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1、临床实验室生物安全,一、总论,凡是为预防、诊断、治疗任何人类疾病或损伤、或者评价人类健康而对人体的物质进行生物、微生物、血清化学、血液、生物物理、细胞或者其他类型检验的部门，统称为临床实验室。,临床实验室每天要处理来自临床的标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法知其危险程度，因此，每个临床实验室每天都面临生物安全隐患。,临床实验室危害源,细菌,病毒,真菌,寄生虫,易燃性、腐蚀性、有毒性、强酸性化学品等,电器设备、辐射、噪声等,临床实验室生物污染的原因和种类,对空气的污染,对水的污染,对物体表面的污染,实验室排出及扩散出的空气是重要原因之一,医院污水,操作不当或感染性物质的溢
2、出造成地面、仪器等的污染,实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染。,实验室感染,实验室感染的途径,空气传播：接种环、吸管、注射器使用时经口传播直接接种：针刺、划伤等黏膜接触：如HIV能通过眼结膜进入人体节肢动物媒介,临床实验室安全管理,硬件管理,实验室设备,个人防护设备,一级防护,二级防护,软件管理：包括组织机构、管理制度、操作规程、人员素质等。,管理责任,实验室管理层对所有员工和实验室来访者的安全负责，实验室负责人应制定规定和程序，以确保实验室符合国家有关安全要求，并定期检查、维护、更新。,实验室标准操作程序（SOP）,根据实验对象、生物危害程度评估、研究内容和设备设施等特
3、点，对涉及的任何危险以及如何在风险最小的情况下开展工作的详细作业指导书。,实验室人员培训制度,持证上岗新工作人员经过培训通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作1个月，才能获得上岗证。所有人员每年至少要接受一次新的培训建立并保存人员培训和考核记录档案,实验室设施设备监测、检测和维护制度,特别关注高效过滤器、高压灭菌器的检查、维护和更新生物安全柜检测高压灭菌器定期检测灭菌效果,安全记录,职业性疾病、伤害和不利事件记录,危害评估记录,危险标识,危险废弃物记录,事件、伤害、事故和职业性疾病的报告,实验室分区,清洁区(工作区)：包括办公室、休息室、培养基室等半污染区（防护区）：包括缓冲间、更衣室和卫
4、生通道等污染区（核心工作间）：包括样本收集区、处理区、培养区和废弃物处理区等,实验室的出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备。,出口通路,临床实验室工作人员安全的一般要求,食物不能存放在血液或其他有潜在传染性的材料存放处，应禁止在实验室工作区内吸烟 工作区内应禁止化妆（手霜除外）和处理隐形眼镜 不应佩戴戒指，耳环，腕表和手镯等,利器，包括用过的针头不应折断、重新戴套或被动戴套。应鼓励所有实验室工作人员接受免疫以预防其可能被接触的生物体感染。丢弃的利器应立即放入耐扎容器中 所有离心机应该有封闭的盖子，旋转时不能掀开,禁止使用口吸吸液所有样本和废弃物应假定含有活性病原体，应以安
5、全方式处理。所有进行涡流搅拌的样本应置于有盖容器内 标本应以确保承运人员、公众和接收实验室的安全的方式运送，并遵守法规要求（危险物品运输法规）,二、临床实验室生物安全管理措施,临床实验室理化安全准则,临床实验室生物安全防护,临床实验室废物处理通则,临床实验室生物安全防护,实验室生物安全防护（biosafety containment for laboratories）是指实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、个体防护装置、严格遵守标准化操作程序和规程确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。,病原微生物危险度分级,WHO&通用要求 危
6、险度14级(渐高)条例 危险度一四类（渐低）危险度1级 无或极低的个体和群体危险 危险度2级 个体危险中等，群体危险低 危险度3级 个体危险高，群体危险低 危险度4级 个体和群体危险均高,临床检验相关生物危险等级分布,实验室生物危害评估,评估应从三个方面予以考量微生物的致病性和流行性实验室环境及实验室操作的特殊性实验室工作人员的免疫状态,在对相对信息了解较少时进行危险度评估时，应谨慎地采取一些较为保守的标本处理方法。在临床实验室，标本取自患者，处理此类标本时最低需要二级生物安全水平。,实验室生物安全防护水平,根据使用的一级和二级防护屏障的不同，实验室生物安全防护水平（biosafety lev
7、el,BSL）分为四级。按防护水平由低到高排列即：一级生物安全水平（BSL-1）二级生物安全水平（BSL-2）三级生物安全水平（BSL-3）四级生物安全水平（BSL-4）,一级生物安全防护（BSL-1）实验室 如用于教学的普通微生物实验室等，适用于非常熟悉的致病因子，在开放的实验台上开展工作。二级生物安全防护（BSL-2）实验室 实验人员接受过致病因子处理的培训，进行实验时，限制进入。某些可能产生传染性气溶胶的过程，应在生物安全柜中或其他物理安全设备中进行。,用于主要通过呼吸途径使人感染上严重的甚至是可导致生命危害的致病微生物及其毒素。,三级生物安全防护（BSL-3）实验室,适用于对人体具有高
8、度危险性的、通过气溶胶途径传播或传播途径不明的、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。目前世界上最先进的高危病毒实验室让梅里厄 P4实验室。,四级生物安全防护（BSL-4）实验室,1.澳大利亚：（1）Geelong澳大利亚动物健康实验室（VIC）。（2）Coopers平原昆士兰卫生署（QLD）的病毒学实验室。（3）国家高安全性实验室，维多利亚传染病参考实验室在北墨尔本（VIC）的主持下运作。2.法国LABORATOIRE P4让梅里厄在里昂。德国(1)菲利普斯的马尔堡大学病毒学研究所，(2)the Bernhard Nocht热带医学研究所在汉堡。意大利（1）拉扎罗斯帕兰扎尼医院国家
9、传染病研究所。（2）Polo Universitario-(Milano).美国保持至少8个生物安全4级设施，目前正在规划至少7个：,国际（BSL-4）实验室,防护装备,壁挂式洗眼器,护目镜,防护服,2003年7月23日，中国科学院与武汉市人民政府签署共建生物安全四级（P4）实验室协议书，这意味着中国内地首座P4实验室将落户武汉。,临床实验室基本安全操作规程,临床实验室标本处理 所有操作戴手套 采血人员受过培训 血清分离时注意眼和黏膜的保护 规范操作技术以减少气溶胶产生 使用消毒剂处理使用后的移液管和溢出标本,用于显微镜观察的盖玻片和涂片 应用镊子夹取，丢弃前应清除污染和高压灭菌。移液管和移液
10、辅助器的使用 禁止口吸，污染的移液管应完全浸泡在盛有消毒液的容器中。,锐利物品 禁止直接用手处理破碎的玻璃器具离心机 所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本，都应使用密封的离心管。,生物安全柜 保持负压 每隔一段时间应对其运行性能进行验证 可减少气溶胶暴露,有关实验室意外处理规程,泄露事故：立即清洗发生泄漏的区域，上报,吸净漏出的液体,清洗发生泄漏的区域,尽可能使用漂白剂、酒精或苯酚对工作台进行消毒,血液或其他体液发生泄漏或工作结束后，均应使用合适的化学杀菌剂对实验室工作区进行表面消毒。无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签。个人防护服装应定期更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染时，则应
11、立即更换。,锐器所致事故性划伤或擦伤 用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤；如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压。受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如75%酒精或0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口。随即向有关负责人报告,美国调查：医务人员中每年至少发生60万次钝器伤埃及：医务人员中69.4%一生中至少发生1次针刺伤，35.6%医务人员最近3个月曾发生过针刺伤；台湾：医务人员每年高达87.3%发生针刺伤和其他锐伤；医生中42.5%的锐器伤是侵入性操作；护士中39.1%锐器伤是处理针头；清洁工中95.4%是清理医疗垃圾污染的针头刺伤
12、。,锐器所致事故性划伤或擦伤,传染性物质溅入黏膜标本或传染性物质溅入黏膜或间接接触，应立即用专用装置清洗，再用滴眼液或漱口液清洗。向有关负责人报告。,微生物实验室相关安全准则,微生物实验室有关标志 在实验室门口应贴上生物危险标志，并显示以下信息:有关致病因子名称、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名电话、实验室中佩戴的个人设施、出入实验室的特殊要求与程序,微生物菌种的分类及保存 分类：依其危险程度的大小分为四类。保存：详细历史和实验资料；对菌种采取妥善可靠的保存；建立严密的安全保管制度。,临床实验室废物处理,废物（waste）：使用者不再使用的一切物品称为废物。,化学废物安全处理,感染性废
13、物安全处理,锐利物安全处理,无害废物处理,化学废物安全处理,1.废物分离:有害化学废物不能与一般废物、无害化学废物、放射性或感染性废物相混合。有害化学废物在产生后应分别收集、运输、贮存和处理。2.工程控制:通风措施、相对封闭及隔离系统、安全措施、防火措施和安全通道。3.操作控制:实验室应有完备的处理技术，以确保仪器、工作面和防护设备的污染在最低水平,4.化学废物处理的选择对无法确定特性的废物，不能做任何处理清除废物前尽量减少其有害程度严格禁止有害废料与一般废料或固体废料混合处理,感染性废物安全处理,感染性废物指能传播感染性疾病的废物 操作感染性或任何有潜在危害的废物时，必须穿戴手套和防护服。对有多种成份混和的医学废料，应按危害等级较高者处理。处理含有锐利物品的感染性废料时应使用防刺破手套。,感染性废料最常用的处置方法是灭菌和焚烧。,其储存地应有“生物危险”标志和进入管理限制。,实验室应有针对传染物泄露等的解决计划。,生物废物容器,废针头容器,生物危害样品转移箱,锐利物安全处理,锐利物指所有能穿透皮肤的物品。需与其他废物分别存放。针的处理 尽量减少对针具的操作，放入硬质、防刺破的容器内。,
