自动生化分析仪.ppt

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1、全自动生化分析仪,南医大一附院医学检验科生化室徐俊荣,全自动生化分析仪参数设置,一、参数 指项目的仪器工作指令,是项目能正常测定的前提和基础。1.项目名称参数:全名,缩写,试剂代码,通道位置,盘号,报警标志,计算项目,组合项目等。2.项目测定参数:样品量,试剂量,波长,温度,分析方法,反应斜率,反应时间,速率法线性监测限,延迟时间,吸光度范围,线性范围,校正公式等。,全自动生化分析仪参数设置,3.项目报告参数:正常参考范围,危急值参考范围,小数点有效位数,单位等。4.计算项目参数:计算公式等。5.定标参数:1)定标品参数:名称,批号,效期,备注等。2)定标参数:定标方法,校准公式,定标次数,输

2、出方式,定标品位置,靶值,吸光度/因子范围。,全自动生化分析仪参数设置,6.质控参数:1)质控品参数:名称,批号,效期,备注,规则等。2)质控参数:位置,靶值范围等。7.试剂参数:试剂位置,名称,容量等。8.其他参数:报告单参数,数据传输参数,相互干扰参数,指定比色杯参数,特定搅拌参数等。,全自动生化分析仪参数设置,二、设置方法1.全名(long name):国际通用名。2.缩写(test name):惯用名,通常作为测定或报告的项目名。3.试剂代码(test code):可让不同项目共用同一代码,表明两项目共用同一试剂。(如血/尿淀粉酶),全自动生化分析仪参数设置,4.通道位置:内圈(inn

3、er),外圈(outer)或双圈(both)。5.盘号(round):将日常测定项目置同一盘上,而将非日常测定的项目(如试剂评估、项目评价、科研等)置另一盘上。运用时只需更换盘号和试剂,无需重设项目参数。6.报警标志(alarm shots):一般默认,全选。7.计算项目(calculate tests):此类项目是计算而非测定得出结果,故无需设置测定参数,而需设置计算公式(formula)。(如球蛋白、白/球比、间接胆红素等),全自动生化分析仪参数设置,8.组合项目(profile):可设置项目名称和包含的测试项目。(如血脂全套包括TC、TG、HDL、LDL、Lp(a)、ApoA1和ApoB

4、)有的仪器第一组合项目默认为所有测定项目,有的仪器则可设置;且当有标本而无测试要求时,仪器默认做第一组合项目。,全自动生化分析仪参数设置,9.样品量/试剂量(sample volume/reagent volume):按试剂说明书,严格控制比例,可相应扩大或缩小,并尽可能加样量最大。样品可预稀释(pre-dilution rate)。试剂可分单/双试剂(R1,R2)。对浓缩试剂可加稀释水(dilution)。,全自动生化分析仪参数设置,10.波长(wavelength):既可设单波长,也可设双波长(主/副,pri/sec)。主波长:被测物质特异光强度最大处。如NADH:340nm,PNP:40

5、5nm,Trinder产物醌亚胺:505nm,免疫比浊:340或600nm。设置双波长可有效消除干扰物影响(如溶血、黄疸、浑浊等),降低背景,还可消除光源的不稳定以及气泡等。,全自动生化分析仪参数设置,副波长设置原则为干扰物在主/副波长下吸光度相同。如NADH:380nm,PNP:480nm,Trinder产物醌亚胺:600nm,免疫比浊:660-800nm,未特指的比色或比浊:700-800nm。,全自动生化分析仪参数设置,11.温度:一般不可设,通常37。12.反应斜率(reaction slope):+表示吸光度上升,-表示吸光度下降。13.反应时间:即测定点(measuring poi

6、nt)。分析仪固定时间间隔测吸光度。如OLYMPUS AU5400间隔18秒读一次,共28次(0-27点)。加样和测试顺序为:加一试剂,测0点,加样品,测1-10点,加2试剂,测11-27点。,全自动生化分析仪参数设置,14.分析方法(method):按测定波长分:紫外分光,如NADH:340nm;可见光比色,如红色505nm,黄色405nm;比浊,以免疫透射比浊为主,如载脂蛋白。,全自动生化分析仪参数设置,按分析方法分:1)终点法(平衡法,END):通过测定反应开始至达到终点或平衡点时产物或底物变化量来求待测物的方法。A.一点法,适合快速达终点的化学反应,高酶催化的酶促反应,比浊反应等。,全

7、自动生化分析仪参数设置,B.两点法(固定时间法,FIXED),适合慢的化学反应,如苦味酸法测肌苷。,全自动生化分析仪参数设置,2)速率法(连续监测法,动力学法,RATE):通过连续测定酶促反应过程中某反应产物或底物的吸光度,以吸光度随时间的变化求出代测物的浓度或活性,适合大多数酶促反应。,全自动生化分析仪参数设置,如果测酶活性,计算方法有 绝对法酶活性U/L=A*(TV/SV)*(1000/)=A*F 相对法U/L或mmol/L=Au/As*Cs,全自动生化分析仪参数设置,A如何测?手工时,用两点速率法。,全自动生化分析仪参数设置,自动分析仪用多点速率法,每隔一定时间测一次,连续监测多次,计算

8、A/min,又分最小二乘法和多点法。,全自动生化分析仪参数设置,15.线性监测限(linearity limit)和延迟时间(no lag time):线性监测限通常设15%,分析仪自动舍弃少数偏离值,以大多数线性部分计算。若有延迟时间,分析仪则把开始阶段的非线性部分当做在延迟时间内而舍弃。但在发生底物消耗的反应时,会出错。,全自动生化分析仪参数设置,16.上述方法均有需消除样品空白的测定方法(END1,FIXED1,RATE1)。须设置空白测试(blank test)和显色测试(color test)。,全自动生化分析仪参数设置,17.吸光度范围:-0.22.0,超出2.0,将不符合郎伯-比

9、耳定律;负数为允许因比色杯或空白产生的差异,该结果实际可报告为零。18.线性范围(dynamic range):超出此范围,结果超出方法学线性,不可信,须稀释。19.校正公式(correlation factor):可输入校正因子A或截距B。,全自动生化分析仪参数设置,20.项目报告参数:正常参考范围(normal range),可报告总范围,也可按年龄和性别分类。危急值参考范围(panic value),为危急值的结果。小数点有效位数(decimal places),小数点后几位。单位(unit),最好用国际单位,如mol/L,mmol/L,g/L,U/L。,全自动生化分析仪参数设置,21.

10、定标品(calibrator)参数:名称(ID):如Roche CFAS。批号(Lot No.)效期(expiration),全自动生化分析仪参数设置,22.定标参数(calibration specific):定标次数:2次时,以平均值计算;3次时,舍弃离散最大值,另两次平均;4次时,舍弃最大和最小值,中间两次平均。输出方式:可以吸光度或浓度报告。定标品位置:在定标架上的位置。靶值:不同方法学时结果有差异。吸光度/因子范围,全自动生化分析仪参数设置,定标方法:MB,只做试剂空白,输因子,适合已知 而又无标准品的酶促反应。2MB-7MB,做试剂空白,分阶段输2-7个因子,极少应用。,全自动生化

11、分析仪参数设置,AB,做试剂空白,使用一个标准,一点定标,应用最广。,全自动生化分析仪参数设置,AA,使用高低两个标准,两点定标,适合标准为零时吸光度不为零的反应。,全自动生化分析仪参数设置,2AB-7AB,使用27个标准品,多应用在反应不为线性的比浊。,全自动生化分析仪参数设置,校准公式:线性校准:适合MB,AB,AA。y=ax+b 非线性校准:适合2MB-7MB,2AB-7AB。y=ax2+bx+c y=ax3+bx2+cx+dx=ay2+by+c x=ay3+by2+cy+dPolygonal SPLINE,全自动生化分析仪参数设置,23.质控品参数(QC common):名称:如BIO

12、 RAD。批号效期规则:如22s,13s,R4s,10 x等。,全自动生化分析仪参数设置,24.质控参数(QC specific):位置:在质控架上的位置。靶值范围,全自动生化分析仪参数设置,25.试剂参数:试剂位置:在1或2试剂舱内的位置。同一试剂可设多个位置。名称:选择项目缩写。容量:有15ml,30ml,60ml。,全自动生化分析仪参数设置,26.传输参数(online):可规定数据输入或输出的方式,如即时(real time)或批量(batch)。,全自动生化分析仪简单操作,1.开机。2.仪器自检,初始化,预热,稳定。3.选择新日期和时间以建立新的测定目录。4.配制并检查试剂。5.定标。6.质控。7.准备标本。,全自动生化分析仪简单操作,8.输入标本测试要求。9.放入标本,启动测定。10.查看结果,查看反应曲线,编辑修改结果。11.打印或输出报告结果。12.维护和保养仪器。13.关机。,生化分析仪,生化分析仪,进样和出样装置,标本在进样口,出样口标本,ISE装置,ISE内部结构,加样分析单元,反应比色杯,搅拌器,自动冲洗装置,试剂舱,

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