《血清碱性磷酸酶测定标准操作规程.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血清碱性磷酸酶测定标准操作规程.docx（2页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、血清碱性磷酸酶测定标准操作规程1.检验原理：(对硝基酚磷酸盐连续监测法)以磷酸对硝基酚二钠(PNPP)为底物，2氨基-2-甲基丙醇(AMP)为磷酸酰基的受体。在碱性环境，碱性磷酸酶催化PNPP水解产生的游离对硝基酚，对硝基酚在碱性溶液中转变成黄色。根据在405nm处吸光度增高速率来计算碱性磷酸酶的活性单位。PNPP+H2O9阻-对硝基酚+无机磷2试剂组成成分组成成分浓度RlAMP缓冲液200mmolL氯化镁200mmolL氯仿0.l%(vv)R2磷酸对硝基酚二钠200mmolL氯仿0.l%(vv)3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225C保存8小时，28保48小时,-20C保存7天，样本不可反
2、复冻融！4.检验方法；仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围样本参考范围(U/L)血清男性1-12岁50012-15岁75025岁以上40-150女性1-12岁50015岁以上40-1506.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(WV)的氯化钠溶液稀释样本。7. 2.单位换算：ukatL=UL*16.67*IO-38. 检验方法的局限性8.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊或以水空白在405nm处吸光度大于1.000时不能使用。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：R1：无色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无
3、色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。8. 2装量：不低于标识值。8. 3空白吸光度：在37、405rn处，光径IenI时，空白吸光度A1.0008. 4空白吸光度变化率：在37C、405nm处，光径ICm时，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，ZAminW0.005.1.1 5分析灵敏度：在405nm处,光径Icm时，测量120U/L的碱性磷酸酶时，吸光度变化4Amin20.015.8.6 线性范围：试剂的线性区间为25-750UL,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)25-100U/L区间内，线性绝对偏差不超过土10U/L；(100-750)U/L区间内,线性相对偏差不
4、超过10%。8.7 重复性:CV5%8. 8批间精密度:R10%8. 9准确度：相对偏差应不大于10%。8. 10稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月,取到期后一个月的试剂进行测试，应满足1-7、9的要求。8. 11PH值：Rl试剂的PH值范围是9.80T0.80。9. 临床意义:血清中的碱性磷酸酶由四种结构的基因型组成：肝-骨-肾型、肠型、胎盘型和来源于生殖细胞的变异型。碱性磷酸酶存在于成骨细胞、肝细胞、白细胞、肾脏、脾脏、胎盘以及前列腺和小肠中。其中肝-骨-肾型最为重要。碱性磷酸酶在胆汁淤积时升高，尤其是阻塞性黄疸时。在骨骼系统疾病如PagCtS病、甲状旁腺机能亢进、佝偻病和骨软化以及骨折和骨恶性肿瘤时碱性磷酸酶也会升高。另外，儿童和青少年的碱性磷酸酶活性也会升高，这是由于成骨细胞活性增高促进骨骼生长所致。
