是麻醉。如水螅
6、，在表面皿中放入水和水螅，待其完全伸展时分几次加入少量薄荷脑结晶，直到用探针触动其触手不动时，方可加入固定液，麻醉的时间有时需要数小时。,三、浸制标本封瓶法（一）几种常用的保存液和固定液（二）封瓶:浸制标本，如果不需经常取出来观察或供实习鉴别用，均应封口。圆柱形标本瓶的瓶盖经过磨砂加工，能盖紧；而方形标本缸的盖是一块边缘磨砂的玻璃，不能盖紧，所以封口的方法是不一样的。1.标本缸封口2.标本瓶封口 3.包口,第二节 原生动物的采集和标本制作,一、原生动物的采集原生动物大都生活在有机质丰富、水质腐败且不大流动的污水中。不同的水质，生活着不同种类的原生动物。寻找水源、观察水质是采集的关键。污水沟液面
7、上有一层白色膜状覆盖物，这样的污水沟草履虫一般比较多。有绿眼虫的污水沟，沟两侧呈绿色，沟底是黑色的污泥，发出一种腐败的臭味，采集时舀取污水、水底黑色污物和两侧绿色污物。在绿眼虫的采集地同样可采集变形虫。,（一）绿眼虫1.绿眼虫的采集眼虫多集中于不流动、腐殖质较多的沟渠与池塘，或积有污水的水坑，尤其是带有臭味发绿色的水体中。只要用玻璃瓶盛取绿色水体，即完成了采集工作。2.眼虫的分离纯化由于多数情况下采到的样本中杂有其他原生动物，为得到供实验用眼虫种群，必须进行分离纯化。,分离方法用细滴管吸取从野外采集到的水样，并逐滴滴于载玻片上，在解剖镜或低倍显微镜下观察这些水滴。当发现有眼虫的水滴时可迸一步将
8、其稀释。方法是：用沸水烫一下滴管，并吸取蒸馏水滴于有眼虫的水滴上，以稀释虫体浓度，再用该滴管吸取这滴水滴。如果原来虫体浓度很高。可不必全部吸人滴管中。然后把载玻片用吸水纸擦干，用上述吸有虫体的滴管再依次在载玻片上滴成数小滴，并逐一检查这些水滴，当发现只有l只虫体的水滴后，把其他水滴用吸水纸擦干。最后用沸水处理过的细滴管吸取该水滴，把它接种到放有培养液的小试管中，让其繁殖到一定的数量后，再接种至500m1的三角烧瓶中扩大培养。如果没有特殊的要求，也可把不含其他原生动物和轮虫的数个眼虫一起放人500ml的三角烧瓶中扩大培养。,3.眼虫的培养取富含腐殖质的菜园土2030g置于三角瓶中，加水至瓶容积2
9、/3处，瓶口包扎双层纱布。煮沸l5min，室温放置24h。将分离出的眼虫，接种至装有上述培养液的三角瓶中，用纱布扎紧，置三角瓶于不被阳光直射的窗口，在25室温下培养l0d，一般可得到大量的眼虫。眼虫培养液主液亦可采用下述配方：（1）醋酸钠（结晶）6g；胰蛋白胨1g；蒸馏水1000mlpH7.3。（2）醋酸钠（结晶）2g；蛋白胨5g；葡萄糖2g；蒸馏水1000ml。,（二）草履虫1.采集草履虫喜欢生活在有机质丰富且流动缓慢的水沟或池塘中，在水面浮游，可以选择有枯草的地方舀水采集，采集的水样通常混有其他种类的原生动物或小生物，应进一步进行分离培养。2.培养（1）培养液的制备稻草培养液将未受污染的稻
10、草剪成12cm小段，按质量比(水：稻草)100:1的比例放入烧杯中，在烧杯壁上标记水面位置。加热煮沸10分钟后，把水添加到标记处，再次煮沸即可。在烧杯上盖上双层纱布，放置24小时后即可用来培养草履虫。加热的目的：1)杀死原生动物的包囊；2)溶解稻草中的小分子，提供营养。放置24小时盖双层纱布的原因：1)使培养液中溶解足够的氧气；2)让培养液中微生物大量繁殖，为草履虫提供食物。,（2）纯培养滴一滴采集液在凹玻片中，放在解剖镜下观察，用微吸管将多余的生物吸掉，只留下一只草履虫，再添加35滴培养液。选一个培养皿，在其中加入清水，水的深度不能超过凹玻片的厚度，将凹玻片放在培养皿中，盖上培养皿，放在室内
11、或人工气候箱内培养，温度25C左右。,第二天补充培养液。第三天将凹玻片中的草履虫全部转移至试管中培养，随草履虫数目增加，适当增加培养液，再扩大培养。,（三）变形虫1.采集变形虫一般生活在有机 质较丰富的水体中，附 着在水生植物上，采集 时将水生植物茎叶一起 采回即可。2.培养（1）培养液的制备小麦粒培养液将水和小麦粒按1000ml:5060粒的比例放在烧杯中，标记水面，煮沸15分钟后，将水加到标记处，再次煮沸。盖上双层纱布，放置24小时即可用来培养变形虫。,（2）粗放培养用采集的茎叶在干净的载玻片上用力涂擦，在不盖盖玻片的情况下，在低倍镜下观察变形虫的形态特征。在光线较暗的条件下，看到略带蓝色
12、的小亮点即为变形虫。发现变形虫后，用吸管吸取放置了24小时的凉开水进行冲洗。冲洗前为了使变形虫更好地吸附在载玻片上，用镊子敲击一下载玻片。选一个培养皿，在其中滴加培养液，培养液的厚度大于载玻片的厚度，将有变形虫的载玻片浸入培养液中，盖上培养皿。在培养过程中可以在载玻片两边的培养液中各放1粒小麦，补充营养。,二、变形虫、草履虫、眼虫标本的制作变形虫、草履虫、眼虫等单细胞原生动物适合制作装片。（一）草履虫装片制作取草履虫培养液2-3 ml，离心沉淀-加蒸馏水3-4 ml，多次离心沉淀-加肖丁氏固定液2-3 ml，固定2-3小时，离心沉淀加50%酒精3-4 ml，5分钟后离心沉淀-加稀碘酒（50%酒
13、精100 ml，加碘0.1克）3-4 ml，5-10分钟后沉集-加加70%酒精3-4 ml，5分钟后沉集加苏木素染液1 ml，浸染1小时，加50%酒精3-4 ml，离心沉淀-加50%酒精4-5 ml，1-2分钟后离心沉淀加0.5%的盐酸酒精1-2 ml进行分色，0.3分钟后离心沉淀-加70%酒精3-4 ml，1分钟后离心沉集-加碱酒精（70%酒精加氨水0.5 ml）2-3 ml，分色1分钟离心沉淀加90%酒精3-4 ml，2分钟后离心沉集-加纯酒精3-4 ml，2分钟后离心沉集涂片，放置干燥1小时-用加拿大树胶封固。,（二）眼虫的玻片制作与观察采集时通过肉眼，观察到含有绿眼虫的水体呈现绿色。要
14、进行进一步观察，必须做成玻片使用显微镜观察：用滴管吸取颜色较深部位水样，滴一滴在载玻片中央，然后盖上盖玻片后，用吸水纸吸去多余的水，即可进行显微镜观察。先用低倍镜观察，注意滴的水样应尽量少些，使眼虫活动减慢，便于观察；或者在载玻片上的水样液滴中放几根棉花纤维，以限制动物的运动。眼虫的鞭毛不经染色也可看到，但需将光线调暗一些，仔细观察，常可见到鞭毛摆动。（三）变形虫装片制作实验室常用的方法有直接涂片法、直接沉淀法、离心沉淀法、碘液染色法和苏木素染色法，具体制片过程可以参考草履虫的装片制作。,（四）草履虫分裂生殖装片制作1.草履虫分裂虫体的培养。将培养的虫体液用致密的布料过滤，然后放入过夜的1%稻
15、草水液中，并加入适量的酵母水溶液以丰富食料，精置培养。2.虫液澄清。按每100ML培养液加入4%明矾水溶液0.4-0.6ML搅匀静置，待虫液中的杂质或溶解态的胶状物沉淀下来。3.固定、脱汞。将澄清后的虫液慢慢倒出，然后每100ML虫液加入预固定液10ML静置数分钟。将预固定的虫液用250目的过滤筛过滤，以除去水分，取下筛底，用镊子夹着于固定液中反复抖动或用滴管冲洗，使虫体落入固定液中，固定数小时至24小时。将固定好的虫液倒入250目或300目的小型过滤筛中，置于盛有体积分数95%酒精的大型称量瓶中，滴入碘液数滴以脱汞。当碘液失去颜色后再适当滴入，当碘液不再褪色时，脱汞完毕。,4.制片。染色、脱
16、水、透明及浸胶等程序均用上述小型过滤筛操作。（1）核染色。（2）脱水及胞质复染。（3）透明及浸胶。（4）排队。（5）封片。,第三节 腔肠动物的采集和标本制作,一、腔肠动物的采集1.水螅（1）采集采集时间和地点：在春秋两季，选择天气晴好的日子，到水螅生活的环境（水流缓慢、水质清洁、水草茂盛的池塘和溪流）中去寻找。夏冬两季，被污染的水域和水流湍急的地方，很难采集水螅。采集方法：站在水边仔细寻找，不能拨动水草，更不能涉入水中。如果发现水草上有水螅，可以先用广口瓶在远处舀取池水，再用镊子轻轻夹取附有水螅的水草，放入瓶内。,（2）培养培养水螅的玻璃缸上面要盖玻璃盖或纱布，以防落入灰尘或昆虫。每隔两天向缸
17、水中用吸耳球吹些空气进去，或用玻璃棒轻轻搅拌几下缸内的水，以保持水内有一定量的氧气。玻璃缸放的位置应使其既能见到阳光，又避免阳光直射。藻类培养法：用大玻璃缸装自来水放置24小时以上。取池塘、沟渠中带有绿藻的水，用离心机把绿藻收集成团，加入玻璃缸中。将瘦牛肉或蚌肉、螺肉用水煮沸10分钟，用冷水清洗数次后加入玻璃缸中。把鱼虫加入玻璃缸中。,马粪水培养法：按马粪1千克、泥土2千克、水1500ML的比例，先在容器内放泥土，加入马粪，再加水1500ML，保存在1518，放置15天左右.用细筛或细纱布过滤2次，滤液静置一夜后取其上清液，煮沸10分钟，冷却后备用。同时取马粪水一份，加水510倍，然后加入鱼虫
18、。采用此种培养液时，应注意：及时换水。控制水温。限制喂食量。,2.海葵海葵为海生腔肠动物，我省舟山沿海的海涂、海边礁石上生活着泥涂大海葵、砂栖海葵、红海葵等多种海葵。在海水里，海葵身体、触手伸展，一受刺激全身收缩成一团。,（1）采集：海葵基部的附着力极强，由于和岩石粘贴牢固，徒手很难采集完整的标本，因此采集时须用尖头刀将它连同其固着的一部分岩石一起取下。采集海葵时要带盛水容器，将采到的海葵放在盛海水的容器里带回。（2）观察：将海葵采回后，放入玻璃缸中，静置一段时间，只要其身体没有受伤，就会舒展躯干，伸展触手。此时，是观察的良好时期。,二、水螅、水母、海葵标本的制作1.水螅浸制标本制作先将水螅用
19、滴管移在表面皿或培养皿内，待触手伸出后，将加热的波因氏液从水螅后端向前端迅速喷射，把水螅杀死，然后把水螅移到50%酒精中固定12-24小时，接着用70%酒精固定 6小时，最后移到盛有70%酒 精的瓶中，瓶口可用 橡皮塞或软木塞塞紧，再用石蜡加以密封。,2.水母浸制标本制作采回的水母，一般是一个容器内放一至两个。容器内装满海水，使水母能够伸展活动，恢复自然状态。然后用包有硫酸镁或氯化锰的纱布包放在容器里，每隔10分钟放一次，放时勿触及水母，以免引起触手、口腕收缩，影响处理质量。硫酸镁一包一包地放入后，2-3小时后，水母便被麻醉，此时可用小木杆触动检查，若没有反应，说明其已被麻醉。及时将水母取出来
20、，然后在适当大小的标本瓶中用7%-10%的福尔马林保存。,3.海产腔肠动物的标本制作（1）水螅类：大多群居生活，附在浮木、海藻等物上。用刀片沿基部刮下或连同附着物采下。首先用海水培养，待触手完全伸展后，用泻盐或薄荷脑麻醉。每隔十多分钟加一次麻醉剂，随时观察，待触手不再收缩时，用甲醛杀死，最后用5%甲醛液保存。（2）海葵类处死、固定：将海葵放在盛海水的容器里，容器大小适中。静止一段时间，海葵全身伸展。用滴管吸取饱和硫酸镁溶液，慢慢加入容器里，随着容器里硫酸镁溶液浓度增加，海葵麻醉了。当用针刺激海葵，海葵不收缩时，将海葵投入85%酒精溶液中，或者15%甲醛水溶液中固定一周。装瓶、保存：经固定后的海
21、葵用丝线绑在玻璃片上，放入标本瓶，用5酒精溶液，或者15%甲醛水溶液保存。淡水里有一种小型腔肠动物-桃花水母，处死、固定方法同海葵。,（3）水母类：浮游生活，七八月间成群地浮在海面。采集时可乘船用小盆连同海水捞取或用手捧起，以防伞沿损坏。海蜇采集方法同上。采集后放入较大的盛海水的容器中，不要拥挤。待恢复自然状态后，用泻盐饱和溶液麻醉，每隔10分钟加一次麻醉剂。触手不再收缩时，用甲醛固定12小时，最后移入5%的甲醛中保存。（4）海仙人掌,海月水母,桃花水母,4.水螅整体装片制作水螅可以制作整体装片，也可以制作纵切片、横切片（过精巢、过卵巢），其制作过程基本相同，只不过整体装片不需要石蜡包埋，而切
22、片需要固定、脱水、透明处理后，经包埋、切片、脱蜡，再进行染色封片。,整体装片制作步骤如下：将培养的水螅取1-2个及一部分培养液移于玻璃培养皿中静置。待完全伸展后，用粗吸管吸取热的波因氏液从其身体基部向口端急速浇射，将水螅快速杀死。移入新的波因氏液中固定2-3小时。放入30%、50%的酒精中各浸5分钟。用硼砂洋红染色剂3-4小时。放在50%酒精中0.5分钟，过染时用0.25%盐酸酒精（70%）分色。放入70%、90%的酒精中各浸2-3分钟。放入100%的酒精中各浸5-10分钟。用100%的酒精和二甲苯的混合液（1：1）处理1-2分钟。把材料移在载玻片上，加二甲苯一滴，5-10分钟后，用加拿大树胶
23、封固。,第四节 扁形动物的采集和标本制作,一、扁形动物的采集 1.三角涡虫（1）采集：涡虫营淡水生活，特别喜欢生活在阴凉的溪流中。常常隐蔽在水底石块或树叶下面。以捕食水中的小型甲壳类、轮虫、线虫和昆虫幼虫为主。采集时，应选择有树叶的林下或背阴处的溪流，翻动树叶和水底石块，常常可以找到涡虫。（2）培养：培养涡虫可用玻璃缸作为培养容器。将玻璃缸洗刷干净后，在缸底铺上一层洁净的砂和一些可供涡虫藏身的大小石块，并放入一些水草，然后再将涡虫放入培养。,培养过程中应注意：涡虫喜阴凉环境，在夏季应将饲养缸放在阴凉处。培养用的水最好用泉水，如果用自来水，则需放置2-3天后才能使用。涡虫是肉食性动物，食料可用煮
24、熟的蛋黄、猪肝、猪肉和螺肉等。喂食时，将食料投入水中，任其自由取食，半天以后，取出剩余食料，并进行换水。换水时应同时刷洗培养缸，以保持水质清洁。喂食次数不宜过勤，每星期2-3次。2.吸虫：可以根据各种吸虫的寄主特性和寄生部位，到肉联厂或寻找病死畜禽，进行解剖，在各个脏器的洗涤物中如发现有吸虫，要用解剖针或毛笔仔细地将虫体挑出，把虫体放入生理盐水中，用毛笔轻轻洗去虫体上的粪渣或粘膜等物。,二、涡虫、吸虫标本的制作 1.平角涡虫及其他海产扁虫 采集回室内后，放入盛新鲜海水的大培养皿中，待动物伸展后，可用少量薄荷脑麻醉3小时，再用7%的甲醛杀死。数分钟后已死未硬化时取出放平展开，加几片载玻片压住，经
25、12小时后可得到扁平的标本，最后用5%的甲醛保存。,2.吸虫标本制作（1）浸制：吸虫被水洗洁净后，如已自然死亡，即可用固定液固定。但如果虫体没有死亡，为了加快工作，可用薄荷脑溶液处理，使虫体尽快地松弛并死亡。常用的吸虫固定液有：70%酒精。巴氏液（福尔马林3份加生理盐水97份而成）。酒精福尔马林醋酸固定液（95%酒精50份，福尔马林10份，醋酸2份，水38份）。劳氏固定液（饱和升汞水溶液100ML加冰醋酸2ML）。福尔马林固定液（福尔马林1份与水9份混合而成）。（2）装片制作苏木素染色法：卡红染色法：3.绦虫的采集、固定和保存法（1）绦虫的采集法（2）绦虫的固定法,第五节 线形动物的采集和标本
26、制作,一、线形动物的采集1.蛔虫：寄生于人体的蛔虫比较容易找到，一般可通过医院或直接与驱蛔患者联系来取得活材料。取得蛔虫后，应放在温和的（36左右）的0.5%的食盐水中洗涤，然后再用清水清洗；洗后放在70%的酒精中杀死、固定。固定需要2-3天，时间长些也无关系。固定完毕，把蛔虫顺着放在玻璃片上，用白丝线绑缚数道。最后放在盛有80%酒精的长标本瓶中保存。,2.蛲虫：获取蛲虫的方法和上述获取蛔虫的方法相同。采集后放在温和的0.5%的食盐水轻轻洗涤，随之用吸管将之移在70%的酒精10ML、5%的福尔马林5ML、醋酸0.5ML、蒸馏水15Ml的混合液中杀死并固定，24小时后移在盛有70%酒精的指形管中
27、。指形管口要加塞。最后将指形管缚于深蓝色玻璃片上，放在盛有70%酒精的小型标本瓶中保存。3.钩虫：采集后放在温和的0.5%的食盐水轻轻洗涤，然后用醋酸酒精（70%的酒精15份和醋酸1份的混合液）杀死并固定，固定24小时后，移入新的70%酒精中保存。4.线虫,二、蛔虫标本的制作 1.蛔虫内脏解剖浸制标本 取材、清洗用70%酒精杀死解剖-用5%福尔马林初步固定1日缚于载玻片上-5%-10%的福尔马林中固定2-3月-（为了便于观察，固定后可将材料拿出来放在空气中干燥一定的时间，然后对肠、子宫、阴道、唇等部分进行适当着色）再用新的同浓度的福尔马林保存。,2.蛔虫横切片制作（1）取材、固定。（2）脱水、
28、透明。（3）浸蜡和包埋。（4）切片。（5）展片和贴片。（6）脱蜡。（7）将脱蜡的切片经各级浓度酒精逐渐下行至水。（8）染色。（9）复脱水。（10）复透明。（11）封片。,第六节 环节动物的采集和标本制作,一、环节动物的采集采集种蚓可通过以下途径进行：1.利用雨后时机采集。当夏季大雨后，蚯蚓多爬出地面，此时去农田附近寻找，很容易找到，尤其是在一些石块和烂草、落叶堆下，常有大量蚯蚓聚集。,2.利用农田翻土时机采集。农田中的蚯蚓，大多生活在耕作层，一旦农田翻土，常被翻出土外，此时正是采集蚯蚓的好时机。3.根据蚓粪采集,二、蚯蚓的培养1.培养容器：培养蚯蚓有坑养、箱养、盆养三种方式。如果不是为家禽饲养
29、提供饲料，可采用箱养和盆养方式。培养容器准备好后，将肥土和烂草、落叶搅拌混合，放入容器内，再把采集的蚯蚓放入土中。2.饵料配制与投喂：为了使蚯蚓迅速生长繁殖，应投喂营养丰富的发酵饵料。发酵饵料的配制方法是，收集杂草、树叶和家畜家禽粪便，将草料和粪便分层相间堆集，草料层的厚度约为6-7cm,粪便层厚度约为1-2cm。每铺3-5层，浇一次透水。最后将堆料表面拍打严实，以促使堆料分解。大约经过十几天，就能完成发酵。,3.日常管理：土壤是蚯蚓最重要的环境条件，它的温度与湿度直接影响蚯蚓的生长发育。蚯蚓要求土壤温度的范围是15-30之间，最适温度为25左右。如果土温降到12以下，蚯蚓就会停止繁殖，土温超
30、过35，蚯蚓就有热死的危险。蚯蚓喜怕干，要求土壤潮湿。对蚯蚓最适的土壤湿度是30%-40%。,三、蚯蚓及其他环节动物标本的制作1.蚯蚓整体浸制标本制作对培养的蚯蚓，如需制作标本，留待将来观察内部结构，可以做成浸制标本。标本制作要经过停食、麻醉、固定和保存4个步骤。（1）停食。（2）麻醉：用清水将蚯蚓清洗干净后放在瓷盘内，并向瓷盘内加水，水面刚好浸没蚯蚓身体为止。用滴管逐滴加入95的酒精，半小时内使瓷盘中的酒精含量达到10。注意：酒精不能一次性到人，也不能直接滴在蚯蚓身体上，在滴加的过程中要不断振荡瓷盘。（3）注射固定：用注射器由蚯蚓体后35节处向前插入其体腔内，向体内注射混合液(清水60份，甲
31、醛12份，95酒精30份，甘油2份)，至前叶突出停止注射。（4）保存：将注射后的蚯蚓，平放在纱布上，大约每20-30条裹成一卷，使其竖立在标本瓶中，然后加上述固定液，可长期保存。或保存在保存液(8甲醛和80酒精等量混合液)中。,2.蚯蚓的内脏解剖浸制标本3.蚯蚓横切片制作4.其他环节动物标本制作（1）沙蚕（2）蛭类,第七节 软体动物的采集和标本制作,一、软体动物的采集1.蜗牛：各种蜗牛都生活在陆地，喜欢阴湿地方，夏季夜晚或阴天雨后出来活动，在一些山坡、草地、农田、菜园等处常可遇到。,发现后，可从其附着的物体上直接取下，放在盛满冷开水的广口瓶中，把瓶盖盖紧，静置24-36小时，使其被窒息而死。,
32、2.田螺：生活在淡水池沼或水田中，在水中有时附着于其他物体上，有时也在水底缓慢地爬行。采集时应用水网捞取，必要时也可用手去拿。获取后，先放在清水中静置，待腹足伸出后，把氯酸古柯碱溶液轻轻地滴在水中。经过一定的时间，用玻璃棒或其他细杆触动检查，如果田螺无任何反应，证明已经麻醉了，这时需要再往水中加入适量的麻醉剂和再等些时间。待麻醉后，移至70%酒精或5%的福尔马林中杀死并固定。固定约需3-4天。固定后，粘于或缚于玻璃片上，用70%-80%的酒精或5%-7%的福尔马林保存。,3.蛞蝓：多生活在阴湿的环境，在一些阴湿处的树丛、草丛和石块下面以及农田等处常被发现，有时也在一些蘑菇上发现。发现后，用手或
33、竹片夹轻轻地从附着物体上取下，放在瓶子里的湿棉层上，然后用双层纱布盖在瓶口上，扎紧，带回处理。,4.河蚌：采集时，应到水流缓慢、泥沙水底、浮游生物丰富的淡水水域中去寻找。如果水质清澈见底，往往能从水底发现它们半埋在泥沙中的身体；如果水质混浊，可用拖网拖取。,河蚌离水后，虽然还能生活一段时间，但为了保持它们良好的生活能力，应该将采集的河蚌及时放入盛有河水或池水的容器中带回,二、河蚌、蜗牛等软体动物标本的制作1.河蚌（1）整体浸制标本制作麻醉：将河蚌与55摄氏度温水放在一起搅动，使水温均衡。放置30分钟左右，此时不要搅动，使河蚌的斧足伸出。当河蚌对外界的刺激反应缓慢或不反应即可。注射：用注射器向河
34、蚌体内注射混合液(78福尔马林)，平均每个注射1020ml，再保存于保存液(78福尔马林)中。（2）解剖浸制标本制作,2.蜗牛蜗牛浸制标本的制作：制作蜗牛浸制标本的关键是处死、整形。蜗牛身体受到药剂的刺激后，整个身体缩进螺壳，这样做成的标本不能反映蜗牛的真实形体。处死时可以就蜗牛直接浸在盛满冷水的玻璃杯内，上面盖一块玻璃。玻璃杯内不要有空气泡。一般一个晚上蜗牛整个身体伸在螺壳外面，用针刺激不收缩，这时蜗牛已经死亡。用注射器往蜗牛体内注射浓度酒精少许。接着将蜗牛浸泡在浓度酒精中一天进行固定。经固定后的蜗牛用丝线绑在玻璃片上，放入标本瓶，用浓度酒做保存液。这样的蜗牛浸制标本身体、触角伸展，形态逼真
35、。,3.海产软体动物（1）石鳖（2）腹足类和双壳类（3）头足类4.螺类、贝类：种类多，壳形结构和壳色等是分类的重要依据。因此制作螺类、贝类的标本，无论在教学上还是科研上都具有重要意义。,第八节 节肢动物的采集和标本制作,一、昆虫的采集1.昆虫挑选的标准：能够做标本的昆虫要完整而无破损，这样才有观察研究的价值。昆虫有变态习性，同一种昆虫有不同形态，各形态和各阶段的昆虫都要采集，以便做生活史标本。2.采集方法（1）网捕法：（2）扫捕法：（3）振落法：（4）搜捕法：（5）诱捕法：（6）水栖昆虫的采集：,3.采集的季节、时间、地点及环境（1）季节：每年的晚春、早秋是采集昆虫的最好季节。（2）时间：采集
36、时间要根据各种昆虫的生活规律而定。（3）地点：依据昆虫的种类而定。（4）环境：昆虫栖居的环境多样。4.采集昆虫应注意事项：采集时要全面、要细心。注意采集昆虫不同发育阶段的个体。注意标本的完整性。同时、同地所采标本要单独一处存放，不要混放 及时、完整、全面的记录。,二、昆虫标本的制作（一）干制标本的制作方法 1.软化 2.针插标本（1）不需展翅的昆虫标本制作（2）较小昆虫标本制作（3）展翅的昆虫标本制作法（二）浸制标本制作方法 1.浸制保存液 2.浸制方法（三）幼虫标本的制作 1.吹胀法 2.昆虫幼虫浸制标本的制作：昆虫具外骨骼，成虫一般都制成干制标本。幼虫虽然可用吹胀法制成干制标本，但手续较模
37、范，因此幼虫一般都制成浸制标本保存。,（1）普通昆虫幼虫浸制标本的制作：将采集到的昆虫幼虫置容器中绝食一天左右，体内粪便排泄干净，然后投入沸水中煮一下，时间灵活掌握，虫体膨胀即可。最后用70-75%酒精液永久保存，酒精液中加数滴甘油更好。也可以用6-8%甲醛水溶液保存。（2）昆虫幼虫保色浸制标本的制作：躯体具色彩的昆虫幼虫，如用平常的保存液都不能保色，仅作解剖或一般无色保存用。因此应采用保色浸制液来浸制。可先将绿色、黄色幼虫,从肛门注入相应的注射剂，直至虫体死亡为止。然后放阴暗处一小时左右。再浸入冰醋酸、福尔马林、白糖保存液永久保存。红色幼虫可以直接用硼砂、酒精保存液。,a、绿色幼虫注射剂：酒
38、精（95%）90毫升；甘油2.5毫升；冰醋酸2.5毫升；福尔马林2.5毫升；氯化铜3克。b、黄色幼虫注射剂：苦味酸（饱和液）75毫升；福尔马林2.5毫升；冰醋酸5毫升。c、冰醋酸、福尔马林、白糖保存液：冰醋酸5毫升；福尔马林2毫升；上等白糖5克；蒸馏水100毫升；甘油2毫升。d、硼砂、酒精保存液：硼砂2克；酒精（50%）100毫升。（四）昆虫生活史标本的制作（五）昆虫器官装片制作 1.蜜蜂后足装片 2.昆虫咀嚼式口器装片,（六）“琥珀”标本：已经发现的最好的蚂蚁化石，是在琥珀里。”科学六年级上册p92。你想有一块琥珀蚂蚁化石标本吗？当然我们没有真正的琥珀，我们只能用其它材料来代替琥珀，制作人造
39、琥珀标本。1、主要材料：蚂蚁、特等松香、酒精等；2、制作过程：（1）取蚂蚁用开水汤死，放塑料泡沫板上，用大头针拨动六足呈爬行状。并固定干燥；（2）取硬纸板做一个2X3厘米纸盒，纸盒内壁涂刷一层植物油，将干燥后的蚂蚁放纸盒中；,（3）将特等松香加1/10酒精一起放小烧杯中，用酒精灯加热（松香、酒精易燃烧，注意安全），直到特等松香完全熔化，此时要注意观察松香中有无空气泡，有的话要用玻璃棒泼动，使气泡渗出。最后把松香倒入刷过油的纸盒内，将蚂蚁埋在松香中（要有足够的松香溶液，保证一次包埋成功）。等松香冷却后剥去纸盒，有小刀修理不整齐的地方，蚂蚁包埋标本初步制成。这时除走面外，其余五个面受纸盒影响不大透明，可以用手指蘸酒精在松香表面反复摩擦，直到松香块的六个面地透明。一个人造琥珀标本就做好了。（4）其它小昆虫如：瓢虫、蚱蜢、经整形、干燥后用同样方法制作,
