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1、移液器的原理及使用,讲述人:吴 昊,移液器的结构移液器的分类移液器的使用方法移液器使用的注意事项移液器的维护和保养,移液器的结构,移液器的分类,移液器按工作原理可分为:气体活塞式移液器 外置活塞式移液器,气体活塞式移液器,1 原理:活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸 液和放液。2 加样体积范围:1L10mL3 缺点:不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体易发生交叉污染错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等等,外置活塞式移液器,这种移液器是采用外置式活塞,活塞设计在吸头内部,直接与液体接触,活塞与液体之间没有空气段适用于粘度比较大或者产生气泡的液体的操作。无空气间隔,避免了样品于空
2、气接触可能发生的气雾交叉污染,因此也非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。,三、移液器的使用方法,一个完整的移液循环:枪头安装容量设定预洗吸头吸液放液卸去吸头,1、枪头安装,正确的安装方法叫旋转安装法 把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可。,切记用力不能过猛,更不能采取剁枪头的方法来进行安装,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住,严重情况下会将白套筒折断。,多道移液器装配枪头时,将移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍许摇动上紧,吸头插入后略超过O型环即可。
3、,2、移液体积设定,正确的体积设定分为两个步骤:粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值;细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响;,从大体积调节至小体积时,为正常调节法,调节到刚好就行;从小体积调节至大体积时,就需要先调节超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,可保证最佳的精确度。(这是由于计数器里面有一定的空隙,需要弥补)。,3、预洗枪头,在我们安装了新的枪头或增加了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让枪头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使
4、整个移液过程具有极高的重现性。在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。,粘稠液体可以通过枪头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出,枪头内壁会吸附一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。,4、吸液,先将移液器排放按钮按至第一停点,再将枪头垂直浸入液面,浸入的深度为:P2、P10 1 mm;P20、P100、P200 2 mm;P1000 3 mm;P5mL、P10mL 4 mm;浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的
5、浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握。,5、放液,放液时,枪头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略停顿后,再按至第二停点,这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话,就应该更换枪头了。,正向吸液:操作时吸液可将按钮按到第一档吸液,释放按钮。放液时先按下第一档,打出大部分液体,再按下第二档,将余液排出。反向吸液:吸液时将按钮直接按到第二档再释放,这样会多吸入一些液体,打出液体时只要按到第一档即可。多吸入的液体可以补偿枪头内部的表面吸附,反向吸液一般与预润湿吸液方式结合使用,适用于粘稠液体和易挥发液体。,6、卸掉枪头:,卸掉的枪头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉
6、污染。移液器用完后调回最大量程。,错误的操作方式:,五、移液器使用的注意事项,移液器是否漏气?1、目视法检测:将吸取液体后的移液器垂直静置15秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出,说明有漏气现象。(如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器,请将枪头浸入液面1-2毫米,静置20秒钟,观察枪头内部液面是否下降,如果下降了,就说明您手中的移液器出现漏液现象)。2、可能原因:,不可用大量程的移液器移取小体积的液体;吸液体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合不准确度和不精确度的要求。在设置量程时,所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。,吸液速度需缓慢 吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确。浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。,可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20时重0.9982g。,六、移液器的维护保养:,定期清洁我们手中的移液器,用酒精棉即可,主要擦拭外壳,既可以保持美观,又可以降低了对样品产生污染的可能性;在吸取过高挥发、高腐蚀液体后,应将整只移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆和白套筒内壁,并晾干后安装使用。以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀,损坏移液器。,谢 谢!,