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1、茶树病虫害防治实验,指导教师:宁万光、周顺玉、胡肄珍、林继红,实验三、植物病害的症状类型观察,一、实验目的认识植物病害的主要症状,并对各类病害的典型症状有一概念,为田间诊断病害打好基础。二、内容说明植物病害的症状包括病状和病征。病状是指植物得病后本身所表现的反常状态;而病征则是指病部所构成的特征。本实验提供了各种病状,病征供同学们观察。三、材料与设备(一)材料1、病毒病 水稻黄矮病、烟草花叶病、香蕉束顶病、木瓜花叶病、白茶病毒病。2、细菌病害 水稻白叶枯病、白菜软腐病、番茄(或茄子)青枯病、茶根癌病。3、真菌病害 十字花科霜霉病、瓜类白粉病、小麦白粉病、小麦赤霉病、油菜菌核病、麦类黑穗病、玉米
2、黑粉病、稻瘟病、茶毛发病、茶线腐病、茶云纹叶枯病、茶饼病、茶轮斑病、茶果腐病、小麦各种锈病、茶(或桑)紫纹羽病、茄绵疫病。4、生理性病害 各种作物缺素症。(二)设备 手持扩大镜、双目镜、镊子、挑针、玻片等。,实验内容,仔细观察每一实物标本,明确其所属类型。(一)病状类型 常见的有下述类型。1.变色 取水稻黄矮病、烟草花叶病、白菜病毒病、缺素症枝叶等标本,观察叶片的颜色变化。2.坏死或腐烂 由于坏死组织的性质不同可以分以下几种:斑点:取茶白星病等材料,注意斑点的形状、大小、颜色。3.腐烂:分干腐和湿腐两种,取番薯软腐病、白菜软腐病等标本观察。立枯和猝倒:观察黄瓜猝倒病标本。4.萎蔫:观察番茄(或
3、茄子)青枯病、并与健株比较。5.畸形:观察瘤肿、丛枝、矮化、徒长、叶片畸形等。,(二)病征类型,絮状物:观察茄绵疫病标本,病部有无蜘蛛网状或絮状物。霉层:观察稻瘟病等标本。霜霉:观察十字花科蔬菜霜霉病标本,叶背面有无霜霉状产生?白粉:观察瓜类白粉病标本,白粉状物着生在何部?黑粉:观察麦类黑穗病。锈病:观察麦类锈病或豇豆锈病标本。颗粒状物:取茶轮斑病或黑痣标本观察,病部有无黑色小颗粒状物?菌核和菌素:观察紫纹羽病、毛发病、线腐病等标本,注意菌核的形态、色泽、大小。菌脓:植物病原细菌产生的脓状粘液。,作业,将观察标本的结果填入下表(至少填写10号标本),有性态布氏白粉菌属子囊菌亚门布氏白粉菌属;无
4、性态为半知菌亚门串珠状粉孢菌。,图2-4 小麦白粉病菌左.分生孢子和分生孢子梗(彷康振生等)右.闭囊壳及子囊,黄萎病:大丽轮枝菌半知菌亚门,棉花枯萎病原物为尖镰孢萎蔫专化型半知菌亚门镰孢属。,图6-1 棉花枯萎病菌1.小型分生孢子梗;2.大型分生孢子梗;3.大型孢子;4小型孢子,图6-2 棉花黄萎病菌1.分生孢子梗及分生孢子;2.干燥时分生孢子着生状;3.湿度大十分生孢子着生状(假头状着生)4.膨胀菌丝;5.厚垣孢子;6.拟菌核,瘤黑粉病原为玉米瘤黑粉菌属担子菌亚门黑粉菌属,丝黑穗病原为孢堆黑粉菌,属担子菌亚门孢堆黑粉菌属,图3-3 玉米丝黑穗病菌(示冬孢子及冬孢子萌发),条锈成行叶锈乱,秆锈
5、是个大红斑,条锈病菌:条形柄锈菌 秆锈病菌:禾柄锈菌 叶锈病菌:隐匿柄锈菌三种病菌均属担子菌亚门柄锈菌属。,病原为核盘菌属子囊菌亚门核盘菌属。,病原物为畸形外囊菌 子囊菌亚门外囊菌属,TMV引起的烟草花叶病,CMV引起的烟草花叶病,PVY引起的烟草花叶病,烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,简称TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,简称CMV)马铃薯Y病毒(Potato virus Y,简称PVY),线虫纲的根结线虫属 侵染所致,1.子叶的症状 2-3.叶片的症状 4.茎的症状5.棉铃初期症状 6.棉菱后期症状 7.病原细菌,棉角斑单胞杆菌细菌
6、,黄单胞杆菌属,其他一些例子,稻瘟病病原(稻梨孢),谷粒瘟,穗颈瘟,节瘟,叶瘟(白点型),叶瘟(褐点型),叶瘟(急性型),叶瘟(慢性型),苗叶瘟,稻瘟病坏死霉状物,无性阶段为半知菌亚门梨孢属灰梨孢菌 有性阶段为子囊菌亚门真菌,病原菌为黄单胞菌水稻致病变种 黄单胞菌属细菌,水稻白叶枯病坏死菌脓,无性态阶段为半知菌亚门立枯丝核菌;有性阶段为担子菌门亡革菌,水稻纹枯病坏死菌核,半知菌亚门,长孺孢属,坏死霉状物(黑绒),有性态为稻麦角属,子囊菌亚门麦角菌属;无性态为绿核菌,半知菌亚门绿核菌属,坏死粉状物,水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV),纤细病毒属(Tenuuivirus)。
7、,坏死、畸形无病症,有性态为玉蜀黍赤霉子囊菌亚门赤霉属,无性态为禾谷镰孢,半知菌亚门镰孢属。,坏死霉状物(粉红色),有性态为大斑病毛球腔菌,子囊菌亚门毛球腔菌属。无性态为大斑病突脐蠕孢 半知菌类突脐蠕孢属,病原物有性态为异旋孢腔菌,子囊菌亚门,旋孢腔菌属,不常见,无性态为玉蜀黍双极蠕孢,半知菌类双极蠕孢属。,坏死霉状物,坏死温湿度适宜时病斑上可产生灰色霉状物或散生黑色刺状物,病原物甘薯长喙壳,子囊菌亚门长喙壳属,有性态为瓜亡革菌,担子菌亚门亡革菌属。无性态为茄丝核菌,半知菌亚门丝核菌属,坏死丝状物,坏死黑色点状物(分生孢子盘)、桔红色粘状物(分生孢子团),有性态为围小丛壳,子囊菌亚门小丛壳属,
8、自然条件下很少发生,无性态为胶孢炭疽菌 半知菌亚门炭疽菌属,棉花疫病病菌:苎麻疫霉,半知菌亚门疫霉属。棉花红腐病病菌:串珠镰孢和禾谷镰孢等,半知菌亚门镰孢属。棉花红粉病病菌:粉红聚端孢,半知菌亚门聚端孢属。棉花曲霉病菌:黄曲霉、烟曲霉、黑曲霉,均属半知菌亚门真菌,疫病腐烂霉状物白色、疏松,红粉病腐烂霉状物粉红色、厚、疏松,红腐病腐烂霉状物粉红色、薄、致密,曲霉病腐烂粉状物霉状物,实验四、茶树病害主要病原物形态观察,材料与设备,(一)材料 病害新鲜材料、标本、挂图,病原菌玻片、多媒体课件等。(二)设备 显微镜、扩大镜、载玻片、盖玻片、镊子、挑针、解剖刀、小剪刀、培养皿、贮水小滴瓶、乳酚油滴瓶、新
9、刀片、毛笔等。,实验内容,(一)鞭毛菌观察1、游动孢子的观察 取一清洁凹载玻片,丁凹心处四周涂少量凡士林油备用;另取一张清洁盖玻片放平,在其中央滴加1滴蒸馏水,用解剖刀从霜霉病新鲜材料叶背面刮取新形成的孢子囊,置于盖玻片的小水滴中;接着将盖片翻转过来,轻轻放在凹玻片上,使盖片边缘与凹心周围的凡士林粘合,以防水滴蒸发,然后将玻片平放在培养皿内,于20左右的温度下经30min培养后镜检,即可看到游动孢子的形成。2、卵孢子观察 任取一种霜霉病的病斑枯死组织,剪成3-4mm见方的小块放在小试管内,随即滴入15KOH溶液(或加乳酚油亦可)于酒精灯上加热透明至枯死组织脱去黄褐色为止,冷却后取一小片病组织放
10、在载玻片中央,滴一滴蒸馏水或乳酚油,加盖玻片镜检组织内的卵孢子。3、孢囊梗和孢子囊的观察 用挑针挑取瓜果腐霉菌的絮状菌丝体于载玻片水滴中,加盖玻片制成临时装片进行镜检,观察菌丝体、孢囊梗与孢子囊。也可用解剖刀从霜霉病材料背面剖取霉状物,制成临时装片观察孢囊梗和孢子囊。,(二)接合菌的观察,1、营养体和无性繁殖体观察 用丛根霉菌体材料,用挑针挑取孢子囊呈白色和黑色的分别制成临时装片,镜检比较其区别,注意匍匐菌丝有无分隔、假根形态、孢囊梗着生部位,黑色孢子囊破裂后,散出孢囊孢子形态、大小、色泽。2、接合孢子观察 镜检根霉菌接合孢子装片。,(三)子囊菌观察,1、子囊菌菌丝体及无性孢子观察 挑取白粉病
11、病叶表面的白色粉霉状物制片,置显微镜下观察,注意菌丝有无分隔,分生孢子梗形态及分生孢子着生情况。观察白粉病病菌菌丝伸入寄主组织的吸器。2、子囊菌有性孢子及子实体观察 观察白粉菌的闭囊果挑取白粉病病叶表面的黑色小颗粒制片,在低倍镜下观察闭囊果的形态、颜色。用挑针在闭囊果上方的盖玻片上轻压,挤出闭囊果中的子囊;观察白粉病菌闭囊果内子囊的数目。3、观察小麦赤霉病子囊壳形状及着生情况及其内子囊着生情况(示范)。4、观察子囊盘形状及着生情况(示范)。,(四)担子菌观察,1、锈菌冬孢子萌发的观察 结合当地情况任选一种冬孢子萌发材料(如桧柏上梨胶锈菌的冬孢子角),用挑针挑取萌发的冬孢子少许,制成临时装片镜检
12、,观察担子的分隔,担孢子的数目及形态特征。2、夏孢子堆的观察 任选一种夏孢子堆尚未破裂的小麦秆锈,叶锈或条锈病材料,制成临时装片镜检。3、冬孢子的形态观察 取麦类锈病、蚕豆锈病或菜豆锈病带冬孢子堆的材料,用解剖刀刮取冬孢子制片进行观察。4、担子菌大型子实体观察,观察木耳、灵芝及蘑菇的外部形态。,(五)半知菌的观察,1.观察茶轮斑病病叶的症状特点,注意病部的黑色小粒的着生情况,用挑针或用刀片切取小黑粒,在镜下观察,注意分生孢子形状、大小及颜色。2.观察黑腐病病菌的菌丝分枝角度和分枝交界处的缢束现象。3.病组织内菌体观察,为了能真切地看清菌体,除用切片法观察外,有的材料需要进行透明而后观察,较常用
13、的透明方法是水合氯醛法。,(六)细菌基本形态的观察取纽菌三种形态的装片镜检。,革兰氏染色反应的观察(1)涂片 取两块清洁的载玻片平放桌面上各滴加l滴无菌水,用接种环分别从新鲜材料溢脓处和菌种中挑取少量细菌,涂成菌膜。(2)固定 将涂片在酒精灯火焰上方通过数次,使菌膜干燥固定。(3)染色(1)在菌膜上加1滴结晶紫液染色1min;(2)用洗瓶把多余的结晶紫液轻轻冲去,加碘液冲去残水;(3)再加1滴碘液媒染1min;(4)再水洗去碘液,滤纸吸去多余水分;(4)滴加95酒精,脱色20-30s。;(6)用水洗去酒精,滤纸吸干后再以藏花红复染0.51min;(7)用水洗去复染剂,吸干备用。(5)镜检从低倍
14、镜到高倍镜,细菌被染成蓝紫色,为革兰氏染色阳性反应,红色为阴性反应。(6)细菌的鞭毛观察用示范片供镜检。,(七)线虫的观察,取花生根线虫或茶苗根结线虫病材料,以挑针轻轻挑开根结,小心挑取乳白色小颗粒状物,置于载玻片中镜检,观察呈梨形的雌虫的特征;另将虫瘿用挑针压碎,注意找出呈线状的雄虫,观察其特征。,(八)寄生性种子植物的观察,观察所给寄生性种子植物的标本,注意其特征。,作业,1.绘霜霉病菌形态图。2.绘根霉菌匍匐菌丝、假根、孢子囊、孢囊梗、孢囊孢子及接合孢子的形态图。3.绘子囊壳、子囊盘、子囊和子囊孢子形态图。4.绘散生的分生孢子及分生孢子梗、分生孢子盘及分生孢子器的形态图。5.绘一种细菌形
15、态及鞭毛着生位置图。6.绘茶苗根结线虫雌、雄成虫形态图。,孢囊梗二叉状锐角分枝,末端尖细,萌发形成芽管。白菜霜霉病-霜霉属,孢子囊梗主干单轴分枝,然后作2-3回不完全对称的二叉状锐角分枝,末端尖细。黄瓜霜霉病-假霜霉属,孢囊梗二叉状锐角分枝,末端膨大呈盘状。莴苣霜霉病盘梗霉属,孢囊梗单轴直角分枝,分枝末端平钝。葡萄霜霉病单轴霉属,甘薯软腐病根霉菌形态图结合菌亚门黑根霉属,马铃薯晚疫病鞭毛菌疫霉属,甘薯黑疤病子囊菌长喙壳属,烟草白粉病子囊菌白粉菌属,小麦白粉病子囊菌布氏白粉菌属,瓜类白粉病单丝壳属,苹果白粉病叉丝单囊壳属,葡萄白粉病钩丝壳属,梨树白粉病球针壳属,辣椒炭疽病半知菌炭疽菌属,芹菜枯斑
16、病半知菌壳针孢属,实验八 茶树叶部病害的识别,一、实验目的掌握与认识茶树叶片受不同的病原真菌侵害后,表现出来的症状和病原物的形态特征。二、内容说明茶树叶部的病害种类很多,较常见的有茶饼病、云纹叶枯病、轮斑病等10多种,通过本实验,应该对这10多种病害有所认识。三、材料与设备(一)材料 茶饼病、网饼病、白星病、圆赤星病、云纹叶枯病、轮斑病、炭疽病、茶赤叶斑病、褐色叶斑病、煤病、藻斑病等蜡叶标本,新鲜材料,病原菌封片。(二)设备 显微镜、载玻片、盖玻片、手持扩大镜、蒸馏水、挑针。,四、步骤及方法,(一)茶饼病的观察 1、症状 取茶饼病标本观察。叶片初生淡黄色水渍状病斑,圆形凹陷,相应的背面突起呈馒
17、头状,表面有白色粉霉,后变暗褐色,叶片畸形扭曲。芽和枝梢受害,肥肿呈瘤状,生灰白色粉状物。2、病原 属担子菌。取新鲜病叶,刮取病斑子实层装片镜检,注意观察棍棒状或圆筒状的担子,顶端有24个小梗,每个小梗上着生一个担孢子;担孢子肾脏形或椭圆形,无色,初为单孢,萌发时产生一个隔膜而成双胞。(二)茶网饼病的观察 请用网饼病材料跟茶饼病进行对比,注意发病部位、病斑色泽、形状、病原菌的差异情况。,(三)茶云纹叶枯病的观察 1、症状病斑发生在叶尖或叶缘部分,近圆形或不规则形,淡绿致褐色,后变灰白色,形成浓淡相间的云纹状,其边缘暗褐色,有不明显轮纹,黑色小点散生或轮状排列。2、病原有无性世代和有性世代,注意
18、观察之,可取新鲜材料,徒手切片后制成临时装片镜检,观察子囊盘、子囊、子囊孢子或分生孢子盘、分生孢子等形态特征。(四)茶炭疽病的观察 1、症状 初在叶尖或叶缘部分产生水渍状暗绿色症斑,扩大后可蔓延至叶片一半,由焦黄色变成黄褐色至红褐色;病斑边缘有黄褐色隆起线,与健部分界明显,后期病部生有细小黑点。2病原 属半知菌、盘圆孢属,取炭疽病材料徒手切片后制片镜检。,(五)轮斑病的观察 1、症状先由叶尖或叶缘产生边缘不明显的黄褐色小点,以后渐扩大成近圆形,半球形或不规则形大斑;色泽由褐色发展成灰白色,具有同心轮纹,病斑上小黑点也呈同心轮纹排列,病部与健部分界明显。2、病原属半知菌,取病部小黑点装片镜检,观
19、察分生孢子盘、分生孢子梗、分生孢子形状,注意分生孢子有多少隔膜,分成几个细胞,有无附属丝。(六)茶白星与圆赤星病将两者发病材料进行对比,注意发病部位、病斑大小、颜色、病征的区别。从病部刮取或切片装片进行镜检,观察病原菌形态。,(七)赤叶斑病与褐色叶斑病观察两者病叶,注意病斑发生的部位、形状、颜色、病征特点。将褐色叶斑病病叶上的灰色霉层制片镜检。将赤叶斑病病斑上小黑点用徒手切片装片镜检。(八)茶藻斑病 症状:叶的正反面均可表现症状,但以叶面为主。初为黄褐色针头状小圆点,后呈放射状向四周扩散,形成近圆形灰绿色毛毡状物,稍隆起且具纤维状纹理。病原:属藻类,病部的毛毡状物是藻类的营养体和繁殖体。刮取毛
20、毡状物装片镜检,观察孢囊梗和游动孢子囊及游动孢子。,(九)茶煤病 症状:叶片或枝干上初生圆形或不规则形小霉斑,后扩大布满全叶或枝干上。病原:观察玻片标本。(十)茶芽枯病 症状:发生于嫩梢芽叶上,叶尖、叶缘、芽尖呈现黄褐色、枯焦状、萎缩、扭曲,后期病害表面散生细小黑色小点。病原:属半知菌。取新鲜材料,挑取病部小黑点,用刀片切成薄片,装片镜检,观察其分孢器,分生孢子。,五、作业,1、绘云纹叶枯病病菌形态图。2、绘茶轮斑病病菌形态图。,轮斑病-1分生孢子盘2.分生孢子,1,2,云纹叶枯病1、分生孢子盘2、局部放大3、子囊果4、子囊、子囊孢子,实验九茶树枝干病害与根部病害的识别,一、实验目的 认识茶树
21、上一些典型的茎,枝干病害和根部病害,掌握其病状、症征。二、内容说明 茶树枝干上发生的病害大致分三种类型,一为既侵害枝干,又为害叶的,枝叶同时受害。二为单独在枝干上发生;三为寄生或附生于枝干的种子植物。而引起茶树根部发病的病原有细菌、线虫和各种真菌,苗期以根线虫和根癌肿较普遍和严重,热带地区红根腐是一种多发病害。本实验选取常见的,较为重要的枝干病害与根部病害进行观察。三、材料与设备(一)材料:茶树病害标本与新鲜材料,病原菌封片,挂图、多媒体课件等。(二)设备显微镜、手持扩大镜、挑针、解剖刀、剪、刀片、载玻片、盖玻片、蒸馏水、搪瓷盘等。,枝梢黑点病症状:在当年生半木质化新梢上,呈现不正形灰色斑块,
22、病健部分界不明显后期病斑表面散生椭圆形黑色小点。病原:属子囊菌,将材料针对有小黑点处用徒手切片,切取薄片装片镜检,观察其子囊盘、子囊和8个内生的子囊孢子。(三)茶立枯病症状:发生于枝干的病斑近圆形或椭圆形,略凹陷、褐色,具明显的褐色边缘,后期病斑表面散生黑色小黑点。病原:切取小黑点,作徒手切片,制成临时装片,镜检。子囊壳生在子座内,扁球形,子囊棍棒状或圆筒状,内有8个长棍棒状的子囊孢子。(四)粗皮病症状:发生于老茶树下部枝干上,病部灰绿色,表面散生许多灰黑色圆形小突起,后突破表皮,表面较粗糙,近黑色。病原:在病斑黑色突起部分切取一小块,作徒手切片,装片镜检,观察子囊盘,子囊、侧丝和子囊孢子,茶
23、黑痣病取发病材料,观察其症状、病原,注意与茶立枯病及粗皮病比较。(六)黑腐病与线腐病观察两种黑腐病的蜡叶标本,注意其症状的异同。用示范片观察两种黑腐病的菌丝、担子、担孢子和菌核黑腐病的菌核。观察与比较寄生性线腐与附生性线腐的症状区别。观察附生性线腐病的子实体液浸标本。(七)茶膏药病病原菌寄生在茶树枝干上的介壳虫分泌物上,常常先产生白色绵毛状物,不久中央现暗色,以后以暗色部分为中心,向四周伸出有光泽的丝状物,很象贴上去的膏药,膏药呈圆形,中央稍厚,周围薄,颜色渐变为紫褐色至紫黑色。(八)茶毛发病观察枝干上缠绕着许多散乱无序的漆黑色毛发状物,此即为病原菌的菌丝索。(九)胴枯病症状:病害发生在当年生
24、枝条上,在半木质化的红棕色枝干的近基部形成褐色近椭圆形病斑,略凹陷,生上小黑点,严重时上部枝干枯死。病原:用示范片观察其分生孢子器,分生孢子梗和分生孢子。,(十)菟丝子菟丝子为一年生攀藤寄生性种子植物,没有根和叶,叶片退化成鳞片状,茎线状,黄或微红色,花黄白色,蒴果褐色、有棱角。注意观察吸盘。(十一)苔藓和地衣观察植物体黄至绿色,苔状或丝状,平覆或直立于枝干上,质地松软,为苔藓类。地衣呈壳状紧贴于枝干上。质地较硬脆。(十二)茶苗根结线虫病病状:观察茶苗根结线虫引起的病株的地上部和地下部表现。病原:在玻片上滴一滴水,将根部的瘤放人,用解剖针慢慢撕开或用小刀将其压碎在显微镜下观察,找出线状的雄虫和
25、呈梨形的雌虫。(十三)茶苗根癌肿病症状:观察扦插苗根部受害后的癌肿病状表现。病原:用示范玻片观察病原细菌。(十四)紫纹羽病症状:观察根部、根颈处,细根、粗根的表现,注意其上布满的紫褐色丝状物和颗粒状的菌核,茎基部有较厚的紫红色的毛毡状菌丝层。病原:观察示范玻片。,(十五)茶红根腐病症状:病树突然死亡,凋萎的叶片仍附着在树上一个时期(可用现场拍摄的图片显示之),病根最明显的特征是根表有枣红色的菌膜,树皮与木质部间产生一些白色的菌丝薄膜。病原:用示范片观察(十六)其他根腐病的观察 观察褐根腐、黑纹根腐、臭根腐、白纹羽病、茶苗白绢病等几种根病,注意其症状表现有何区别。,五、作业,1、绘红锈藻病病原藻形态图。2、描述根结线虫病的地上、地下部症状,绘茶苗根结线虫雌、雄线虫图。,1地下根部:形成肿瘤,形似黄豆、菜籽等,且大小不一,受害根系无须根,畸形,2地上部分:生长不良,植株矮小,生长衰弱,叶片发黄,干旱季节叶片易大量脱落而枯死。,实验一 9月18日实验二 9月25日实验三 10月15日实验四 11月5日实验五 12月2日实验六 12月4日实验七 12月9日实验八 12月24日实验九 12月31日,