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1、医学免疫学实验,第3次 免疫标记技术细胞免疫体外检测,录像(免疫标记技术)ELISA(操作,间接法检测抗-HBs)E-花环试验、淋巴细胞转化试验、大、小吞噬细胞(示教),Immunofluorescence,IF,酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays(ELISA),用酶标记抗原(或抗体)检测抗体(或抗原)。检测敏感度:ng/ml固相载体:聚苯乙烯微量反应板标记酶辣根过氧化物酶(HRP)碱性磷酸酶(AP)酶标仪读OD值,Sandwich ELISA,indirect ELISA,间接ELISA法检测血清抗-HBs,步骤加血清及对照第1孔,阴性对照,
2、加阴性对照血清1滴第2孔,阳性对照,加阳性对照血清1滴第3孔,待检血清,加待检血清50l第4孔,空白对照加酶结合物每孔加入酶结合物1滴(空白孔不加),混匀,封板,37C 30min洗板弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5 sec,甩干,重复3次。显色每孔加显色液A、B各1滴,混匀,封板,37 C 15min观察结果,免疫细胞功能检测,E花环形成试验淋巴细胞转化试验大、小吞噬细胞,T cell,CD2(SRBC receptor),E花环形成试验,淋巴细胞转化试验,T细胞,PHA,淋巴母细胞(体积增大,形态不整齐,核大,松散,有核仁,胞浆变宽,出现空泡),计算淋巴细胞转化率正常:6080,大、小吞噬细胞大吞噬细胞巨噬细胞小吞噬细胞中性粒细胞,